• 한국동물학회지
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• 제39권2호
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• pp.123-131
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• 1996

In this study, we examined the expression of heat shock proteins (HSPs) in fish cell line CHSE-2lnl and human HeLa cells exposed to heat shock. In fish CHSE-214 cells HSP70 was the major polvpeptide induced by an elevated temperature or an amino acid analog, while in HeLa cells HSP90 as well as HSP70 were prominently enhanced in response to these stresses. Pretreatment of actinomvcin D prior to heat shock completely inhibited the induction of fish HSP70, indicating the transcriptional regulation of fish HSP70 gene expression. In HeLa and CHSE-214 cells either recovering from heat shock or experiencing prolonged heat shock, attenuation in the HSP90 a'nd HSP70 induction occurred but both induction and repression of HSP70 synthesis appear 19 precede those of HSP90. Moreover, attenuation did not occur in the syntheses of 40 kDa and 42 kOto proteins which were only induced in CHSE-214 cells. The enhanced syntheses of these he proteins continued as long as CHSE-214 cells were Siven heat shock. These results suggest that down-regulation of HSP syntheses during prolonged heat shock may be controlled by several different. as vet undefined, mechanisms.

• 한국어병학회지
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• 제5권1호
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• pp.1-7
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• 1992

CHSE-214 무지개송어 세포주는 10% fetal bovine serum과 2mM-glutamine이 첨가된 Eagle's 기본배지에서 성장하였다. CHSE-214 세포주의 최적온도는 $20^{\circ}C$였다. IPN바이러스는 CHSE-214 세포주에서 복제되었으며, 세포변성효과를 나타내었다. 또한 IPN 바이러스의 감염시간에 따른 감염증상을 역위상차 현미경으로 관찰하였다. 감염 6-12시간 후 세포는 정상세포와 비슷하였다. 감염 18-24시간 후 세포는 일부가 정상 세포보다 더 둥근형태로 되었고, 일부세포는 세포배양용 플라스크 바닥에서 떨어져 부유상태로 되었다. 감염 30시간 후 세포는 더더욱 비정상적인 형태로 되었다. 감염 48~68시간 후 감염된 세포는 파열되었고, 아주 높은 세포 병변 효과를 나타내었다.

• 한국어병학회지
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• 제34권1호
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• pp.17-22
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• 2021

Eukaryotic translation is initiated by either cap-dependent or cap-independent way, and the cap-independent translation can be initiated by the internal ribosomal entry site (IRES). In this study, to know whether the 5'UTR leader sequence of marine birnavirus (MABV) segment A and segment B can act as IRES, bicistronic vectors harboring a CMV promoter-driven red fluorescent gene (mCherry) and poliovirus IRES- or MABV's leader sequence-driven green fluorescent gene (eGFP) were constructed, then, transfected into a mammalian cell line (BHK-21 cells) and a fish cell line (CHSE-214 cells). The results showed that the poliovirus IRES worked well in BHK-21 cells, but did not work in CHSE-214 cells. In the evaluation of MABV's leader sequences, the reporter eGFP gene under the 5'UTR leader sequence of MABV's segment A was well-translated in CHSE-214 cells, indicating 5'UTR of MABV's segment A initiates translation in the cap-independent way and can be used as a fish-specific IRES system. However, the 5'UTR leader sequence of MABV's segment B did not initiate translation in CHSE-214 cells. As the precise mechanism of birnavirid IRES-mediated translation is not known, more elaborate investigations are needed to uncover why the leader sequence of segment B could not initiate translation in the present study. In addition, further studies on the host species range of MABV's segment A IRES and on the screening of other fish-specific IRESs are needed.

• 한국어병학회지
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• 제11권2호
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• pp.89-96
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• 1998

해양버나바이러스(MABV)는 여러 종의 해양생물에 감염되며 숙주역이 넓다. 다양한 종의 숙주에 감염되었을 때의 MABV의 감염 특성을 규명하기 위하여, 주화세포 내에서 바이러스를 10대 계대 배양하여 in vitro로 연구했다. CHSE-214, RTG-2와 RSBK-2세포에서는 전형적인 CPE를 보이며 많은 양의 바이러스가 생산되었고, 높은 바이러스 단백질의 발현도 관찰되었다. 이에 반하여, EPC, FHM과 BF-2세포에서는 형광항체법에 의하여 바이러스단백질은 검출되었으나 CPE는 나타나지 않았다. EPC와 FHM 세포에서는 계대를 할수록 바이러스의 역가가 높아져, 바이러스의 숙주세포에의 적응이 일어난 것으로 보인다. 플라크의 크기는 CHSE-214, RTG-2와 RSBK-2세포에서 계대한 것이 다른 세포에서 계대한 것보다 커, 숙주세포의 종류에 따른 변이가 바이러스에 일어난 것으로 추측되었다. 게놈분절 A에 존재하는 VP2/NS 경계영역의 염기배열에서는 195번째의 염기에 특이적인 변이가 보였다. 숙주세포의 종류에 따라 다른 MABV의 감염특성은 자연계에서 다양한 숙주종에서 일어나는 in vivo에서의 감염특성을 반영하는 것으로 생각된다.

