Alvarez, Vanessa Marques;Santos, Silvia Cristina Cunha dos;Casella, Renata da Costa;Vitae, RonaIt Leite;Sebastin, Gina Vazquez;Seldin, Lucy
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.18
no.12
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pp.1966-1974
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2008
A typical tropical soil from the northeast of Brazil, where an important terrestrial oil field is located, was accidentally contaminated with a mixture of oil and saline production water. To study the bioremediation potential in this area, molecular methods based on PCR-DGGE were used to determine the diversity of the bacterial communities in bulk and in contaminated soils. Bacterial fingerprints revealed that the bacterial communities were affected by the presence of the mixture of oil and production water, and different profiles were observed when the contaminated soils were compared with the control. Halotolerant strains capable of degrading crude oil were also isolated from enrichment cultures obtained from the contaminated soil samples. Twenty-two strains showing these features were characterized genetically by amplified ribosomal DNA restriction analysis (ARDRA) and phenotypically by their colonial morphology and tolerance to high NaCl concentrations. Fifteen ARDRA groups were formed. Selected strains were analyzed by 16S rDNA sequencing, and Actinobacteria was identified as the main group found. Strains were also tested for their growth capability in the presence of different oil derivatives (hexane, dodecane, hexadecane, diesel, gasoline, toluene, naphthalene, o-xylene, and p-xylene) and different degradation profiles were observed. PCR products were obtained from 12 of the 15 ARDRA representatives when they were screened for the presence of the alkane hydroxylase gene (alkB). Members of the genera Rhodococcus and Gordonia were identified as predominant in the soil studied. These genera are usually implicated in oil degradation processes and, as such, the potential for bioremediation in this area can be considered as feasible.
Pseudomonas sp. strain DJ-12 is a bacterial isolate capable of degrading 4-chlorobiphenyl (4CBP) as a carbon and energy source. The catabolic degradation of 4CBP by the strain DJ-12 was studied along with the genetic organization of the genes responsible for the crucial steps of the catabolic degradation. The catabolic pathway was characterized as being conducted by consecutive reactions of the meta-cleavage of 4CBP, hydrolytic dechlorination of 4-chlorobenzoate (4CBA), hydroxylation of 4-hydroxybenzoate, and meta-cleavage of protocatechuate. The pcbC gene responsible for the meta-cleavage of 4CBP only showed a 30 to 40% homology in its deduced amino acid sequence compared to those of the corresponding genes from other strains. The amino acid sequence of 4CBA-CoA dechlorinase showed an 86% homology with that of Pseudomonas sp. CBS3, yet only a 50% homology with that of Arthrobacter spp. However, the fcb genes for the hydrolytic dechlorination of 4CBA in Pseudomonas sp. DJ-12 showed an uniquely different organization from those of CBS3 and other reported strains. Accordingly, these results indicate that strain DJ-12 can degrade 4CBA completely via meta-cleavage and hydrolytic dechlorination using enzymes that are uniquely different in their amino acid sequences from those of other bacterial strains with the same degradation activities.
Collagenolytic proteases are widely used in the food, medical, pharmaceutical, cosmetic, and textile industries. Mesophilic collagenases exhibit collagenolytic activity under physiological conditions, but have limitations in efficiently degrading collagen-rich wastes, such as collagen from fish scales, at high temperatures due to their poor thermostability. Bacterial collagenolytic proteases are members of various proteinase families, including the bacterial collagenolytic metalloproteinase M9 and the bacterial collagenolytic serine proteinase families S1, S8, and S53. Notably, the C-terminal domains of collagenolytic proteases, such as the pre-peptidase C-terminal domain, the polycystic kidney disease-like domain, the collagen-binding domain, the proprotein convertase domain, and the β-jelly roll domain, exhibit collagen-binding or -swelling activity. These activities can induce conformational changes in collagen or the enzyme active sites, thereby enhancing the collagen-degrading efficiency. In addition, thermostable bacterial collagenolytic proteases can function at high temperatures, which increases their degradation efficiency since heat-denatured collagen is more susceptible to proteolysis and minimizes the risk of microbial contamination. To date, only a few thermophile-derived collagenolytic proteases have been characterized. TSS, a thermostable and halotolerant subtilisin-like serine collagenolytic protease, exhibits high collagenolytic activity at 60℃. In this review, we present and summarize the current research on A) the classification and nomenclature of thermostable and mesophilic collagenolytic proteases derived from diverse microorganisms, and B) the functional roles of their C-terminal domains. Furthermore, we analyze the cleavage specificity of the thermostable collagenolytic proteases within each family and comprehensively discuss the thermostable collagenolytic protease TSS.
The biodegradation rates of diesel oil by a selected diesel-degrading bacterium, Pseudomonas stutzeri strain Y2G1, and microbial consortia composed of combinations of 5 selected diesel-degrading bacterial were determined in liquid and soil systems. The diesel degradation rate by strain Y2G1 linearly increased $(R^2=0.98)$ as the diesel concentration increased up to 12%, and a degradation rate as high as 5.64 g/l/day was obtained. The diesel degradation by strain Y2G1 was significantly affected by several environmental factors, and the optimal conditions for pH, temperature, and moisture content were at pH8, $25^{\circ}C$, and 10%, respectively. In the batch soil microcosm tests, inoculation, especially in the form of a consortium, and the addition of nutrients both significantly enhanced the diesel degradation by a factor of 1.5 and 4, respectively. Aeration of the soil columns effectively accelerated the diesel degradation, and the initial degradation rate was obviously stimulated with the addition of inorganic nutrients. Based on these results, it was concluded that the major rate-limiting factors in the tested diesel-contaminated soil were the presence of inorganic nutrients, oxygen, and diesel-degrading microorganisms. To resolve these limiting parameters, bioremediation strategies were specifically designed for the tested soil, and the successful mitigation of the limiting parameters resulted in an enhancement of the bioremediation efficiency by a factor of 11.
