The involvement of the relA and rsh genes in the morphological and physiological differentiation of Streptomyces clavuligerus was evaluated with the relA and rsh genes mutants. The morphological differentiation of S. clavuligerus was greatly affected by the disruption of the relA gene, but not very much by the disruption of the rsh gene. The altered morphological characteristics were completely restored by the complementation of the corresponding disrupted genes. Thus, it was apparent that the mycelial morphology and clavulanic acid production were severely affected by the disruption of the relA gene. Production of clavulanic acid in the submerged batch culture and glycerol-limited chemostat showed that production was inversely related to the specific growth rate in the wild-type strain. However, the production of clavulanic acid in the ${\Delta}relA$ and ${\Delta}rsh$ null mutants was completely abolished. Therefore, it seems plausible that the stringent response of S. clavuligerus to starvation for amino acids is governed mainly by ReIA, rather than Rsh, and that the (p)ppGpp synthesized immediately after the depletion of amino acids triggers the initiation of pathways for both morphological and physiological differentiation in this species.
Among commercially available five different types of micro-carriers, collagen coated Cytodex III supports the best cell growth and production of Tissue type Plasminogen Activator from fibroblasts for all three various kinds of media(FBS, horse serum containing and serum free medium). 95% of attachment yield is obtained with Cytodex III in FBS containing medium compared to about 70% in serum free medium. However, higher production of TPA can be observed in horse serum containing and serum free media as $1.2\;\mu\textrm{g}/\;ml$ and $0.7 \mu\textrm{g}/\;ml$, respectively with $5.5{\times}10^6$ cells/ ml and $0.7{\times}10^6$ cells/ ml under perfusiom chemostat operations.
It was investigated that the influent sugar concentration and the dilution rate have an influence on the ethanol fermentation characteristics at steady state in a chemostat culture of K. fragilis using Jerusalem Artichoke juice as substrate. And also the optimum condition of high ethanol productivity and low residual sugar output in the ethanol production by K. fragilis, was clarified to be given at a dilution rate of 0.22/hr and at an influent sugar concentration of 85g/l.
KIM DAE-SUN;PARK YONG-IL;LEE HYANG BURM;KIM YOUNGJUN
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.15
no.3
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pp.678-682
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2005
The promoter region of a carbon starvation gene isolated from Pseudomonas putida was cloned and analyzed for its potential use for in situ bioremediation and bioprocessing. We constructed a recombinant plasmid pMKD101 by cloning the 0.65 kb promoter region of the gene into the promoter proving vector, pMK301, which contains the lacZ for ${\beta}$-galactosidase activity as a reporter gene. pMKD101 was transformed into the wild-type P. putida MK1, resulting in P. putida RPD101, and analyzed for ${\beta}$-galactosidase activity under different culture conditions. When RPD101 was grown on the minimal medium plus $0.1\%$ glucose as a sole carbon source in batch cultures, ${\beta}$-galactosidase activity was found to be 3.2-fold higher during the stationary phase than during the exponential phase. In chemostat cultures, ${\beta}$-galactosidase activity was found to be 3.1-fold higher at the minimal growth rate (dilution rate=$0.05\;h^{-1}$) than at the maximal growth rate (dilution rate=$0.173;h^{-1}$). The results suggest that a carbon starvation promoter can be utilized to maximize the expression of a desired gene under nutrient limitation.
Geosmin and 2-methylisoborneol (2-MIB), responsible for earthy or musty smell, are a major concern for safe drinking water supplies. This study investigated the effects of environmental factors on odorous compound production and cell growth in cyanobacterial strains. Anabaena sp. FACHB-1384, a 2-MIB producer, was sensitive to low temperature (<$20^{\circ}C$). However, geosmin producers, Anabaena sp. Chusori and Anabaena sp. NIER, were sensitive to high light intensity (>$100{\mu}mol/m^2/sec$), but not to low temperature. Geosmin concentrations increased under higher nitrate concentrations, being linearly proportional to cell density. A P-limited chemostat showed that P-stress decreased the geosmin productivity and extracellular geosmin amount per cell in Anabaena sp. NIER. However, only 2-MIB productivity was reduced in Planktothrix sp. FACHB-1374 under P-limitation. The extracellular 2-MIB amount per cell remained constant at all dilution rates. In conclusion, high light intensity and P-stress can contribute to the lower incidence of geosmin, whereas 2-MIB reduction could be attainable at a lower temperature.
- The effect of redox potential (ORP) on lysine production by a leucine auxotrophic regulatory mutant of Corynebacterium glutclmicum on molasses medium was investigated in a 2-1 jar fermentor at pH 6.9 and $32^{\circ}C$. At a dilution rate of D=O.l $h ^1$, a maximum yield of Yr,,s=0.24 was obtained in either carbon- or leucine-limited chemostat where the redox potential was between -60 mV and - 100 mV. This level of redox potential corresponded to moderate oxygen deficiency. Under a high oxygen deficient condition of the redox potential of - 130 rnV (oxygen-limited chemostat), all the kinetic parameters such as $Y_[p/s}, q_s\; and \; q_p$ were decreased significantly and significant amounts of byproducts including glycine, alanine and valine were accumulated in the culture, indicating that the control of redox potential is important in lysine fermentation. At the redox potential of - 40 mV, on the other hand, large quantities of arginine (up to 0.38g/l) and glutamic acid (up to 0.12 g/l) were produced. A maximum lysine productivity of 2.41 g/l/h was achieved at - 66 mV under a carbon-limited condition.
