Dawley 계 숫컷 흰쥐(200~210g)를 정상군, $CCl_4$-대조군, $CCl_4$-실험군으로 나누어 실험군은 갈근 에탄올 추출물을 1,000mg/kg,b.w의 용량으로 1일1회7일간 경구 투여 후 사염화탄소를 0.6mg/kg,b.w의 용량으로 복강내 주사 후 다음날 개복하여 혈청내의 Alanine aminotransferase(ALT), Aspartate aminotransferase(AST), Alkaline phosphatase(ALP), Glutamyltranspeptidase(${\gamma}$-GT), Lactate dehydro-genase(LDH)의 활성도와 중성지방, 콜레스테롤 함량을 측정한 결과 갈근 추출물 투여군에서 $CCl_4$-대조군과 비교하여 유의적인 감소(p<0.05)를 나타내었으며, HDL-콜레스테롤은 유의적인 증가(P0.05)를 나타내었다. 간조직중의 지질과산화 함량과 Catalase(CAT), Glutathione peroxiddase(GSH-Px)의 항산화 효소 활성은 유의적인 감소를 나타내었다. 반면에 간 조직중의 glutathione 함량은 유의적인 증가를 나타내었다. 이 실험 결과 갈근 에탄올 추출물은 사염화탄소 투여에 의한 간 손상을 억제하는 보호물질과 항산화 물질을 함유하고 있음을 알 수 있었다.
This study was designed to investigate the potentially protective effects of Curcuma longa Linn. extract (CLE) on carbon tetrachloride ($CCl_4$)-induced hepatotoxicity in rats. Male Sprague-Dawley rats were pretreated with 50 or 100mg/kg of CLE or 100mg/kg of butylated hydroxytoluene(BHT) for 14 days before $CCl_4$ administration. In addition, the CLE control group was pretreated with 100mg/kg CLE for only 14 days. Three hours after the final treatment, a single dose of $CCl_4$ (20mg/kg) was administrated intraperitoneally to each group. After the completion of this phase of the experiment, food and water were removed 12 h prior to the next step. The rats were then anesthetized by urethane and their blood and liver were collected. It was observed that the aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase activities of the serum, and the hepatic malondialdehyde levels had significantly decreased in the CLE group when compared with the $CCl_4$-treated group. The antioxidant activities, such as superoxide dismutase, catalase, and glutathione peroxidase activities, in addition to glutathione content, had increased considerably in the CLE group compared with the $CCl_4$-treated group. Phase II detoxifying enzymes, such as glutathione S-transferase, were found to have significantly increased in the CLE group as opposed to the $CCl_4$-treated group. The content of Nrf2 was determined by Western blot analysis. Pretreated CLE increased the level of nuclear translocated Nrf2, and the Nrf2 then increased the activity of the antioxidant and phase II detoxifying enzymes. These results indicate that CLE has protective effects against $CCl_4$-induced hepatotoxicity in rats, via activities of antioxidant and phase II detoxifying enzymes, and through the activation of nuclear translocated Nrf2.
본 연구는 in vitro 실험을 통해 항산화 효과가 인정된 생강, 마늘 및 양파를 첨가한 식이로 2주 동안 Sprague-Dawley계 수컷 횐쥐를 사육하고 사염화탄소를 투여한 후, 호기중의 ethane 함량, 항산화효소인 SOD의 활성도, 지질과산화산물인 MDA의 함량을 측정하여 생강, 마늘 및 양파의 생체내 항산화 효과를 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 각 실험군간에 실험동물의 체중 증가량, 식이 섭취량 및 식이 효율은 유의한 차이를 보이지 않았다. 생강, 마늘, 양파첨가군 모두가 사염화탄소투여대조군(group II)에 비해 ethane배출량이 유의하게 감소되었다(p<0.05). 간조직의 SOD활성도도 생강, 마늘 및 양파첨가군 모두가 사염화탄소투여대조군에 비해 유의한 감소를 보였으며(p<0.05), 간 조직 중의 MDA 함량은 마늘첨가군만이 사염화탄소투여대조군에 비해 유의한 감소를 보였다(p<0.05).
