A total of 144 ((Duroc${\times}$Yorkshire)${\times}$Landrace)) pigs with an average initial BW of $28.85{\pm}0.63$ kg were used in this 6-wk growth trial. Pigs were randomly allotted to 1 of 4 treatments in a completely random block design. Each dietary treatment consisted of 9 replicate pens, with 4 pigs per replicate. Dietary treatments included: i) NC (basal diet), ii) PC (NC+apramycin 0.5 g/kg), iii) BPT1 (NC+bacteriophage 0.25 g/kg) and iv) BPT2 (NC+bacteriophage 0.5 g/kg). The inclusion of antibiotics and bacteriophages did not affect the (p>0.05) ADG, ADFI and G:F compared with the basal diet. Dietary antibiotics and bacteriophages supplementation led to a higher (p<0.05) DM digestibility than the NC treatment. Pigs fed the bacteriophage supplemented diet increased (p<0.05) the N digestibility compared with those fed NC treatment. Supplementation of antibiotics led to a higher (p<0.05) energy digestibility than the NC treatment. No difference (p>0.05) was observed in the RBC, WBC, lymphocyte concentration and fecal moisture among treatments. Pigs fed PC and BPT2 treatments reduced (p<0.05) the E. coli concentration compared with those fed NC treatment. The inclusion of BPT2 treatment led to a higher (p<0.05) lactobacillus concentration compared with NC and PC treatment. Dietary antibiotic and bacteriophage supplementation reduced (p<0.05) the Salmonella concentration compared with NC treatment. In conclusion, our study suggested that bacteriophage at the level of 0.5 g/kg could be used as an antibiotics alternative for growing pigs.
본 연구는 bacteriophage의 급여가 육계의 생산성, 영양소 소화율, 혈액 특성, 장기 무게 및 분내 미생물 조성에 미치는 영향을 알아보기 위해 시험을 실시하였다. 사양 시험은 1일령 ROSS 308 (♂, ♀) 340수 공시하였고, 시험 개시 체중은 $41.71{\pm}0.16$ g으로 31일 간 실시하였다. 시험 설계는 1) CON, basal diet, 2) SE05, CON+bacteriophage SE 0.05%, 3) SE10, CON+bacteriophage SE 0.10% 및 4) SE15, CON+bacteriophage SE 0.15%로 4개 처리를 하여 처리당 5반복, 반복당 17수씩 완전임의 배치하였다. 1~14일령의 생산성에 있어서는 처리구간 유의적 차이가 없었다. 그러나 15~31일령에 있어서는 증체량에서 SE15 처리구가 CON 처리구보다 높게 나타났고, 전체 시험 기간 동안의 증체량에 있어서도 SE10 및 SE15 처리구가 CON 처리구보다 유의적으로 높게 나타났다. 영양소 소화율에서는 처리구 간 차이를 나타내지 않았고, 혈액 특성에 있어서도 처리구 간 차이를 나타내지 않았다. 도체 특성 중 가슴육의 보수력 있어서는 SE15 처리구가 CON 처리구보다 유의적으로 높게 나타났고, 장기 무게 중 F낭의 무게가 bacteriophage를 급여한 처리구에서 유의적으로 높게 나타났다. 분내 미생물 조성에 있어서는 처리구간 유의적 차이를 나타내지 않았다. 결론적으로, 본 시험의 결과 육계에 사료 내 bacteriophage를 첨가 시 증체량을 향상시키고, F낭의 무게를 증가시킨다. 또한 0.15% 급여시 가슴육의 보수력이 증가하는 효과를 나타내었다. 이와같은 결과는 bacteriophage의 첨가를 통하여 생산성과 면역력을 향상시켜주고 육내 보수력을 개선하여 보다 고품질의 계육을 생산할 수 있을 것으로 판단된다.
