In this study we cloned and characterized a novel lipid-accumulating gene, the oxidized low-density lipoprotein receptor 1 (OLR1), which is associated with lipogenesis. We analyzed the gene structure and detected the mRNA transcriptional expression levels in pig adipose tissues at different months of age (MA) and in different economic types (lean type and obese type) using real-time fluorescence quantitative PCR. OLR1 expression profile in different tissues of pig was analyzed. Finally, we studied the correlation between OLR1 and lipid metabolism related genes including peroxisome proliferator-activated $receptor{\gamma}2$ ($PPAR{\gamma}2$), fatty acid synthetase (FAS), triacylglycerol hydrolase (TGH), CAAT/enhancer binding protein $\alpha$ ($C/EBP{\alpha}$) and sterol regulatory element binding protein-1c (SREBP-1c). Results indicated that the OLR1 gene of the pig exhibited the highest homology with the cattle (84%), and the lowest with the mouse (27%). The signal peptide located from amino acid 38 to 60 and the domain from amino acid 144 to 256 were shared by the C-type lectin family. The expression level of OLR1 in pig lung was exceedingly higher than other tested tissues (p<0.01). In pig adipose tissue, the expression level of OLR1 mRNA increased significantly with growth (p<0.01). The expression level of OLR1 mRNA in obese-type pigs was significantly higher than that of lean-type pigs of the same monthly age (p<0.05). In adipose tissue, the expression of OLR1 correlated with $PPAR{\gamma}2$, FAS and SREBP-1c, but not TGH or C/EBP${\alpha}$. In conclusion, OLR1 was highly associated with fat deposition and its transcription, as suggested by high correlations, was possibly regulated by $PPAR{\gamma}2$ and SREBP-1c.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Adipogenesis is part of the cell differentiation process in which undifferentiated fibroblasts (pre-adipocytes) become mature adipocytes with the accumulation of lipid droplets and subsequent cell morphological changes. Several transcription factors and food components have been suggested to be involved in adipogenesis. The aim of this study was to determine whether mulberry leaf ethanol extract (MLEE) affects adipogenesis in 3T3-L1 adipocytes. MATERIALS/METHODS: The 3T3-L1 adipocytes were treated with different doses of MLEE for 8 days starting 2 days post-confluence. Cell viability, fat accumulation, and adipogenesis-related factors including CCAAT-enhancer-binding protein alpha ($C/EBP{\alpha}$), peroxisome proliferator-activated receptor gamma ($PPAR{\gamma}$), $PPAR{\gamma}$ coactivator 1 alpha (PGC-$1{\alpha}$), fatty acid synthase (FAS), and adiponectin were analyzed. RESULTS: Results showed that MLEE treatments at 10, 25, 50, and $100{\mu}g/ml$ had no effect on cell morphology and viability. Without evident toxicity, all MLEE treated cells had lower fat accumulation compared with control as shown by lower absorbances of Oil Red O stain. MLEE at 50 and $100{\mu}g/ml$ significantly reduced protein levels of $PPAR{\gamma}$, PGC-$1{\alpha}$, FAS, and adiponectin in differentiated adipocytes. Furthermore, protein level of $C/EBP{\alpha}$ was significantly decreased by the treatment of $100{\mu}g/ml$ MLEE. CONCLUSION: These results demonstrate that MLEE treatment has an anti-adipogenic effect in differentiated adipocytes without toxicity, suggesting its potential as an anti-obesity therapeutic.
Lee, Ki Yeon;Hong, Soo Young;Kim, Tae Hee;Kim, Jai Eun;Park, A-Reum;Noh, Hee Sun;Kim, Si Chang;Park, Jong Yeol;Ahn, Mun Seob;Jeong, Won Jin;Kim, Hee Yeon
Journal of Food Hygiene and Safety
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v.33
no.2
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pp.131-139
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2018
Our review begins with the maize hybrid for grain, called 'Seakso 1,' which was developed in 2008 by the Gangwon Agricultural Research and Extension Services in Korea, and subsequently registered in 2011. In this study, we aimed to investigate the lipid metabolic enzyme activity and inhibitory effect on the adipocyte differentiation, in 3T3-L1 cells of the identified Seakso 1 corn husk and cob extracts (EHCS). We investigated the pancreatic lipase inhibitory effect and anti-adipogenic effect of EHCS.The lipid accumulation and adipocyte differentiation were measured by the procedure of Oil Red O staining, Real-time PCR and the Western blot analysis. The pancreatic lipase inhibitory activity of EHCS was measured at higher levels than those of the positive control (orlistat) at 100, 500, and $1,000{\mu}g/mL$. In particular, EHCS was noted as being significantly inhibited and including a measured adipocyte differentiation and lipid accumulation, when treated during the adipocyte differentiation process in 3T3-L1 cells. Based on the Oil Red O staining, EHCS inhibited lipid accumulation at 19.19%, 33.30% at $1000{\mu}g/mL$, $2000{\mu}g/mL$, respectively. The real-time PCR and Western blot analysis showed that EHCS significantly decreased in the mRNA expression and protein level of obesity-related factors, such as peroxisome-proliferatorsactivated-receptor-${\gamma}$ ($PPAR{\gamma}$) and CCAAT enhancer-binding-proteins ${\alpha}$ ($C/EBP{\alpha}$). This study potentially suggests that the Saekso 1 corn husk and cob extracts may improve lipid metabolism and reduce lipid accumulation.
