To develop the novel anti-allergic drug, many sophoricoside derivatives were synthesized. Among these derivatives, JSH-II-3, VI-3, VII-3, VIII-3, VII-20 and VII-20 (sodium salt) were selected and subjected to high throughput toxicity screening (HTTS) because they revealed strong IL-5 inhibitory activity and limitation of quantity. Single cell gel electrophoresis (Comet) assay, mouse lymphoma thymidine kinase ($tk^{+/-}$) gene assay (MOLY), chromosomal aberration assay in mammalian cells and Ames reverse mutation assay in bacterial system were used as simplified, inexpensive, short-term in vitro screening tests in our laboratory. Through the primary screening using the comet assay, we could choose the first candidates of sophoricoside derivatives with no genotoxic potentials as JSH-VI-3, VII-3, VII-20 and VII-20 (sodium salt). Also JSH-VII-3, VII-20 and VII-20 (sodium salt) are non-mutagenic in MOLY assay, while JSH-II-3 is mutagenic at high concentration with the presence of metabolic activation system in both comet assay and MOLY assay. The selected derivatives (JSH-VI-3, VII-3, VII-20 and VII-20 (sodium salt) are not mutagenic in S. typhimurium TA98 and TA100 strains both in the presence and absence of metabolic activation. From results of chromosomal aberration assay, 6 h treatment of JSH-VI-3, VII-3 and VII-20 (sodium salt) were not revealed clastogenicity both in the presence and absence of S-9 mixture. Therefore, we suggests that JSH-VI-3, VII-3, VII-20 and VII-20 (sodium salt), as the optimal candidates with both no genotoxic potential and IL-5 inhibitory effects must be chosen. To process the development into new anti-inflammatory drug of these derivatives, further investigation will need.
The changes in DNA damage were investigated during storage after irradiation. Potato, garlic were irradiated at 0.05, 0.07, 0.1 and 0.15 kGy and stored for 3 months. Ginger was irradiated at 0.01, 0.02, 0.03, 0.04 and 0.05 kGy and stored for 1 month. The comet assay was applied to the sample immediately after irradiation and at the end of storage. Samples were isolated, grounded and the suspended cells were embedded in an agarose layer. After lysis of the cells, they were electrophoresed for 1 min. and then stained. DNA fragmentation in seeds caused by irradiation was quantified as tail length and tail moment (tail length ${\times}%$ DNA in tail) by comet image analyzing system. Right after irradiation, the differences in tail length between unirradiated and irradiated samples were significant(p<0.05) in potato, garlic and ginger. With increasing the irradiation doses, statistically significant longer extension of the DNA from the nucleus toward anode was observed. The results represented as tail moment showed similar tendency to those of tail length. Similarly in the stored samples, even 1 or 3 months after irradiation, all the irradiated samples significantly showed longer tail length than the unirradiated controls. These results indicate that the comet assay could be one of the simple methods of detecting irradiated samples. Moreover, the method could detect DNA damage even after 1 or 3 months after irradiation.
Park, Eun-Ju;Ryoo, Kun-Kul;Lee, Yoon-Bae;Lee, Jong-Kwon;Lee, Mi-Young
Applied Biological Chemistry
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v.48
no.2
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pp.155-160
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2005
Electrolyzed reduced water (ERW), showing extremely negative oxidation-reduction potential, was used to investigate the effects of paraquat-induced damages on DNA from human lymphocyte. The effect of ERW on paraquat-induced oxidative DNA damage in human lymphocytes was evaluated by Comet assay (single-cell gel electrophoresis) quantified as percentage fluorescence in tail. Comet assay has been used widely to assess the level of the DNA damage in individual cells. Lymphocytes were oxidatively challenged with various concentrations of paraquat for 30 min at $37^{\circ}C$, and were then treated with electrolyzed reduced water for 30 min. The oxidative DNA damage by paraquat, as indicated by the fluorescent tail in DNA, increased in a dose-dependent manner. However, oxidative damage of the DNA was almost completely prevented upon treatment with electrolyzed reduced water.