2-(Allylthio)pyrazine is effective in selectively suppressing constitutive and inducible expression of cytochrome P450 2E1. The effect of 2-(allylthio)pyrazine against potentiat ed chemical injury was studied in rats. Vitamin-A pretreatment of rats substantially increased carbon tetrachloride hepatotoxicity, as supported by an ~4-fold increase in serum alanine aminotransferase (ALT) activity. Concomitant pretreatment of rats with 2-(allylthio)pyrazine at the daily dose of 200mg/kg resulted in a 76% decrease in vitamin-A-potentiated hepatotoxicity, which supported the possibility that 2-(allylthio)pyrazine protects the liver against chemical-induced hepatic injury by the mechanism associated with Kupffer cell inactivation. Pyridine pretreatment caused substantial enhancement in carbon tetrachloride hepatotoxicity. 2-(Allylthio)pyrazine treatment of rats reduced the pyridine-potentiated toxicity in a dose-dependent manner. Animals treated with both pyridine and 2-(allylthio)pyrazine prior to intoxicating dose of CCl$_4$ resulted in 85% and 47% decreases in pyridine-increased triglycerides and cholesterol levels in the liver. The protective effect of 2-(allylthio)pyrazine on the DNA strand breakage induced by benzenetriol was assessed by measuring the conversion of supercoiled ${\Phi}x$-174 DNA to the open relaxed form. 2-(Allylthio)pyrazine blocked the benzenetriol-induced conversion of supercoiled DNA to open circular form in a dose-dependent manner. The presence of 2-(allylthio)pyrazine at the doses from I to 10mM in the incubation mixture containing 5 ${\mu}$M benzenetriol completely protected benzenetriol-induced DNA strand breakage with the EC50 for the 2-(allylthio)pyrazine blocking being noted as ~220 ${\mu}$M, whereas allyl disulfide exerted protecting effect at relatively high concentrations (i.e. ~850 ${\mu}$M), suggesting that 2-(allylthio)pyrazine effectively scavenges the reactive oxygen species. These results provide evidence that 2-(allylthio)pyrazine blocks vitamin A- or pyridine-potentiated CCl$_4$ hepatotoxicity and that the agent is active in protecting DNA by scavenging the reactive oxygen species.
간에 급성 출혈성 괴사를 일으키는 dimethylnitrosamine(DMN)의 간 독작용이 과량의 사염화탄소로 전처치시 어떤 영향을 받는 가를 관찰하기 위해 먼저 DMN을 쥐의 복강내에 주입하였다. 또 사염화탄소 전처치에 의한 영향을 조사하기 위해 사염화탄소 투여 후 DMN을 투여하고 간조직을 적출하여 광학 현미경 및 전자 현미경으로 관찰하였다. 광학 현미경하에서 DMN 단독 투여시 12시간부터 간 소엽중심부에 심한 출혈성 괴사가 나타나서 120시간까지 지속되었다. 과량의 사염화탄소로 전처치시 초기부터 광범위한 괴사가 나타났으나 24시간부터는 활발한 재생성변화가 나타나서 120시간에는 거의 정상으로 회복되어서 괴사의 정도는 DMN 단독 투여군과 유사하고 회복되는 시간은 단독 투여군보다 더 빨랐다. 전자 현미경하에서 DMN 단독 투여시 초기 변화는 주로 과립성 내형질막의 분열로 나타났고, 사염화탄소 단독 투여시는 내형질막의 덩어리 형성과 수포성 팽창으로 나타났다. 사염화탄소 전처치 후 DMN 투여시 초기에 나타난 변화는 그 양상이 사염화탄소 단독 투여시와 유사했지만 정도가 더 심했다. 이상의 결과에서 DMN의 급성중독 효과는 과량의 사염화탄소로 전처치한 경우에 재생이 더 빨리 이루어지는 것으로 보아 사염화탄소가 DMN에 대해 방어적인 작용을 하는 것으로 추측된다.