Kobayashi, Y.;Suda, K.;Wakita, M.;Baran, M.;Hoshino, S.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.9
no.1
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pp.45-49
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1996
A series of in vitro experiments was conducted to investigate response of rumen bacterial deamination to the ionophore salinomycin. Addition of salinomycin to the inoculum, strained rumen fluid, depressed ammonia production from casein, while increased accumulation of ${\alpha}$-amino acids. This suggests an inhibitory effect of salinomycin on ruminal deamination. When the effect in washed bacterial suspension was monitored with individual amino acid, aspartic acid degradation was markedly inhibited by salinomycin. This inhibition was not observed when the mixed rumen bacteria were ultrasonically disrupted and used as the enzyme source. Extent of the inhibition tended to be higher in the bacteria source from sheep on a high roughage diet. From these results it was speculated that the inhibition of deamination with salinomycin is caused by a decreased transport of amino acid into the bacterial cells as well as a decreased proportion of deaminating bacteria in the rumen.
This paper was carried out to isolate and identify Aeromonas caviae which can degrade Sodium Dodecyl Benzene Sulfonate(SDBS) effectively. And the affecting factors for the ability of bacterial degradation were also studied. Frm October 1991 to February 1992, two hundred samples from sweage in Taegu area and Nakdong river waters in Talsung Gun area were tested. Minimal salt medium which contain SDBS only as a carbon source was used as a culture medium. The isolated new strain was identified as Aeromonas caviae Kim & Kweon. The optimal pH for SDBS degradation were 7.0 and temperature, $32^{\circ}C.$ It was taken 24 hours to degrade SDBS of 20mg/l completely under the optimal pH and temperature. And in the case of 30 mg/l of SDBS, it was taken 36 hours. The nitrogen sources were added to the minimal salt media containing 20mg/l of SDBS, and they were incubated at $32^{\circ}C$ for 14 hours. 86.9% SDBS were degraded after addition of 0.03% peptone as a organic nitrogen source. And 70.5% SDBS after addition of 0.05% ammonium sulfate as a inorganic nitrogen source. In the case of metal compounds(0.015%), the degradation rate for SDBS were 3.5 fold increased in the media containing magnesium chloride and calcium chloride than in the media that were not containing these metal compounds. And where the media containing magnesium chloride was 0.05%, the degradation rate was 65.8%. And above 0.3% NaCI, the degradation rate was decreased slowly.
Two isolated strains, Comamonas testosteroni CPW301 and Arthrobacter ureafaciens CPR706, were able to use 4-chlorophenol (4-CP) as a sole carbon and energy source. CPW301 was found to degrade 4-CP via a meta-cleavage pathway in which the chloro-substituent was eliminated even when 4-chlorocatechol was cleaved by the catechol 2, 3-dioxygenase. In contrast, CPR706 removed chloride from 4-CP prior to the ring-fission reaction, producing hydroquinone as a transient intermediate during 4-CP degradation. CPR706 exhibited much higher tolerance for 4-CP than CPW301, which was indicated by the maximum degradable concentration and degradation rate.
Kumar, Amit;Dewulf, Jo;Wiele, Tom Van De;Langenhove, Herman Van
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.19
no.9
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pp.1028-1033
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2009
In this study, the dynamics of living cells (LC) and dead cells (DC) in a laboratory-scale biofilm membrane bioreactor for waste gas treatment was examined. Toluene was used as a model pollutant. The bacterial cells were enumerated as fluoromicroscopic counts during a 140 operating day period using BacLight nucleic acid staining in combination with epifluorescence and confocal laser scanning microscopy (CSLM). Overall, five different phases could be distinguished during the biofilm development: (A) cell attachment, (B) pollutant limitation, (C) biofilm establishment and colonization, (D) colonized biofilm, and (E) biofilm erosion. The bioreactor was operated under different conditions by applying different pollutant concentrations. An optimum toluene removal of 89% was observed at a loading rate of 14.4 kg $m^{-3}d^{-1}$. A direct correlation between the biodegradation rate of the reactor and the dynamics of biofilm development could be demonstrated. This study shows the first description of biofilm development during gaseous toluene degradation in MBR.
Kim, Y.S.;Choi, J.H.;Bae, H.J.;Nilsson, T.;Daniel, G.
Journal of Conservation Science
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v.1
no.1
s.1
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pp.3-11
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1992
Micromorphological changes in waterlogged archaeological woods excavated from Sweden and Germany were investigated. Especially bacterial attacks on those wood samples under near anaerobic conditions were examined by transmission electron microscopy(TEM). The major feature of micromorphological alterations in those wood samples was the preferential destruction of secondary wood cell wall. In contrast, the middle lamella was not extensively degraded. Three distinct degradation patterns by bacteria were observed : erosion, cavitation and tunnelling bacteria. Erosion and cavitation bacteria attacked primarily $S_2$ layer, whereas tunnelling bacteria made the tunnel-like degradation along the $S_1$ layer. Tunnelling bacteria, in some samples, were able to degrade tunnel in the lignin-rich areas, such as middle lamella, suggesting that these bacteria had the capacity to degrade the lignin. IR spectra indicate that hemicellulose and cellulose in the waterlogged woods were preferentially decomposed. Breakdown of the lignin, on the other hand, was much slower.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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