The inhibitory effects of adipogenesis on ethyl acetate (EtOAc) fraction from leaves of the Tulip tree (TT) were evaluated. Exposure to TT EtOAc fraction (25~200 ${\mu}g/mL$) for a 72 hr incubation period did not significantly change cell viability. TT EtOAc fraction, with concentrations of 100 and 200 ${\mu}g/mL$, inhibited lipid accumulation in 3T3-L1 adipocytes in a dose dependent manner in adipogenesis. The expression of $PPAR{\gamma}$ and $C/EBP{\alpha}$, essential adipogenic markers, was significantly decreased when TT EtOAc fraction was added to cells for 8 days as compared with the untreated control group. These results suggest that TT EtOAc fraction might be a potential therapeutic agent as an effective, natural alternative material for obesity treatment.
In this study, the potential capacity of the crude extract and its solvent fractions from S. siliquanstrum against adipocyte differentiation were evaluated in 3T3-L1 adipocytes. The anti-adipogenic effect of S. siliquanstrum was evidenced by the fact that its crude extract decreases the lipid accumulation of differentiating cells and the expression levels of crucial adipogenesis markers, peroxisome proliferator-activated receptor $(PPAR){\gamma}$ and CCAAT/enhancer-binding protein $(C/EBP){\alpha}$. All solvent fractions except the water fraction showed an observable decrease in lipid accumulation and $PPAR{\gamma}$ and $C/EBP{\alpha}$ expressions. In conclusion, these results suggest that S. siliquanstrum possesses obesity inhibiting components, which may possibly be used as a valuable anti-obesity agent for reducing the risk of obesity.
Kwon, Da Hye;Choi, Yung Hyun;Kim, Byung Woo;Hwang, Hye Jin
Journal of Life Science
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v.29
no.2
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pp.209-214
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2019
Sargassum horneri (Turner) C. Agardh is a marine brown algae widely distributed in the North Pacific Ocean. It is known for its anti-inflammatory and anti-atopic effects. In this study, we determined the effects of ethanol extract of Sargassum horneri (Turner) C. Agardh (EESH) on anti-obesity activities in 3T3-L1 preadipocytes. Our results indicated that treatment with EESH decreased the differentiation of 3T3-L1 preadipocytes in a dose-dependent manner, as confirmed by a decrease in lipid droplet content observed by oil red O staining. The concentrations of cellular triglycerides were also reduced in 3T3-L1 cells after treatment with EESH. Triglyceride content was inhibited by 13%, 16%, and 23% after treatment with 250, 500, and $1,000{\mu}g/ml$ of EESH in 3T3-L1 cells, respectively. Western blotting analysis showed that EESH suppressed adipogenic transcription factor expression in a dose dependent manner. Specifically, it suppressed cytidine-cytidine-adinosine-adenosine-thymidine (CCAAT) /enhancer binding proteins $(C/EBP){\alpha}$, $C/EBP{\beta}$ and peroxisome proliferator-activated receptor $(PPAR){\gamma}$. This indicated that EESH could control the expression of adipogenic transcription factors and inhibit the differentiation of adipocytes. Taken together, these findings demonstrated that EESH showed anti-obesity effects and could have potential uses in the field of nutraceuticals.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.43
no.11
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pp.1688-1694
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2014
Jeju Hallabong Tangor (Citrus kiyomi${\times}$ponkan) is a Citrus species with a variety of physiological properties such as anti-oxidant, anti-inflammation, anti-cancer, and anti-obesity. We investigated the anti-obesity effects of Hallabong Tangor peel extracts before (HLB) and after (HLB-C) bioconversion with cytolase based on modulation of adipocyte differentiation and lipid metabolism in 3T3-L1 adipocytes. Treatment with cytolase decreased flavanone rutinoside forms (narirutin and hesperidin) and increased flavanone aglycone forms (naringenin and hesperetin). During adipocyte differentiation, 3T3-L1 cells were treated with 0.5 mg/mL of Sinetrol (a positive control), HLB or HLB-C. Adipocyte differentiation was inhibited in both citrus groups, but not in control and Sinetriol groups. HLB and HLB-C tended to reduce insulin-induced mRNA levels of CCAAT/enhancer-binding protein ${\alpha}$ ($C/EBP{\alpha}$) and sterol regulatory element-binding protein 1c (SREBP1c). Compared to the control and Sinetrol groups, HLB and HLB-C markedly suppressed insulin-induced protein expression of $C/EBP{\alpha}$ and peroxisome proliferator-activated receptor gamma ($PPAR{\gamma}$). The HLB and Sinetrol groups, but not HLB-C group, significantly increased adipolytic activity with higher release of free glycerol compared to the control group in differentiated 3T3-L1 adipocytes. These results suggest that bio-conversion of Hallabong Tangor peel extracts with cytolase increases aglycone flavonoids. Irrespective of bioconversion, both Hallabong Tangor peel extracts exert anti-obesity effects that may contribute to prevention of obesity through inhibition of adipocyte differentiation or induction of adipolytic activity.
