Distribution of airborne microorganisms was determined with two different types of air samplers, the Anderson cascade sampler and the Aerobioscope sampler, in the vicinity of Taejon. The size distribution of particles carrying bacteria and fungi was concurrently measured. The concentration of detected viable airborne particles was greatly varied. It was observed that the number of microbial particles increased in April and October. The most isze o particles carrying bacteria was larger than 4.7 .mu.m in mean aerodiameter, which made up 69.8% of the total particle fraction. About 63.2% of fungi-carrying particles were smaller than 4.7 .mu.m in aerodiameter. The distribution of particles on Yellow Sand Phenomena days was also analyzed. The number of fine particles having mass median aero-diameter from 1.0 to 10.mu.m increased on Yellow Sand Phenomena days to about 6 times that on normal days and the n umber of colony forming unit (CFU/$\textrm{m}^3$) of airborne bacteria also increased by 4.3 times in April. The reuslts from the Anderson sampler showed that the concentration of bacteria increased greatly on the fraction of fine particles ranging from 0.6 $\mu$m to 4.7 $\mu$m in diameter. Unlike the increase in bacterial floraon Yellow Sand Phenomena days, the fungal concentration slightly decreased and showed a normal size distribution parttern. This study suggests that a long-range transmission of bacteria results form bacteria adsorbing onto the fine particles during the Yellow Sand Phenomena.
This experiment was conducted to obtain the have higher contents of pharmaceutical constituents as well as higher yield from colchicine induced diploid and tetraploid extracts of Platycodon grandiflorum. In order to determine the biological activity, this study was focused to evaluate the cytotoxicity, antimicrobial on the bronthus disease bacteria, antioxidant enzyme activity of diploid and tetraploid extracts in P. grandiflorum. The activities of antioxidant enzyme according to different solvent extracts were measured as superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), peroxidase (POD), and ascorbate peroxidase (APX). The cytotoxicity of methanol extracts of P. grandiflorum showed significant differences between tetraploid and diploid. That is, the cytotoxic effect against human cancer cell was higher in tetraploid than in diploid. At all extracts concentration, tetraploid samples showed high toxicity and the $IC_{50}$ (concentration causing 50% cell death) value showed the highest on HCT-116 cell ($105.91{\mu}g/mL$), and exhibited significant activity against the Hep 3B cell ($140.67{\mu}g/mL$), SNU-1066 cell ($154.01{\mu}g/mL$), Hela cell ($158.37{\mu}g/mL$), SNU-601 cell ($182.67{\mu}g/mL$), Calu-6 cell ($190.42{\mu}g/mL$), MCF-7 cell ($510.19{\mu}g/mL$). Antimicrobial activities of diploid P. grandiflorum were relatively low compared to tetraploid P. grandiflorum on most of the bacterial strains. In tetraploid P. grandiflorum, K. pneumoniae showed the clear zone formation (18~19 mm) of growth inhibition, followed by the clear zone formation of 13~15 mm on C. diphtheria and S. pyogenes. The antimicrobial activities in diploid P. grandiflorum were the highest on K. pneumonia (14~15 mm), and showed the clear zone formation of 11~12 mm on C. diphtheria and 12~13 mm on S. pyogenes. The antimicrobial activity is thought to look different depending on the bacterial strains and the polyploidy of P. grandiflorum. The root extract of P. grandiflorum had the highest (97.2%) SOD enzyme activity in ethyl acetate partition layer of tetraploid while water partition layer of diploid showed the lowest (48.6%) SOD enzyme activity. The activity of CAT showed higher values in the root of tetraploid than in the diploid of P. grandiflorum in all partition layers except butyl alcohol. The activities of APX and POD showed higher values in the root of tetraploid than in the diploid of P. grandiflorum in all fraction solvents except water layer. These results indicate that the tetraploid P. grandiflorum can be used as a source for developing cytotoxic agent and antimicrobials which can act against bronchus diseases bacterial strains.
