Histological observation of micropore-originated haploid rice callus was reported previously. Present study was attempted to clarify the growth or development of the calli when they were transferred to differentiation media prepared exclusively for differentiation of plantlets. When the callus was transferred to differentiation medium, the cells and tissues became radially elongated. Meristematic tissues were present but few in number, and their structures were quite different from those grown in the propagaton medium. Differentiation of tracheid, chloroplast, and epidermis-like cell layer, and formation of gap in the callus tissue were more conspicuous in differentiation media. Approximately ten days after transfer of callus to differentiation medium, plantlet was formed.
Strong anti-inflammatory saponins Phytolacca americana (Phytolaccaceae) wereobtained from callus mass derived from the stems and also from that derived from the roots of cultivated Phytolacca americana (which were designated as PAS and PAR, respectively). The callus were grown on Linsmair and Skoog's agar medium supplemented with 1ppm OF 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid. Phytol accoside B and D were obtained from PAS and phytolaccoside A and B from PAR. The thin layer chromatograms of the crude saponins from PAS and PAR were similar to those of original plants. PAS contained phytolaccoside B as a major component while phytolaccoside E was a major saponin in original plants.
Grafted tissues were investigated using various microscopic techniques. Pinus thunbergii was used as stock and scion and autografted by cleft graft method. Histochemically, grafting processes can be proceeded by four stages: 1) formation of necrotic layer, 2) proliferation of callus, 3) development of neo-cambium from callus, and 4) restoration of new vascular xylem. Necrotic la yer composed of pectin and lignin was gradually degraded during grafting process and disappeared when new union was formed between stock and scion. A large number of starch and lipid bodies in the cytoplasm were also gradually degraded during grafting process and disappeared at the grafting interface. Nucleus and plasmodesmata were not changed. Bubble-like callus was generated from all living parenchyma cells and from the callus. The tracheary elements differentiated from the callus had either reticulate or pit-like thickenings in the secondary walls with bordered pits. Secondary cell wall thickening occurred toward filing to the void parts between reticulated secondary wall. Tracheids formed in the secondary xylem were short with irregular wall thickness. New secondary xylem cells with swirled shapes, which developed in graft union were oriented horizontally and obliquely to axis of the stem.
In order to develop the biotechnological methods for the mass production of anticancer compounds from tissue culture of Panax ginseng C.A. Mayer, these studies were carried out for the selection of ginseng cell lines containing higher concentration of polyacetylene compounds and optimal condition for their biosynthesis. Panaxynol, one of ginseng polyacetylene, was not detected in any callus induced from ginseng superior cell lines cultured on MS medium supplemented with $\beta$-chlorophenoxy acetic acid (CPA). Panaxydol, another one of polyacetylene and anticancer compounds, were detected in calli of 5 cell lines by thin layer chromatogram and gas chromatogram. Among the 18 ginseng superior lines, the cell line 30201 has higher content of panaxydol. Especially, panaxydol was not detected in the callus induced from cell line 10301 which cultured on the medium containing CPA only, however, it was detected on the same callus cultured on mixed medium containing CAP 2 mg/L and BA 0.05 mg/L. SH medium was better than MS medium for ginseng callus growth and biosynthesis of polyacetylene, and also found that it was not effected by NAA and sucrose concentration in the culture medium.
Kim, Ki-Sun;Kwon, Soon-Bae;Chang, Kwang-Jin;Hong, Sae-Jin;Kim, Byung-Sup
Korean Journal of Plant Resources
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v.25
no.4
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pp.387-393
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2012
In order to improve storability of subtropical yam produced in South Korea, the major pathogens found during the storage were isolated and identified of the pathogenicity, and rot inhibition effect was studied based on the curing treatment condition. Penicillium sclerotigenum and Penicillium polonicum were identified as major pathogens causing rot in subtropical yam during storage, and P. sclerotigenum had stronger pathogenicity. Only the cut surface which has been made during a harvest and has been made smooth before curing generated a normal callus layer. The cut surface of tuberous root was cured in 95% of relativity humidity for three days at $23^{\circ}C$, and cured at $28^{\circ}C$ and $33^{\circ}C$. The observation of callus layer showed that the $23^{\circ}C$ treatment group had similar color saturation between tuberous root and pellicle, while the groups treated above $28^{\circ}C$ showed clear distinction. The generation rate of callus 0.5mm or bigger was 93 percent at $28^{\circ}C$ treatment, 96% at $33^{\circ}C$ treatment, but was 52% at $23^{\circ}C$ treatment. The conventional curing treatment group that used wind or sunlight at room temperature created little callus layer. The infection rate of pathogens according to the relative humidity inside the storage room was low at 40% and 60% of humidity, and the curing treatment period did not make a difference. When the humidity inside the storage room was 80%, all treatment groups rapidly increased the fungal pathogens. The rotten rate of each treatment was studied after 180 days during which the storage temperature was maintained at $16^{\circ}C$ and relative humidity 60%. While the rotten rate of tuberous root that has been cut in conventional curing treatment based on solar and wind was 43%, the one cured at over $28^{\circ}C$ and created the callus layer was less than 18%. While even a healthy tuberous root showed 25% of rotten rate in the traditional treatment group, the one cured at over $28^{\circ}C$ was less than 10%. The weight loss was 1-6% lower in the forced treatment group than in the conventional treatment group.