Photosynthetic parameters of Scendesmus quadricauda, such as the maximum photosynthetic rate ($P_{max}$), photosynthetic efficiency (α) and the initial saturation intensity of irradiance for photosynthesis ($I_K$) were obtained using photosynthesis-irradiance (P-I) curve in a phosphorus-limited chemostat. S. quadricauda exhibitied no photoinhibition until at 200 μmol·$m^{-2}$ . $P_{max}$ (r=0.963, P=0.002) and $I_K$(r=0.904, P=0.013) showed linear relationships with growth rate. Chlorophyll-α concentration and cell dry weight decreased at higher growth rates, ut chlorophyll-α content per cell dry weight increased. The increase in photosynthetic rates at higher growth rates was due to the increase of $P_{max}$ and $I_K$ which was caused mainly by the increase in the absolute amount of chlorophyll-α rather than the increased photosynthetic efficiency of individual chlorphyll-α. The α did not show a significant relationship with growth rate (r=0.714, P=0.111). The cell quota of carbon (r=0.554, P=0.254) was not correlated with growth rate, but cell quota of nitrogen (r=0.818, P=0.047) and phosphorus (r=0.855, P=0.030) exhibited linear correlations with growth rate.
Kim, Sun-Hee;Ahn, Sang-Wook;Bai, Dong-Kyu;Kim, Kwang-Soo;Hwang, Baik;Lee, Hyeon-Yong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.9
no.6
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pp.716-721
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1999
It has been known that continuous cultivation of hairy root is difficult to maintain for a long period of time compared to the microbial and callus cultures. Chemostat cultivation was successfully carried out in order to economically produce a plant-based colorant, betacyanin, from red beet hairy root for more than 85 days in a 14-1 fermentor. The result from the chemostat cultivation was compared to those of the batch and fed-batch cultivations of red beet hairy roots. It was shown that hairy root reached its steady state within 50 days of the cultivation, and then maintained for about 25-30 days in a wide range of dilution rates. Total betacyanin production from the continuous process was also calculated to be 2.65g at 0.28(l/d) of dilution rate, compared to 0.196g from fed-batch cultivation. It was found that betacyanin production was a partially growth related process, yielding 0.376 mg/g-fresh wt. cell and $1.89{\times}10^{-5}$ mg/g-fresh wt. cell/d, with 0.92 of correlation factor in a partial growth-product model. It was also shown that the cell growth required was relatively large for maintenance amount of energy at a low dilution rate. The growth of hairy root was inhibited by high light intensity in following a photo-inhibition model. The growth parameters were estimated to be 0.3(l/d), $10.56kcal/\textrm{m}^2/h$,{\;}and{\;}35.81kcal/\textrm{m}^2/h$ for the maximum specific growth rate, half saturation light intensity, and inhibition light intensity, respectively.
Ettlia sp. YC001, a highly settleable and productive microalga, was shown to be effective in removing nutrients and capturing suspended solids from eutrophic pond water. The optimum conditions for the Ettlia sp. YC001 cultivation were investigated using water from a landscape pond. The pond water was supplemented with different N : P ratios by weight, and the biomass production and nutrient removal compared in batch cultures. The maximum removal rate of N and P was with an N : P ratio of 16 : 1. Plus, the turbidity dropped to near zero within 4 days. Meanwhile, chemostat cultivation showed that the biomass productivity and nutrient removal rate increased when increasing the dilution rate, where a dilution rate of $0.9d^{-1}$ showed the highest N and P removal rate at $32.4mg\;L^{-1}\;d^{-1}$ and $1.83mg\;L^{-1}\;d^{-1}$, respectively, and highest biomass and lipid productivity at $0.432g\;L^{-1}\;d^{-1}$ and $67.8mg\;L^{-1}\;d^{-1}$, respectively. The turbidity was also reduced by 98% in the chemostat cultivation. Moreover, auto-flocculation and pH were closely connected to the turbidity removal. As a result, this study identified the optimal N : P ratio for small pond water treatment using an Ettlia sp. YC001, while also establishing the optimal conditions for nutrient removal, turbidity reduction, and biomass production.
Proceedings of the Korean Society for Applied Microbiology Conference
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1978.10a
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pp.205.3-205
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1978
Methanol이용 미생물의 집적배양을 통해 토양 및 하수로부터 분리하여 그 중에서 비교적 생육속도가 빠른 균주를 선별하였다. 이 균주는 형태적, 생리적 특성에 따라 Methylomonas methanolica로 동정되었으며 obligate methylotroph 이었다. 균체 생산량을 높이기 위한 배지조성과 배양 최적조건을 검토한 결과, 탄소원으로는 methanol 0.8%(v/v), 질소원은 $(NH_4)_2SO_4$ 0.6%, 금속이온은 $MgSO_4.$$7H_2O$ 0.1%이었고, 최적 pH는 6.3, 최적 배양온도는 $32.5^{\circ}C이었으며,$ 생육인자는 요구되지 않았다. 그리고 최적 배양조건에서 1ι용 fer-mentor를 사용하여 회분배양을 하였을 때 최대 비증식속도 0.19$hr^{-1}$, 균체수율은 0.47g dry cell/g-methanol이었다. Chemostat를 이용한 연속배양시 균체생산을 위한 최적희석률은 D=0.1 $hr^{-1}$이었고 이때의 균체생산속도는 0.21g- dry cell/hr이었다. 생산된 건조균체의 단백질과 핵산함량은 각각 73%, 12% 이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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