Productivity of a rice plant is greatly influenced by salt stress. One of the ways to achieve tolerance to salinity is to transfer genes encoding protective enzymes from other organisms, such as microorganisms. The bacterial gene, mtlD, which encodes mannitol-1-phosphate dehydrogenase (Mtl-DH), was introduced to the cytosol of a rice plant by an imbibition technique to overproduce mannitol. The germination and survival rate of the imbibed rice seeds were markedly increased by transferring the mtlD gene when it was delivered in either a pBIN19 or pBmin binary vector. When a polymerase chain reaction was performed with the genomic DNAs of the imbibed rice leaves as a template and with mtlD-specific primers, several lines were shown to contain an exogenous mtlD DNA. However, a reverse transcription (RT)-PCR analysis revealed that not all of them showed an expression of this foreign gene. This paper demonstrates that the growth and germination of rice plants transiently transformed with the bacterial gene, mtlD, are enhanced and these enhancements may have resulted from the experssion of the mtlD gene. The imbibition method empolyed in this study fulfills the requirements for testing the function of such a putative gene in vivo prior to the production of a stable transgenic plant.
Hwang, Il Hwan;Lee, Chan Hee;Kim, Seon Woo;Sung, Ha Guyn;Lee, Se Young;Lee, Sung Sill;Hong, Hee Ok;Kwak, Yong-Chul;Ha, Jong K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.21
no.11
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pp.1604-1609
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2008
A series of in vitro and in vivo experiments were conducted to investigate the effects of the mixture of Tween 80 and cellulolytic enzymes (xylanase and cellulase) on total tract nutrient digestibility and rumen cellulolytic bacterial adhesion rates in Holstein steers. Ground timothy hay sprayed with various levels of Tween 80 and cellulolytic enzymes was used as substrates in an in vitro experiment to find out the best combinations for DM degradation. The application level of 2.5% (v/w) Tween 80 and the combination of 5 U xylanase and 2.5 U cellulase per gram of ground timothy hay (DM basis) resulted in the highest in vitro dry matter degradation rate (p<0.05). Feeding the same timothy hay to Holstein steers also improved in vivo nutrient (DM, CP, CF, NDF and ADF) digesibilities compared to non-treated hay (p<0.05). Moreover, Tween 80 and enzyme combination treatment increased total ruminal VFA and concentrations of propionic acid and isovaleric acid with decreased acetate to propionate ratio (p<0.001). However, adhesion rates of Fibrobacter succinogenes and Ruminococcus flavefaciens determined by Real Time PCR were not influenced by the treatment while that of Ruminococcus albus was decreased (p<0.05). The present results indicate that a mixture of Tween 80 and cellulolytic enzymes can improve rumen environment and feed digestibility with variable influence on cellulolytic bacterial adhesion on feed.
An attempt to produce more pigs in limited spaces inevitably generalized concentrated feeding operation (CFO). As concentrated pig production practice expanded, concerns on environmental issues grow concurrently. Since odor is the concerned most among those, we attempted to develop means to tackle odor emission from livestock operations. Previously, we excavated few microorganisms from pig manure and, one of them, Bacillus licheniformis was particularly useful to handle odor problem. In this study, we conducted our investigation to further characterize Bacillus licheniformis. Strain identification was conducted using Vitek 2 compact, and the optimal temperature and pH conditions to growth B. licheniformis were searched for by analyzing turbidity on O.D 600 nm. Results of this study can be summarized as these, (1) it was re-verified that the bacterial strain that purified from pig manure was, in fact, Bacillus licheniformis, (2) the bacterial growth was highest when the temperature was kept at $30^{\circ}C$, also (3) growth rate was dependent on media pH as it was high at neutral (6, 7 and 8) but dropped when it was diverged from neutral (4, 5, 9 and 10), and (4) regarding ammonia removal efficiency, B. licheniformis recorded 64% effectiveness after 48 h incubation and reached its highest (80%) at 72 h.
This study was conducted to evaluate the ensiling characteristics and the in situ degradability of a by-product feed (BF)-based silage. Before ensilation, the BF-based mixture was composed of 50% spent mushroom substrate, 21% recycled poultry bedding, 15% ryegrass straw, 10.8% rice bran, 2% molasses, 0.6% bentonite, and 0.6% microbial inoculant on a wet basis and ensiled for up to 4 weeks. The BF-based silage contained on average 39.3% moisture, 13.4% crude protein (CP), and 52.2% neutral detergent fiber (NDF), 49% total digestible nutrient, and 37.8% physically effective $NDF_{1.18}$ on a dry matter (DM) basis. Ensiling the BF-based silage for up to 4 weeks affected (p<0.01) the chemical composition to a small extent, increased (p<0.05) the lactic acid and $NH_3$-N content, and decreased (p<0.05) both the total bacterial and lactic acid bacterial counts from $10^9$ to $10^8$ cfu/g when compared to that before ensiling. These parameters indicated that the silage was fermented and stored well during the 4-week ensiling period. Compared with rice or ryegrass straws, the BF-based silage had a higher (p<0.05) water-soluble and filterable fraction, a lower insoluble degradable DM and CP fraction (p<0.05), a lower digestible NDF (p<0.05) fraction, a higher (p<0.05) DM and CP disappearance and degradability rate, and a lower (p<0.05) NDF disappearance and degradability rate. These results indicated that cheap, good-quality BF-based roughage could be produced by ensiling SMS, RPB, rice bran, and a minimal amount of straw.