Proceedings of the Botanical Society of Korea Conference
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1987.07a
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pp.213-237
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1987
In vitro flowering system may minimize the confounded influence of non-floral meristem parts of plants in studying the relationship of a given treatment and flowering responses. We have induced flower buds from plantlets regenerated from zygotic embryo-derived somatic embryos of ginseng, which circumvented the normal 2-year juvenile period before flowering. The result suggests that the adulthood of ginseng root explants in the experiment previously conducted by Chang and Hsing (1980; Nature 284: 341-342) is not prerequired to flowering of plantlets regenerated through somatic embryogenesis. We have also induced flower buds from elongated axillary brandches from cotyledonary nodes by culturing ginseng zygotic embryos, seedlings, and excised cotyledonary nodes. It was found that 6-benzyladenine (BA) supplemented to the medium was essential for flowering, whereas abscisic acid (ABA) was inhibitory. Gibberellic acid(GA3) was also required for flowering when ABA was present with BA in the medium. The results suggest that cytokinins, gibberellins, and inhibitors play primary, permissive, and preventive roles, respective-ly, in the induction of flowering of ginseng. Tran Thanh Van (1980; Int. Rev. Cytol., Suppl. IIA: 175-194) has developed the "thin cell layer system" in which the induction of shoots, roots, or flower buds from epidermal layer explants were controlled by culture conditions and exogenous growth regulators in the medium, Utilizing the thin cell layer system, Meeks-Wagner et al. (1989; The Plant Cell 1: 25-35) have cloned genes specifically expressed during floral evocation. However, the system is too tedious for obtaining a sufficient amount of plant materials for biochmical and molecular biological studies of flowering. We have developed a garlic callus culture system and one obvious advantaging over the thin cell layer system is that an abundant cells committed to develope into flower buds proliferate. When the above cells were compared by two-dimensional gel electrophoresis with those which have just lost the competence for developing into flower buds, a few putative proteins specific to floral evocation were detected. The garlic callus culture system can be further explored for elucidation of the molecular biological mechanism of floral evocation and morphogenesis.hogenesis.
We investigated the structure of floral organs and possibility of seed-set to breed a variety in ginger Zingiber officinale Rosc. Floral bud was formed from collected domestic Seosan var, and foregin Thailand var, the number of florets per bud were 8 and 10 in Seosan and Thailand var, respectively, Flowering time ranged from 18 to 25 August irregularly at 4-5 pm. The flower has the long styled with fiber hairs on top of stigma and connected-two anthers. Pollens were mixed of circular and ellips shape and its extine was two layer structure. Callus formation from anther explants was effective with compact and embryogenic on N$_{6}$ medium supplemented 2 mg/l of NAA(NCM). Plant regeneration was on the MS medium with BA of 1-2 mg/l from 40 days old callus after transferred callus medium.m.
Present experiments were carried out to examine the effect of plant growthregulators for callus induction and plantlet regeneration through leaf tissue culture of Scutellaria baicalensis GEORGI. The results indicated that Callus was induced well on MS medium supplemented with 0.5mg/L NAA or 0.5mg/L NAA Plus 0.5mg/L zeatin. MS medium supplemented with 1.0mg/L BAP plus 0. 5mg /L NAA or 1. 0mg /L zeatin Plus 0.5mg /L NAA and 1.0mg /L NAA were the most effective for plant regeneration. Thin layer chromatogram of baicalin component (Rf 0.39) was observed from callus cultured on MS medium containing 0.5mg /L NAA plus 0.5mg /L zeatin.
Antibiotics used for suppressing Agrobacterium in plant transformation procedure might have negligible effects on plant tissues and regeneration. The effects of antibiotics on growth suppression of Agrobacterium and plant regeneration were investigated for enhancing Agrobacterium-mediated transformation using wheat mature embryos. Antibiotics tested, except carbenicillin, were able to suppress that embryos were coated with a layer of Agrobacterium cells in callus induction medium. Agrobacterium growth was suppressed minimally at 50 mg/l of timentin, while cefotaxime and clavamox were completely suppressed at relative high concentration of 250 mg/l. In the treatment of carbenicillin, initiation of growth suppression of Agrobacterium occurred at 750 mg/l of concentration because Agrobacterium KYRT1 contains the carbenicillin resistant gene. In Agrobacterium inoculation, effects of antibiotics were significantly different on the rate of callus induction and shoot formation. Almost embryos were induced calli at 50 mg/l of timentin whereas callus induction rate was achieved above 90% at 100 mg/l and 250 mg/l of cefotaxime and clavamox, respectively. Shoot formation rate was higher in the treatment of timentin than that of cefotaxime and clavamox at 500 mg/l of concentration, respectively. Timentin can be used as a good antibiotics in Agrobacterium-mediated wheat transformation.
Herbicide tolerant rice (Oryza sativa L. cv. Ilpumbyeo) cell lines were selected from $\gamma$-ray-irradiated anther-derived cell cultures. The anther-derived cell clusters were small (300 to 400 ${\mu}{\textrm}{m}$ in diameter) and uniform ones that were screened by miracloth filtering. The cell suspensions were very efficient to plate one layer onto agar medium and to screen target cell lines. Herbicide tolerant cell lines were selected by 5 mg/L cyhalofop butyl (CHB) treatment by using the small cell suspensions on agar N6 medium containing 1 mg/L 2,4-D and 0.2 mg/L kinetin. Of the cell lines, one line (CHB-1) showed stable tolerance at 10 mg/L concentration after 6-month culture without herbicide suspension. Growth stability of CHB-1 was similar to that of control cell line on 10 mg/L CHB containing medium. In this experiment we established herbicide tolerant cell line selection system by using anther-derived uniform-cell suspensions with $\gamma$-ray-irradiation.
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