Thiazolidinediones (TZDs) act as potent activators of the adipose differentiation program in established preadipose cell lines. TZD's have also been investigated in diabetic patients and reported to act as PPAR-${\gamma}$ ligands. In this report, the effects of TZDs on the differentiation pathway of myoblasts have been investigated. C2C12 mouse myoblasts were grown in Dulbecco's Modified Eagles medium for 4-5 days until they reached almost 100% confluency. Post-confluent cells (day 0) were further exposed to adipogenic induction medium along with TZDs for 48 hours. Thereafter, cells were exposed only to TZDs every 48 h until day 10. The control was provided with differentiation medium without any treatment. Alterations in the cells during the differentiation programme were analyzed on the basis of fusion index, oil-red-o staining, adipocyte index, adipocyte stain uptake measurement, immuno-histochemistry and western blotting. Exposure of C2C12 mouse myoblasts to TZDs prevented the expression of myosin heavy chain with parallel increase in the expression of C/EBP-${\alpha}$ and PPAR-${\gamma}$ and acquisition of adipocyte morphology, thus abolishing the formation of multinucleated myotubes. TZDs exert their adipogenic effects only in non-terminally differentiated myoblasts; myotubes were insensitive to the compound. Continuous exposure (at least 4-5 doses) to inducers after the growth arrest was essential to provide a sustained environment to the cells converting to fully matured adipoctyes. The results indicate that TZDs specifically converted the differentiation pathway of myoblasts into that of adipoblasts.
Objective : This experimental study was designed to determine the effects of BPT on obesity in vivo and in vitro. Methods : in vitro, BPTn extracts of various concentration(50, 100, 200 ${\mu}g/m{\ell}$) were added in 3T3-L1 cell. Adipocyte differentiation was measured by Oil Red O staining and Morphological examination. The expression of $C/EBP{\alpha}$ and $PPAR{\gamma}$ receptor was measured by western blot assay and RT-PCR in vivo, Rats were orally administered BPT daily for consecutive four weeks before poloxamer-407 induced hyperlipidemic state. The rats were sacrificed 24 hrs later for poloxamer-407 treated and then serum triglyceride, total cholesterol were measured ; Rats were orally administered BPT daily for consecutive four weeks before triton WR-1339 induced hyperlipidemic state. The rats were sacrificed 40 hrs later for triton WR-1339 treated and then serum triglyceride, total cholesterol were measured ; Rats with obesity were induced by the high fat-diet for six weeks and then serum triglyceride, total cholesterol, LDL-cholesterol, triglyceride, HDL-cholesterol, hydroxy radical, superoxide dismuatse activity were measured. Results : In vitro, The 3T3-L1 cells' differentiation was significantly decreased by BPT. The expression of $C/EBP{\alpha}$ and $C/EBP{\beta}$ was decreased by BPT. In vivo, BPT significantly reduced serum triglyceride, total cholesterol contents in poloxamer-407 treated rat. BPT significantly reduced serum triglyceride contents in Triton WR-1339 treated rat. Total cholesterol also reduced but did not show a significant change. BPT significantly reduced body weight gain of rat and adipose tissue mass of rats and serum triglyceride, LDL-cholesterol contents and significantly increased HDL-cholesterol, HTR(HDL-cholesterol/Total-cholesterol) in rats with obesity induced by the high fat-diet. BPT reduced blood lipid peroxide, hydroxy radical and increased superoxide dismuatse(SOD) activity.
Park, Jung Ae;Jin, Kyong-Suk;Kwon, Hyun Ju;Kim, Byung Woo
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.42
no.4
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pp.354-360
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2014
In this study, the anti-obesity activity of Smilax china methanol extract (SCME) was evaluated using a pancreatic lipase enzyme inhibition assay, and a cell culture model system. Results indicated that, SCME effectively inhibited pancreatic lipase enzyme activity in a dose-dependent manner. Furthermore, SCME significantly suppressed insulin, dexamethasone, 3-isobutyl-1-methylxanthine-induced adipocyte differentiation, lipid accumulation, and triglyceride contents on 3T3-L1 preadipocytes, in a dose-dependent manner. The anti-adipogenic effect was modulated by cytidine-cytidine-adenosine-adenosine-thymidine (CCAAT)/enhancer binding proteins (C/EBP) ${\alpha}$, $C/EBP{\beta}$, and the peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}$ gene and protein expressions. Moreover, SCME triggered lipolysis effects dose-dependently on adipocyte. Taken together, these results provide an important new insight into SCME, indicating that it possesses anti-obesity activity through pancreatic lipase inhibition, anti-adipogenic and lipolysis effects. SCME may therefore be utilized as a promising source in the field of nutraceuticals. The identification of active compounds that confer the anti-obesity activities of SCME may be a logical next step.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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