• 한국양식학회지
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• 제11권4호
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• pp.457-463
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• 1998

미꾸라지(Misgrunus mizolepis)의 DNA로부터 클론된 핵기질 부착부위(MAR)를 포함하는 발현벡터인 pUC19N6-luc 벡터를 구성하였다. 이를 물고기 CHSE-214 세포주에 electroporation으로 transfection 시킨 후 유전자의 발현율, 벡터의 copy 수 및 염색체내 삽입 양상을 luciferase 활성도 분석, PCR 및 Southern blotting를 통해 분석하였다. 대조군 발현벡터에 luciferase 유전자는 전형적인 transient 발현양상을 나타내는데 비해, 미꾸라지 MAR가 포함된 pUC19N6-luc 벡터의 luciferase 유전자의 발현은 transfection 후 5일째부터 급격히 증가하는 양상을 보였다. Transfection된 CHSE-214 세포내에서 pUC19N6-luc 벡터는 대조군 벡터에 비해 높은 copy 수를 유지하였으나, 염색체내 삽입은 거의 비슷한 시간에 일어났다. 결론적으로 transfection 후 시간경과에 따른 pUC19N6-luc 벡터내의 luciferase 유전자의 발현 증가에 미치는 MAR의 효과는 벡터 copy수 증가 때문이 아니라, 염색체내 삽입후 형성되는 전사활성구조의 형성에 기인하는 것으로 판단된다.

• 한국어병학회지
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• 제7권1호
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• pp.7-11
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• 1994

무지개송어(Salmo gairdneri)의 바이러스성 출혈성 패혈증에 관하여 연구하였다. 병어의 hematocrit값은 정상어보다 매우 낮게 나타났으며, GOT와 GPT값은 정상어보다 병어에서 약간 높게 나타났다. 병어의 혈청과 장기의 마쇄액을 CHSE-214세포에 감염시켜 세포변성 효과를 조사한 결과 감염 24시간 후에 세포변성이 나타났다.

• 한국동물학회:학술대회논문집
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• 한국동물학회 1996년도 공동 춘계학술대회
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• pp.50.2-50
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• 1996

No Abstract, See Full Text

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제5권1호
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• pp.32-35
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• 2002

In this study, we investigated the mechanism of cell death in rhabdovirus-infected cells, chinook salmon embryonic cell line (CHSE-2l4) infected with hirame rhabdovirus (HIRRV). Studies using light microscopy, fluorescence microscopy, TUNEL method, electron microscopy, and agarose gel electrophoresis revealed changes in the cell morphology and DNA fragmentation indicative of apoptosis in early infection. It was observed that HIRRV induced apoptosis as well as necrosis in infected cells.

• 한국어병학회지
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• 제23권3호
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• pp.335-342
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• 2010

2008년 3월 인도네시아로부터 수입된 paradise fish에서 대량폐사가 발생하여 병원체 검사를 실시한 결과, megalocytivirus 및 Mycobacterium sp.가 검출되었으며, CHSE-214세포에서 미동정 바이러스가 분리되었다. 본 연구에서는 미동정 바이러스의 특성을 조사하였으며, 또한 병원성 실험을 통해 paradise fish의 대량 폐사와의 연관성을 조사하였다. 분리 바이러스는 CHSE-214, BF-2, GF, SSN-1, FSP 및 FFN 세포에서 합포체의 세포변성효과를 나타내었고 IUdR 및 chloroform 처리에 감염성이 상실되지 않으며, 산 (pH 3), 알카리 (pH 11) 및 열 ($56^{\circ}C$, 30분)에 안정하였다. 핵산 분석 결과에서는 적어도 10개의 segment (0.7-3.6 kb)를 지닌 RNA 바이러스로 확인되었으며, 전자현미경 관찰 결과, 약 65 nm 크기로 인벨롭이 없으며 2중의 capsid를 지닌 바이러스가 세포질에서 관찰되었다. 이상의 결과는 Reoviridae family에 속하는 바이러스의 전형적인 특성과 일치하므로 paradise fish에서 분리된 바이러스는 reovirus로 확인되었다. Reovirus를 사용한 감염실험에서는 병원성이 나타나지 않아, reovirus는 paradise fish의 대량 폐사의 직접적인 원인이 아닐 것으로 사료되었다.

• 한국수산과학회지
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• 제30권6호
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• pp.948-955
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• 1997

Immunomagnetic separation of virus coupled with .reverse transcription-polymerase chain reaction (IMS-PCR) was performed with infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV). A DNA fragment of expected size was synthesized in the RT-PCR with total RNA extracted from IHNV inoculated CHSE-214. In a SDS-PAGE analysis, a protein band of over 70kDa was detected from non-infected cells and cells inoculated with IHNV and infectious pancreatic necrosis virus (IPNV). This protein was detected in the Western blot analysis probably because of non-specific reaction to monoclonal antibody against IHNV nucleocapsid protein. In the immunomagnetic separation, magnetic beads coated with monoclonal antibody against the IHNV nucleocapsid protein was incubated with supernatant from IHNV inoculated CHSE-214 cells. During this process, the non-specifically reacting protein could be removed by washing the magnetic bead with PBS in the presence of an external magnetic field, and viral proteins were detected from the remaining, cleaned magnetic beads. It was necessary to extract viral RNA from the captured virus particles before RT-PCR, and no DNA product was detected when the captured virus was only heated 5 min at $95^{\circ}C$. A PCR-product of expected size was synthesized from IMS-PCR with magnetic beads double coated either by goat anti-mouse IgG antibody -monoclonal antibody or streptavidin - biotin conjugated monoclonal antibody.