Nguyen, Hoa Thi;Yu, Nan Hee;Park, Ae Ran;Park, Hae Woong;Kim, In Seon;Kim, Jin-Cheol
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.27
no.10
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pp.1763-1772
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2017
This study aimed to isolate and characterize antibacterial metabolites from Pharbitis nil seeds and investigate their antibacterial activity against various plant pathogenic bacteria. The methanol extract of P. nil seeds showed the strongest activity against Xanthomonas arboricola pv. pruni (Xap) with a minimum inhibition concentration (MIC) value of $250{\mu}g/ml$. Among the three solvent layers obtained from the methanol extract of P. nil seeds, only the butanol layer displayed the activity with an MIC value of $125{\mu}g/ml$ against Xap. An antibacterial fraction was obtained from P. nil seeds by repeated column chromatography and identified as pharbitin, a crude resin glycoside, by instrumental analysis. The antibacterial activity of pharbitin was tested in vitro against 14 phytopathogenic bacteria, and it was found to inhibit Ralstonia solanacearum and four Xanthomonas species. The minimum inhibitory concentration values against the five bacteria were $125-500{\mu}g/ml$ for the n-butanol layer and $31.25-125{\mu}g/ml$ for pharbitin. In a detached peach leaf assay, it effectively suppressed the development of bacterial leaf spot, with a control value of 87.5% at $500{\mu}g/ml$. In addition, pharbitin strongly reduced the development of bacterial wilt on tomato seedlings by 97.4% at $250{\mu}g/ml$, 7 days after inoculation. These findings suggest that the crude extract of P. nil seeds can be used as an alternative biopesticide for the control of plant diseases caused by R. solanacearum and Xanthomonas spp. This is the first report on the antibacterial activity of pharbitin against phytopathogenic bacteria.
Kim, Hyun-Jin;Yang, Ji-Young;Lee, Hyeon-Gye;Cha, Jae-Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.11
no.4
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pp.693-699
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2001
An intracellular levansucrase gene, lscR from Rahnella aquatilis ATCC 15552, was cloned and its nucleotide sequence was determined. Nucleotide sequence analysis of this gene revealed a 1,238 bp open reading frame coding for a protein of 415 amino acids. The levansucrase was expressed by using a T7 promoter in Escherichia coli BL21 (DE3) and the enzyme activity was detected in the cytoplasmic fraction. The optimum pH and temperature of this enzyme for levan formation was pH 6 and $30^{\circ}C$, respectively. The deduced amino acid sequence of the lscR gene showed a high sequence similarity (59-89%) with Gram-negative levansucrses, while the level of similarity with Gram-positive enzymes was less than 42%. Multiple alignments of levansucrase sequences reported from Gram-negative and Gram-positive bacteria revealed seven conserved regions. A comparison of the catalytic properties and deduced amino acid sequence of lscR with those of other bacterial levansucrases strongly suggest that Gram-negative and Gram-positive levansucrases have an overall different structure, but they have a similar structure at the active site.
Jo, Ji-Won;Hur, Sung-Ho;Han, Yong-Soo;Kim, Ji-Yeon
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.52
no.3
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pp.151-156
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2009
As part of an investigation to identify microorganisms that are biotechnologically interesting for industrial application, we isolated a bacterial strain from Chungkookjang that produces extracellular neutral lipase. In addition, the crude enzyme was characterized. This isolated strain, designated as JKA-3 was identified as Bacillus subtilis JKA-3 based on morphological, physiological and biochemical characteristics, as well as phylogenetic analysis using 16S rRNA gene sequence. The cells were rod-shaped and $0.6-0.8{\times}2.0-2.3\;{\mu}m$ in size. Optimal growth conditions were $35-40^{\circ}C$ and pH 6.0-8.0. The isolate was able to grow in up to 0-10.0% (w/v) NaCl. Optimal activity conditions of the crude lipase fraction of B. subtilis JKA-3 were pH of 7.0 at $35^{\circ}C$. This enzyme was stable in the pH ranging 6.0-8.0.
Alsaker, Keith V.;Paredes, Carlos J.;Papoutsakis, Eleftherios T.
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.10
no.5
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pp.432-443
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2005
Microarray technology has contributed Significantly to the understanding of bacterial genetics and transcriptional regulation. One neglected aspect of this technology has been optimization of microarray-generated signals and quality of generated information. Full genome microarrays were developed for Clostridium acetobutylicum through spotting of PCR products that were designed with minimal homology with all other genes within the genome. Using statistical analyses it is demonstrated that Signal quality is significantly improved by increasing the hybridization volume. possibly increasing the effective number of transcripts available to bind to a given spot, while changes in labeled probe amounts were found to be less sensitive to improving signal quality. In addition to Q-RT-PCR, array validation was tested by examining the transcriptional program of a mutant (M5) strain lacking the pSOL1 178-gene megaplasmid relative to the wildtype (WT) strain. Under optimal conditions, it is demonstrated that the fraction of false positive genes is 1% when considering differentially expressed genes and 7% when considering all genes with signal above background. To enhance genomic-scale understanding of organismal physiology, using data from these microarrays we estimated that $40{\sim}55%$ of the C. acetobutylicum genome is expressed at any time during batch culture, similar to estimates made for Bacillus subtilis.