박테리오파지 P2 sir 변이체는 그것의 위성파지인 박테리오 파지 P4를 위해 비효율적인 도움파지로 알려졌다. 이러한 현상을 "P2 sir-관련 도움파지 비효율성"이라고 부르고 있으며, P2와 P4의 cos 지역에서의 DNA 염기배열 순서 차이가 이러한 현상을 나타나게 한다고 생각되었다. 이를 검증하기 위해, 여러 단계의 in vitro DNA 조작을 거쳐 P2의 cos 지역을 함유하는 유도체 P4인 P4 sid71 cosP2를 조성하였다. 일단계 생장 실험을 통해 그것의 후손 방출량을 결정하였다. 그 결과는, P4 sid71 cosP2에서 P4의 cos 지역을 P2의 cos 지역으로 대체한 것이 "P2 sir-관련 도움파지 비효율성"을 극복한 것으로 나타났다. P2 야생형과 P2 sir 돌연변이형을 도움파지로 삼아 준비한 P4 sid71 cosP2 파지 농축액들을 CsCl 부양 균등밀도 편차실험으로 분석하였다. 그 결과, 양 경우 모두 3개의 P4 유전체를 가진 파지 입자가 우세한 것으로 나타났다.
Functional protein of MB78 bacteriophage having apparent molecular weight of 22 kDa is expressed from 1.7 kb HindIII G fragment. The nucleotide sequence of this fragment showed two open reading frames of 222 and 196 codons in tail-to-tail orientation separated by a 62-nucleotide intercistronic region. The ORF of 22 kDa protein is present in opposite orientation, i.e. in the complementary strand, preceded by a strong ribosomal binding site and a promoter sequence. Another ORF started from the beginning of the fragment whose promoter region and translational start site lies in the 0.45 kb HincII U fragment which is located next to the HindIII G fragment, that has the sequence for DNA bending. 3' end of the fragment has high sequence homology to the EaA and EaI proteins of bacteriophage P22, a close relative of MB78 phage.
박테리오파지 P2-P4 시스템은 바이러스 조립과정 기작 연구를 위한 뛰어난 실험 소재로 연구되어 왔으나, 이 시스템에 유전자 조작상 필수적인 유용한 플라스미드가 없는 관계로 그의 필요성이 대두되고 있다. 본연구에서는 도움파지가 없을 때 플라스미드 상태로 존재하는 P4 ash8 (sid71)을 시작물질로, 항생제 내성 유전자를 도입하여 선택성을 줄 목적으로 P4 파지 증식에 불필요한 P4 DNA 단편을 pUC4-K 플라스미드의 kmr(kanamycin resistance) 유전자로 치환하여 P4 ash8(sid71) kmr을 생성하였다. 이 플라스미드는 박테리오파지 P2로 induction하여 박테리오파지 P4 상태로 증식시킬 수 있게 그 genome 크기를 조정하였으며, 파지 상태로 전환된 것을 burst size 결정 및 CsCl 부양 균등밀도 편차실험을 통해 입증하였다. 생성된 P4 플라스미드 유도체를 유전자 조작하여 P4의 integrase 기능을 잃은 변이체를 쉽게 만들 수 있었으며, 역시 박테리오파지 P4 상태로 증식시킬 수 있었다. 이러한 변이체 플라스미드의 안정성 실험을 수행하여, P4의 integrase 기능이 지속적인 플라스미드 상태 유지를 위해 필요하다는 것을 보여주었다.
This study was to review the classification, detection and control of bacteriophage in fermented dairy products. Bacteriophage has lytic and/or lysogenic life cycles. Epidemiologically speaking, detected major phages are c2, 936 and p335. Among them p335 has been the largest concern in dairy industry. Traditionally, various analytical technologies, such as spot, starter activity, indicator test, ATP measurement and conductimetric analysis, have been used for the phage detection. In recent years, advanced methods such as flow cytometric method, petrifilm, enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and multiflex PCR diagnostic kit have been deveoloped. The phage contamination has been controlled by using heat, high-pressure treatment, and the combinations of heat and pressure, and/or chemical. Also some starter cultures with phage-resistant character have been developed to minimize the concentration of phages in dairy product. Bacteriophage inhibition media such as calcium medium was also mentioned. To prevent the contamination of bacteriophage in dairy industry, further researches on the detection and control of phage, and phage resistant starters are necessary in the future.