Objectives : Present study investigated hepatoprotective effects of four types of Taraxaci Herba water extract (TL-F, Taraxaci Herba leaf originated from foreign country; TR-F, Taraxaci Herba root originated from foreign country; TL-K, Taraxaci Herba leaf originated from Korea; TR-K, Taraxaci Herba root originated from Korea) on carbon tetrachloride (CCl4)-induced acute liver injury. Methods : Mice were administered orally with 200 mg/kg of TL-F, TR-F, TL-K, or TR-K for seven days, and intraperitoneally injected with 0.5 mL/kg of CCl4 1 h after last Taraxaci Herba treatment. Silymarin (100 mg/kg) was used as a positive drug. Body weight gain, relative liver weight, serum biochemistry, histopathological and immunohistochemical analyses, and hepatic antioxidant capacity were determined to investigate the hepatoprotective effect of four extracts. Results : Administration of four types of Taraxaci Herba extract increased body weight gain, and decreased relative liver weight in CCl4-injected mice. As compared to CCl4 group, TL-F and TR-F significantly decreased serum aspartate aminotransferase activity, while four extracts reduced CCl4-induced alanine aminotransferase activity. In addition, TL-F and TR-F significantly decreased the numbers of degenerated hepatocytes, infiltrated inflammatory cells, cleaved caspase-3 positive cells, and cleaved PARP positive cells in hepatic tissues. Moreover, TL-F, TR-F, and TR-K administration reduced the lipid peroxidation and nitrotyrosine, and increased glutathione, superoxide dismutase, and catalase activities in hepatic tissues. There were no statistical differences between TL-F- and silymarin-treated group. Conclusion : Of four extracts tested, present results suggest that TL-F is the most favorable candidate against CCl4-induced acute liver injury through enhancing antioxidant activity.
The present study was undertaken to investigate the inhibition effects of sancho(Zanthoxylum schinifolium) on lipid peroxidation and liver damage in carbon tetrachloride tetracloride-treated mice. Mice aged 3 weeks old were fed diets containing either dry sancho powder, methanol extract or hyperoside isolated from sancho at the various levels for 2 weeks(sancho, methanol extract from sancho) or 3 days (hyperoside) before $CCl_{4}$ treatments. Seed coats of sancho added to diet with the levels from 1.25 to 5.0% significantly reduced(p<0.001) thiobarbituric acid reactive substances(TBARS) formation in liver and serum of mice treated with carbon tetrachloride. $CCl_{4}$ treatments significantly increased (p<0.001) in liver TBARS comparing with those of the untreated control, while methanol extract from the seed coat of sancho added to diet with the levels from 0.5 to 1.0% significantly reduced (p<0.01) to 20mg per kg of body weight showed significant reduction(p<0.01, p<0.001) of liver TBARS in mice treated with $CCl_{4}$. $CCl_{4}$ treatments significantly increased(p<0.05) in serum TBARS comparing with those the levels from 0.5 to 1.0% significantly reduced(p<0.01) serum TBARS in mice treated with $CCl_{4}$, and administration of hyperoside with the levels from 10 to 20mg per kg of body weight showed significant reduction(p<0.01, p<0.001) of serum TBARS in mice treated with $CCl_{4}$. $CCl_{4}$ significantly increased(p<0.001) in serum AST activities comparing with those of the untreated control, while either addition(0.5, 1.0%) of methanol extract from sancho or administration(10, 20mg/kg) of hyperoside significantly reduced(p<0.001, p<0.05) serum AST activities in $CCl_{4}$-treated mice. $CCl_{4}$ treatments showed significant increases(p<0.001) in serum ALT activities comparing with those of the untreated control, while either addition(0.5, 1.0%) of methanol extract from sancho or administration (10, 20mg/kg) of hyperoside showed moderate decreases(p<0.01, p<0.001) serum ALT activities in $CCl_{4}$-treated mice.
생체발광 (biophoton emission)의 측정기기를 이용하여 생체의 생리상태를 조사하는 연구가 활발해지고 있다. 본 논문에서는 사염화탄소에 의해 유발된 마우스의 지방간 조직에서 나오는 생체광자를 측정하였다. 올리브유와 올리브를 용매로 하는 사염화탄소를 혼합한 각각의 6마리로 구성된 두 개 군의 마우스에 복강투여 후 24시간, 72시간 후에 각각 간을 적출하여 생체광자를 측정하고, 또한 혈장을 분리하여 생화학적 지표로 사용되는 트랜스아미네이즈 효소 활성도를 측정하였다. 실험결과는 정상적인 대조군의 경우, 생체발광이 29.5$\pm$5.9 counts/min/$\textrm{cm}^2$로. 측정된 반면, 24시간 처리군에 대해서는 69.3$\pm$21.2 counts/min/$\textrm{cm}^2$로 정상관보다 2배 이상 높은 생체발광을 보였다. 또한, 72시간 처리군에 대해서는 37.0$\pm$14.8 counts/min/$\textrm{cm}^2$로 측정되어 생화학적 지표로 사용되는 효소 활성도 결과와 밀접한 상관관계가 있음을 알 수 있었다.