About 3,000 bacterial colonies with esterase activities were isolated from soil samples by enrichment culture and halo-size on Luria broth-tributyrin (LT) plates. The colonies were assayed for esterase activity in microtiter plates using enantiomerically pure (R)- and (S)-2-phenylbutyric acid resorufin ester (2PB-O-res) as substrates. Two enantioselective strains (JH2 and JH13) were selected by the ratio of initial rate of hydrolysis of enantiomerically pure (R)- and (S)-2-PB-O-res. When cell pellets were used, both strains showed high apparent enantioselectivity ($E_{app}>100$) for (R)-2PB-O-res and were identified as Exiguobacterium acetylicum. The JH13 strain showed high esterase activity on p-nitrophenyl acetate (pNPA), but showed low lipase activity on p-nitrophenyl palmitate (pNPP). The esterase was located in the soluble fraction of the cell extract. The crude intracellular enzyme preparation was stable at a pH range from 6.0 to 11.0.
Kim, Yang-Woo;Chun, Sung-Sik;Chung, Young-Chul;Sung, Nack-Kie
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.23
no.6
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pp.652-658
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1995
We attempted simultaneous expression of genes coding for endoglucanase and $\beta $-glucosidase from Pseudomonas sp. by using a synthetic two-cistron svstem in Escherichia coli and Saccharomyces cerevisiae. Two-cistron system, 5'--tac promoter-endoglucanase gene--$\beta $-glucosidase gene-- 3', 5'-tac promoter--$\beta $-glucosidase gene--endoglucanase gene--3' and 5'-tac promoter--endoglucanase gene--SD sequence--$\beta $-glucosidase gene--3, were constructed, and expressed in E. coli and S. cerevisiae. The E. coli and S. cerevisiae contained two-cistron system produced simultaneously endoglucanase and $\beta $-glucosidase. The recombinant genes contained the bacterial signal peptide sequence produced low level of endoglucanase and $\beta $-glucosidase in S. cerevisiae transformants: Approximately above 44% of two enzymes was localized in the intracellular fraction. The production of endoglucanase and $\beta $-glucosidase in veast was not repressed in the presence of glucose or cellobiose. The veast strain contained recombinant DNA with two genes hydrolyzed carboxvmethyl cellulose, and these endoglucanase and $\beta $-glucosidase degraded CMC synergistically to glucose, cellobiose and oligosaccharide. This result suggests the possibility of the direct bioconversion of cellulose to ethanol by the recombinant yeast.
Hexavalent chromium ($Cr^{6+}$) is a highly harmful pollutant, which can be detoxified and precipitated through reduction to $Cr^{3+}$. Bacillus megaterium TKW3 previously isolated from chromium-contaminated marine sediments was capable of reducing $Cr^{6+}$ in concomitance with metalloids ($Se^{4+}$, $Se^{6+}$, and $As^{5+}$). Notwithstanding approximately 50% inhibition, it was the first report of simultaneous bacterial reduction of $Cr^{6+}$ and $Se^{4+}$ (to elemental Se). No significant difference was observed among electron donors (glucose, maltose, and mannitol) on $Cr^{6+}$ reduction by B. megaterium TKW3. The reduction was constitutive and determined to be non-plasmid mediated. Peptide mass fingerprints (PMF) revealed a novel aerobic membrane-associated reductase with $Cr^{6+}$-induced expression and specific reductive activity (in nmol $Cr^{6+}$/mg protein/min) of 0.220 as compared with 0.087 of the soluble protein fraction. Respiratory inhibitor $NaN_3$ did not interfere with the reductase activity. Transmission electron microscopy with energy dispersive X-ray (TEM-EDX) analysis confirmed the aggregation of reduced chromium along the intracellular membrane region. Future identification of the N-terminal amino acid sequence of this reductase will facilitate purification and understanding of its enzymatic action.
Antimicrobial activity and bactericidal activity of Caesalpinia sappan L. extracts were investigated against five food-borne pathogens, E. coli, S. aureus, S. typhimurium, B. cereus and L. monocytogenes. Methanol extract of Caesalpinia sappan L. revealed antimicrobial activities against five pathogens. In particular, by paper disc diffusion the highest activity was shown against L. monocytogenes. Antimicrobial activities of methanol extracts showed the most potent activities, but hexane fraction had no activity. Fractions of ethyl acetate and butanol turned out to have higher antimicrobial activities against Gram(+) bacteria than Gram(-) bacteria. The minimum inhibitory concentration against five food-borne pathogens was 1.563 mg/ml on Gram(+) bacteria and 3.125 mg/ml on Gram(-) bacteria. The result of antimicrobial activity in a shaking flask method showed that bacterial growth rate fell by more than 99.999% at 3.125 mg/ml of methanol extract. The highest rate of viable reduction (99.998%) was shown at 0.781 mg/ml of methanol extract against L. monocytogenes. After five minutes of reaction between test strains and methanol extracts, the growth rates of five kinds of bacteria were reduced by more than 99.999% at a concentration of 100 mg/ml. Therefore, it is suggested that methanol extracts of Caesalpinia sappan L. can be developed as a natural sanitizer or disinfectant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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