Abundances and bacterivory of heterotrophic and mixotrophic nanoflagellates were investigated fourtimes between October 1993 and March 1995 in an estuarine system of the Mankyung and Dongjin rivers to understand distributions of nanoflagellates and ecological significance of bacterivory of nanoflagellates. Bacterivory of nanoflagellates were measured with fluorescently labeled bacteria (FLB). Heterotrophic and autotrophic flagellates showed a rage of 438-4,159 cells ml/SUP -1/ (mean of 2,145 cells ml/SUP -1/, n=20) and 971- 4,935 cells ml/SUP -1/ (mean of 2,2226 cells ml/SUP -1/, n-20), respectively. These two groups of nanoflagellates generally showed similar distributions of abundance. Abundances of heterotrophic nanoflagellates, known as major grazers of bacteria, and those of autotrophic nanoflagellates with chloroplasts showed statistically significant correlations with bacterial abundance (respectively, r$^2$=0.51 and r $^2$=0.47, p>0.05). Mixotrophic nanoflagellates seemed to comprise at least 4-23% of autotrophic nanoflagellate populations. Individual predation rates of heterotrophic nanoflagellates ranged from 2.2 to 14.2 bacteria flagellate/SUP -1/ h/SUP -1/ (mean of 4.9 bacteria flagellate/SUP -1/h/SUP -1/, n=16), and those of mixotrophic nanoflagellates from 1.6 to 9.7 bacteria flagellate/SUP -1/ h/SUP-1/ (mean of 3.7 bacteria flagellate /SUP -1/ h/SUP -1/, n=16). Bacterivory by mixotrophic nanoflagellates comprised from 30 to 69% of total nanoflagellates grazing on bacteria, indicating the significant role of mixotrophic nanoflagellates as grazers on bacteria in the study area. The ratios of grazing rates on bacteria to bacterial secondary production ranged widely from 0.06 to 1.23. In June, when abundances of total nanoflagellates were low, removal of bacteria by bacterivory of nanoflagellates was also a small fraction (0.08${\pm}$ 0.01, n=4) of bacterial production. In other seasons, nanoflagellates usually grazed on bacteria in significant fraction (0.06${\pm}$0.37, n=9) of bacterial production. Both heterotrophic and mixotrophic nanoflagellates appear to be major grazers on bacteria, and might transfer bacterial secondary production to higher trophic level in an estuarine system of the Mankyung and Dongjin rivers.
Objective: The aims of this study were to select one strain of Lactobacillus plantarum (L. plantarum) for a potential indigenous safe starter culture with low level antibiotic resistant and low biogenic amine production and evaluate its effect on biogenic amines reduction in Moo som. Methods: Three strains of indigenous L. plantarum starter culture (KL101, KL102, and KL103) were selected based on their safety including antibiotic resistance and decarboxylase activity, and fermentation property as compared with a commercial starter culture (L. plantarum TISIR543). Subsequently, the effect of the selected indigenous safe starter culture on biogenic amines formation during Moo som fermentation was studied. Results: KL102 and TISIR 543 were susceptible to penicillin G, tetracycline, chloramphenicol, erythromycin, gentamycin, streptomycin, vancomycin, ciprofloxacin and trimethoprim (MIC90 ranging from 0.25 to $4{\mu}g/mL$). All strains were negative amino acid-decarboxylase for lysis of biogenic amines in screening medium. For fermentation in Moo som broth, a relatively high maximum growth rate of KL102 and TISIR543 resulted in a generation time than in the other strains (p<0.05). These strain counts were constant during the end of fermentation. Similarly, KL102 or TISIR543 addition supported increases of lactic acid bacterial count and total acidity in Moo som fermentation. For biogenic amine reduction, tyramine, putrescine, histamine and spermine contents in Moo som decreased significantly by the addition KL102 during 1 d of fermentation (p<0.05). In final product, histamine, spermine and tryptamine contents in Moo som inoculated with KL102 were lower amount those with TISIR543 (p<0.05). Conclusion: KL102 was a suitable starter culture to reduce the biogenic amine formation in Moo som.