눈꽃 동충하초, 번데기 동충하초, Cordycepin 고함유 번데기 동충하초 분말을 식이 중에 각각 3% 수준으로 첨가하여 4주간 흰쥐에 급여한 후, 해부하기 2일 전에 2회 사염화탄소를 복강주사하여 급성 간손상을 일으켜 임상생화학적 특성 및 조직 내 항산화 활성 및 간 조직에 미치는 영향을 검토하였다. 체중 증가량과, 식이 섭취량 및 음료섭취량은 각 실험군 모두 감소하는 경향을 보였다. 간 손상 임상 지표인 AST, ALT, LDH 활성도 각 실험군 모두 유의적으로 감소하였으나, 그 중 Cordycepin 고함유 번데기 동충하초 분말을 투여한 군에서 가장 낮은 활성을 보였다. 각 조직과 혈청의 과산화지질(TBARS)을 측정한 결과 Cordycepin 고함유 번데기 동충하초는 높은 과산화지질 억제작용을 나타내어 조직 내 항산화 물질로 잘 알려진 glutathione농도 또한 모든 조직과 혈청내에서 높은 함량을 보였다. 미네랄 함량 측정결과 지방의 산화를 촉진하는 비헴철과 항산화 성분인 아연이 정상수준까지 회복되는 경향을 보였다. 이상의 실험결과 Cordycepin 고함유 번데기 동충하초는 사염화탄소로 유발된 간 독성을 저하시키며 혈청과 간지질 대사를 개선하는 효과가 있는 것으로 사료되며 향후 간 기능 개선과 지질대사 개선효능을 가지는 건강식품 개발의 소재로 활용될 가능성이 높은 것으로 판단되어진다.
대추 메탄을 추출물이 사염화탄소에 의한 휜쥐의 간손상에 미치는 영향을 알아보기 위하여 대조군, 대추메탄올 추출물 투여군, 사염화탄소 투여군 및 대추메탄올 추출물을 투여한 후 사염화탄소를 투여한 군으로 나눠, 2, 4주간 사육하여 혈청 중의 transaminase (GOT 및 GPT), 간 중의 lipid peroxide량, glutathione 함량, xanthine oxidase, SOD, catalase, GSH-Px 등의 활성도의 변화를 관찰하였다. 사염화탄소(50%, 1.0ml/kg) 투여군의 혈청 중 GOT및 GPT의 활성도, 간중TBA 반응성 산물량은 2, 4주에서 대조군에 비하여 현저히 증가되었으나, 대추 메탄올 추출물을 투여한 후 사염화탄소를 투여할 때 GOT의 경우 2, 4주에서, 간 중 TBA 반응성 산물량은 4주에서 사염화탄소 투여군에 비하여 유의성있는 감소효과를 보였다. 유리기 생성계 효소인 xanthine oxidase 활성도에서, 사염화탄소 투여군은 대조군에 비하여 현저한 증가를 보였으나, 대추 메탄올 추출물을 투여한 후 사염화탄소를 투여한 군에서는 감소되었다. 유리기 해독계 효소인 SOD, catalase 및 GSH-Px의 활성도도 사염화탄소 투여로 모두 증가되었으나, 대추 메탄올 추출물을 투여한 후 사염화탄소 투여로 SOD는 4주에서, GSH-Px는 2, 4주에서 대조군에 비하여 유의한 감소효과를 나타냈으며, catalase는 투여기간에 따라 감소는 되었으나 유의성은 보이지 않았다. 이상의 실험결과에서, 사염화탄소 투여로 혈청 및 간 중의 각종 효소 활성도 및 지질과산화물량이 증가되었는데 이는 사염화탄소가 간 중의 효소계 및 간세포의 microsome을 심하게 손상시켰음을 알 수 있으며, 대추 메탄올 추출물을 전처리하므로써 사염화탄소에 의하여 현저히 증가된 각종 효소활성도 및 지질과 산화물량이 감소되었는데, 이는 대추 메탄올 추출물이 간세포의 괴사와 효소의 유출을 저 해하고 간의 저항력 및 간기능을 유지시키므로써 간 보호작용을 할 수 있을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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