바이러스 조립 과정 기작 연구를 위한 좋은 재료인 박테리오파아지 P2-P4 시스템의 packaging 기작 연구를 위해, 머리 크기 조절 유전자 변이체인 P4 ash8 sid7l의 파아지 입자가 함유하고 있는DNA의 형태를 분식하였다. 파아지 stock을 준비하고 이것의 CsCl부양균등 밀도 편차실험을 수행하여, 밀도가 다른 두개의 입자들로 분리하였다. 각 입자의 DNA를 분리한 후, 전기영동을 통해 함유된 DNA의 형태를 확인하였다. 예상과 달리, 각 입자들은 dimer, trimer 뿐 아니라 monomer도 함유하고 있다는 새로운 사실을 발견하였다.
본 연구는 박테리오파지의 급여가 육계의 생산성, 영양소 소화율, 혈액 특성, 장기무게 및 분내 미생물 조성에 미치는 영향을 알아보기 위해 시험을 실시하였다. 사양 시험은 1일령 ROSS 308(♂, ♀) 340수 공시하였고, 시험 개시 체중은 $41.14{\pm}0.17g$으로 31일간 실시하였다. 시험 설계는 1) CON(basal diet), 2) CP05(CON + bacteriophage CP 0.05%), 3)CP10(CON + bacteriophage CP 0.10%), 4) CP15(CON + bacteriophage CP 0.15%)로 4개 처리를 하여 처리당 5반복, 반복당 17수씩 완전 임의 배치하였다. 1~14일령의 생산성에 있어서는 처리구 간 유의적 차이가 없었다. 그러나 15~31일령에 있어서는 증체량 및 사료 섭취량에서 CP15 처리구가 CON 처리구보다 높게 나타났고, 전체 시험 기간 동안의 증체량에 있어서도 CP10 및 CP15 처리구가 CON 처리구보다 유의적으로 높게 나타났다. 영양소 소화율 및 혈액 특성에 있어서 처리구 간 차이를 나타내지 않았다. 도체 특성 중 가슴육의 보수력 있어서 박테리오파지를 첨가한 처리구가 CON 처리구보다 유의적으로 높게 나타났고, 장기 무게 중 F낭의 무게에 있어 CP05 처리구가 CON 처리구에 비해 유의적으로 높게 나타났다. 분내 미생물 조성에 있어서는 처리구간 유의적 차이를 나타내지 않았다. 결론적으로, 육계 사료 내박테리오파지를 첨가 시 증체량을 향상시키고, F낭의 무게를 증가시키며, 가슴육의 보수력이 증가하는 효과를 나타내었다.
Park, JungKum;Lim, Jeong-A;Yu, Ji-Gang;Oh, Chang-Sik
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제28권9호
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pp.1542-1546
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2018
Bacterial canker in kiwifruit is caused by Pseudomonas syringae pv. actinidiae (Psa). In this study, the bacteriophage PPPL-1 effective against Psa was characterized. Belonging to the Podoviridae family, PPPL-1 was effective against most Psa strains as well as most Pseudomonas syringae pathovars. PPPL-1 carries a 41,149-bp genome with 49 protein coding sequences and is homologous to the previously reported phiPSA2 bacteriophage. The lytic activity of PPPL-1 was stable up to $40^{\circ}C$, within a range of pH 3-11 and under 365 nm UV light. These results indicate that the bacteriophage PPPL-1 might be useful to control Psa in the kiwifruit field.
Chlorine was used for inactivation of bacteriophage f2 at pH 5.5, 7.5, and 10.0 at $10^{\circ}C$. The inactivation rate phage with chlorine varied depending on the pH value and reaction time. Hypochlorous acid appeared to be the major species of free chlorine for the inactivation. Suevival of the phage treated with chlorine and infectivity of the RNA extracted from the chlorinated phage were examined. The RNA extracted from untreatd phage was chlorinated and its infectivity was assayed. All three samples showed similar rates of inactivation at pH 5.5 and 7.5, but the naked RNA was more susceptible to chlorine at pH 10.0. The rate of inactivation was compared naked RNA was more susceptible to chlorine at pH 10.0. The rate of inactivation was compared with specific and non-specific attachment of the phasge f2. The specific attachment of the phage increased after the phage had been inactivated by extended chlorination. Chlorine may penetrate to the becteriophage f2 by altering the structural integrity of the protein coat, but the main target of free chlorine for inactivation of the phage appeared to be the phage RNA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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