Kim, Youn-Jung;Park, Hyo-Joung;Kim, Young-Soo;Kim, Mi-Kyung;Lee, Seung-Ho;Jung, Sang-Hun;Ryu, Jae-Chun
Environmental Mutagens and Carcinogens
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v.21
no.2
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pp.99-105
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2001
Sophoricoside was isolated as the inhibitor of IL-5 bioactivity from Sophora japonica (Leguminosae). It has been reported to has an anti-inflammatory effect on rat paw edema model. To develope as an anti-allergic drug, genotoxicity of sophoricoside was investigated in bacterial and mammalian cell system such as Ames bacterial reversion test, chromosomal aberration assay and single cell gel electrophoresis (Comet) assay. As results, in the range of 1,250~40 $\mu\textrm{g}$/plate sophoricoside concentrations was not shown significant mutagenic effects in Salmonella typhimurium TA 98, TA 100, TA 1535 and TA 1537 strains in Ames test. The 80% cell growth inhibition concentration (IC/SUB 80/) of sophoricoside was determined as above 5,000 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ in Chinese hamster lung (CHL) fibroblast cell and L5178Y mouse lymphoma cell line for the chromosomal aberration and comet assay, respectively. Sophoricoside was not induced chromosomal aberration in CHL fibroblast cell at concentrations of 700, 350 and 175 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ or 600, 300 and 150 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ in the absence or presence of S-9 metabolic activation system, respectively. Also, in the comet assay, the induction of DNA damage was not observed in L5178Y mouse lymphoma cell line both in the absence or presence of S-9 metabolic activation system. From these results, no genotoxic effects of sophoricoside were observed in bacterial and mammalian cell systems used in these experiments.
Originating from the Oort cloud, some comets disappear to impact against the Sun or to split up by strong gravitational force. Then they don't go back to the Oort cloud. They are called sungrazing comets. The comets are detected by sublimation of ices and ejection of gas and dust through solar heat close to the Sun. There exists the charge transfer from heavy ions in the solar wind to neutral atoms in the cometary atmosphere by interaction with the solar wind. Cometary atoms would be excited to high electronic levels and their do-excitation would result in X-ray emission, or it would be scattering of solar X-ray emission by very small cometary grains. We calculated the X-ray emission applying the model suggested by Mendis & Flammer (1984) and Cravens (1997). In our estimation, the sungrazing comet whose nucleus size is about 1 km in radius might be detectable within a distance of 3 solar radius from the sun on soft X-ray solar camera.
Food irradiation has been steadily increasing in many countries in line with increasing international trade and concerns about naturally occurring harmful contaminants in food. Although irradiation provides an excellent safeguard for the consumer by destroying almost 100% of harmful bacteria, it is necessary to ensure the safety of irradiated foods. This study was performed to investigate the effect of an irradiated diet on lipid peroxidation in the plasma, liver, small intestinal mucosa, and lymphocyte DNA damage in mice. Eight-week old ICR mice were assigned to two groups to receive either non-irradiated or irradiated (10 kGy) diets containing 20.38% fish powder and 6.06% sesame seeds for 4 weeks. The resulting changes in the degrees of lipid peroxidation were evaluated based on the level of plasma and liver thiobarbituric acid reactive substance (TBARS), transmission electron micrograph of jejunal mucosa, and free radical-induced oxidative DNA damage in lymphocytes, as measured by alkaline comet assay (single cell gel electrophoresis). The peroxide values of the gamma irradiated diet were measured every week, and the sample for comet assay was taken at the end of the four week experimental period. There was no significant difference in food efficiency ratio between the two groups. The peroxide values of the diet were immediately increased to 35.5% after gamma irradiation and kept on increasing during storage. After 4 weeks, no differences in tissue or plasma TBARS value were observed between the two groups, but epithelial cells of jejumum showed osmiophillic laminated membranous structures, considered as myelin figures,. The oxidative DNA damage expressed as tail moment (TM) increased 30% in the blood lymphocytes of the mice fed the irradiated diet. In conclusion, the comet assay sensitively detected differences in lymphocyte DNA damage after feeding with the irradiated diet for 4 weeks. However, in order to ensure the safety of irradiated foods, it would be more useful to conduct a long-term feeding regimen using an irradiated diet and examine the level of lipid peroxidation and the state of oxidative stress in a greater range of organs.
Polarization is a rich source of information on the physical properties of astronomical objects. In particular, scattered sunlight by optically thin media (e.g., cometary comae) shows linear polarization of light, which highly depends on the phase angle (an angle between the Sun-Comet-Earth), wavelengths, and physical properties of cometary dust particles such as size, composition, and structures. Here, we present a study of polarimetric properties of non-periodic comet C/2013 US10 (Catalina) in optical and near-infrared wavelength regions obtained from imaging, spectroscopy, and polarimetric observations taken on UT 2015 December 17 - 19 welcoming its (probably) first close approach to the Earth. In this presentation, we want to introduce our progress since the last Korean Astronomical Society meeting (at BEXCO, Busan, 2016 April 14 - 15) especially in terms of spatial variations of degree of linear polarization (DOLP) and its possible scenarios to explain the correlations with other observational results. In particular, we found that there is strong anti-correlation between the gas/dust flux ratio and DOLP at the cometocentric distance of $(2-5){\times}104 km$. Besides, within 10 arcseconds in radii (corresponding to inner coma region of 104 km from the center), the inverse relationship of these two parameters does not hold anymore. We conjecture that the rapid outward increase of DOLP can be supported by either the sublimation/evaporation of icy volatiles, disaggregation of cometary dust particles ejected from the nucleus, and/or difference of dominant dust particle sizes. From our results, we can conclude that comet C/2013 US10 (Catalina) corroborates rather indefinite traditional classification of poalrimetric classes of comets, and provides good opportunity to study less processed material which probably cherishes its memory at the formation epoch of the Solar System.