Yoo, Sun-Kyun;Brown, Ian;Cohen, Nancy;Gaugler, Randy
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.11
no.4
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pp.644-648
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2001
The biological control potential of entomopathogenic nematodes (EPN) can be enhanced by improved culture efficiency. Optimization of the media is a key factor for improving in vitro mass production of entomopathogenic nematodes. This study reports the effect of medium concentration. The medium is a combination of carbohydrates, lipids, proteins, sats, and growth factors, on the growth of Heterorhabditis bacteriophora and its symbiotic bacterium Photorhabdus liminescens. The overall optimal medium concentration for nematode recovery, hermaphrodite size, bacterial mass, infective juveniles (IJs) yield, and doubling time was 84 g/l. At this concentration rate, the doubling time of IJs production and the biomass of symbiotic bacteria was 1.6 days and 12.8 g/l, respectively. The maximum yield of $2.4{\times}{10^5}IJs/ml$ was attained within a one-generation cycle (eight days). The yield coefficient was $2.8{\times}{10^6}$ IJs/g medium, and the maximum productivity was $3.1{\times}{10^7}$ IJs per day. Medium concentration affected two independent factors, recovery and hermaphrodite size, which in turn influenced the final yield.
Recently, onset of bacterial disease, especially infiltration of chronic respiratory diseases have been increasing at high rate. The main cause of these diseases are originated from inappropriate sanitary management and slow progress in introducing system and herd free system, which are the base of productivity improvement in bigger pig management, Methods for the prevention and removal of these diseases, are divided into four categories. The first category includes prevention and removal of infectious diseases by organizing strict animal quarantine, enforcing vaccination, and legal regulation and disposal at the time of outbreak. The second category includes improvement of production systems. This purpose can be achieved by discontinuing the open herd system, which brings on the invasion of foreign pathogens and replacing the system by the closed type of farm. To Continue eradication process step-wisely by performing the all-in all-out system at every pig pen or herd level is also effective for this purpose. The third category includes introduction of herd free system can be achieved by repopulating conventional pigs with SPF pigs. If these means are unrealizable from economic or technical viewpoint, medicated early weaning system is perfomed. This system consists of disinfection of pigsty at pre-postpartum stage, application of drugs to pregnant sows and newborn piglets in accordance with the medication program, and early weaning and rearing of newborn piglets in isolation. The fourth category is sanital leading by veterinarians, aimed to eliminating incentives for diseases through diagnoses. Their main activities include periodical monitoring and improvement leading on each responsible subject.
The production and cation flux-mediated activation of the P-type ATPase in Helicobacter pylori was investigated. Using the polymerase chain reaction (PCR), the proton pump genotype of H. pylori was found to be positive for both F-type and P-type ATPases. Yet, their production in terms of enzyme specific activity varied substantially depending on H. pylori strains, ranging over 3-fold. Its main constituent appeared to be the P-type ATPase pool, in contrast to other common bacterial compositions. Interestingly, the F-type ATPase was observed only when intact H. pyloricells were exposed to pH 4.5 or above (37$^{\circ}C$ for 1 h). In contrast, significant amounts of the P-type ATPase still remained after 1 h of cell treatment even at pH below 4.5. By enriching the acidic medium with RPMI(pH 3.0), the P-type ATPase was stabilized, accompained by inactivation of the F-type ATPase. Using H. pylori membrane vesicles, it was found that ammionia-mediated cation flux increased the rate of ATP hydrolysis by the P-type ATPase. Accordingly, these data strongly suggest that the P-type ATPase is involved or functions as an effective regulator for the cation flux across the H. pylori membrane, thereby reducing the risk of excess proton influx.
In Korea the most important plant industry is the rice-growing but she has not yet attained self-sufficiency with regard to rice which is the basic food of Korean. In the past, various measures of increasing rice production have been tried with some success but the increasing rate of did not show the sufficient result. Judging from experiences, disease control may be the most important factor which has influence on increasing of rice production in Korea. During the past 60 years three periods divided by the transition of rice diseases were noted, and especially the recent transition attracted much attention . That is, sheath blight and stripe which were minor diseases in the past have promptly spread all over the country and caused heavy losses to rice plant, and also local outbreak of bacterial leaf blight and dwarf were noticed. Various environmental factors are related to such transition of rice disease. Above all, cultivated varieties susceptible to these diseases, increase of application of nitrogenous fertilizer, earlier transplanting and density of transplanting are considered to be lucre closely related to the development of these diseases and successive development of blast. On the other hand. application of forage fungicides such as organic mercury compounds specific to blast contributed to reduce prevalent area if blast in spite of wide spread of susceptible varieties and increase of application of nitrogenous fertilizer. These facts were confirmed by Korean investigators At the present which various diseases to control coexist in the same region, no one variety resistant to all of these diseases is provided and cultural practices for the control of these diseases often do not produce sufficient yield of rice. it is emphasized that a role of pesticides is very great.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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