Comets are one of the most primordial solar system objects that hold the information of the early days of solar system formation inside their nuclei. Orbiting the Sun, they spew such ancient materials that have been buried for many years, creating dust and gas comae. Cometary dust grains absorb and scatter sunlight radiating the continuous light, while gas molecules form the line emissions. Eachof the comets has its own light patterns, which depends on the physical and chemical properties of the dust and gas components. In this regard, spectropolarimetrycan be a powerful tool to study the properties of cometary constituents free from contamination of each other. This methodology offers a series of information on the polarization degrees of the dust and gas components as well as on wavelength dependence of the polarization degree and polarization angle of cometary dust simultaneously. Herein, we will report the results of the spectropolarimetric study of comet 2P/Encke, which is one of the well-known objects for its shortest orbital period and its prominent aging signals. We performed a spectropolarimetric observation of comet 2P/Encke in its inbound orbit using the Higashi-Hiroshima Optical and Near-Infrared Camera (HONIR) at the Higashi-Hiroshima Observatory, Japan, on UT 2017 February 21 at high phase angle of =75.7 deg. Ourstudy of this interesting comet is the first and only one done through spectropolarimetry in a referred publication. We will discuss the most recent polarimetric results of our study in terms of 2P/Encke' scurrent evolutionary status.
Smoke flavors based on the thermal decomposition of wood have been applied to a variety of food products as an alternative for traditional smoking. Despite its increasing use, the available genotoxicity data on wood smoke flavors (WSF) are still controversial. Thus, potential genotoxic effects of WSF in four short-term in vitro genotoxicity assays were investigated, which included the Ames assay, chromosomal aberration assay, micronucleus test and the alkaline comet assay. WSF did not cause any mutation in the Ames assay using five tester strains at six concentrations of 0.16, 0.31, 0.63, 1.25, 2.5 and 5 ${\mu}l/plate$. To assess clastogenic effect, the in vitro chromosomal aberration assay was performed using Chinese hamster lung cells. No statistically significant increase in the number of metaphases with structural aberrations was observed at the concentrations of 1.25, 2.5, and 5 ${\mu}l/ml$. The in vitro comet assay and micronucleus test results obtained on L5178Y cells also revealed that WSF has no genotoxicity potential, although there was a marginal increase in micronuclei frequencies and DNA damage in the respective micronucleus and comet assays. Taken together, based on the results obtained from these four in vitro studies, it is concluded that WSF is not a mutagenic agent in bacterial cells and causes no chromosomal and DNA damage in mammalian cells in vitro.
Kim, Youn-Jung;Kim, Mi-Soon;Jeon, Hee-Kyoung;Ryu, Jae-Chun
Molecular & Cellular Toxicology
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v.2
no.3
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pp.151-158
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2006
Khal was a synthetic congener of halocidin, a heterodimeric peptide consisting of 19 and 15 amino acid residues detected in Halocynthia aurantium. This compound was considered a candidate for the development of a novel peptide antibiotic. The genotoxicity of Khal was subjected to high throughput toxicity screening (HTTS) because they revealed strong antibacterial effects. Mouse lymphoma thymidine kinase ($tk^{+/-}$) gene assay (MOLY), single cell gel electrophoresis (Comet) assay and chromosomal aberration assay in mammalian cells and Ames reverse mutation assay in bacterial system were used as simplified, inexpensive, short-term in vitro screening tests in our laboratory. These compounds are not mutagenic in S. typhimurium TA98 and TA100 strains both in the presence and absence of metabolic activation. Before performing the comet assay, $IC_{20}$ of Khal was determined the concentration of $25.51\;{\mu}/mL\;and\;21.99\;{\mu}g/mL$ with and without S-9, respectively. In the comet assay, Khal was not induced DNA damage in mouse lymphoma cell line. Also, the mutation frequencies in the Khal-treated cultures were similar to the vehicle controls. It is suggests that Khal is non-mutagenic in MOLY assay. And no clastogenicity was observed in Khal-treated Chinese hamster lung cells. The results of this battery of assays indicate that Khal has no genotoxic potential in bacterial or mammalian cell systems. Therefore, we suggest that Khal, as the optimal candidates with both no genotoxic potential and antibacterial effects must be chosen.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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