• 제목/요약/키워드: Bacillus sp. H9-1

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Xylanase Production by Bacillus sp. A-6 Isolated from Rice Bran

  • Lee, Jun-Ho;Choi, Suk-Ho
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제16권12호
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    • pp.1856-1861
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    • 2006
  • A Bacillus sp. A-6 strain that produced xylanase was isolated from rice bran. The optimal temperature and pH for xylanase activity of the culture supernatant of Bacillus sp. A-6 were 40$^{\circ}C$ and pH 7, respectively. The optimal temperature and pH for xylanase production in the xylan medium were 30$^{\circ}C$ and pH 9, respectively. The optimal concentrations of oat spelt xylan and peptone for xylanase production were 0.5% and 1.5%, respectively. The best nitrogen sources for xylanase production was beef extract, but xylanase production was also supported comparably by tryptone and peptone. The bacterial growth in the optimal xylan medium reached stationary growth phase after 12 h of incubation. The xylanase production in the culture supernatant increased dramatically during the initial 12 h exponential growth phase and then remained constant at 23.8-24.5 unit/ml during the stationary growth phase. The pH of the culture medium decreased from 8.8 to 6.7 during the exponential growth phase and subsequently increased to 8.1 during the stationary growth phase. Rice bran, sorghum bran, and wheat bran as well as oat spelt xylan induced xylanase production. The xylanase production was repressed when glucose was added to the xylan-containing medium.

재조합 대장균에서 호알칼리성,고온성 Bacillus sp. TA-11의 세포내 Invertase의 생산 (Production of Intracellular Invertase from Alkalophilic and Thermophilic Bacillus sp. TA-11 in the Recombinant E. coli)

  • 이성훈;이대형;노재덕;이재원;이종수
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제34권4호
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    • pp.318-322
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    • 2006
  • 알칼리와 고온에 대한 내성을 가진 invertase를 대량생산하기 위하여 호알칼리성이며 고온성 세균인 Bacillus sp. TA-11의 세포내 invertase유전자를 pUC 19벡터를 이용하여 E. coli HB101에 클로닝 시키고 발현시켜 invertase를 강력하게 생산하는 재조합 E. coli (pYC17)를 얻었다. 재조합 E. coli(pYC17)를 이용한 invertase 생산 최적조건을 검토한 결과 E. coil(pYC17)를 0.25% sucrose, 0.5% yeast extract, 0.1% $K_2HPO_4$와 0.1% $KH_2PO_4$을 함유한 SY배지(초기 pH 9.0)에 접종하여 37$^{\circ}C$에서 9시간 배양하였을 때 친주보다도 많은 47.7 U/ml-cell free extract의 invertase가 생산되었다.

호알칼리성, 고온성 Bacillus sp. TA-11에 의한 $\beta$-Galactosidase의 생산 (Production of $\beta$-Galactosidase from Alkalophilic, Thermophilic Baillus sp. TA-11)

  • 최영준;이종수
    • KSBB Journal
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    • 제9권4호
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    • pp.400-405
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    • 1994
  • 호말칼리성이며 고온성인 Bacillus sp. TA-11로 부터 $\beta$galactosidase를 대량생산할 목적으로 배지 조성, 배지의 초기 pH 빛 배양온도와 각종 배양방법 등이 효소생산에 미치는 영향을 검토하였다. ${\beta}$-galactosidase의 최척생산조건은 1.5% lactose, 0.6% y yeast extract, 0.15% $K_2HP0_4$ 초기 pH 9.5, 배양 온도 $50^{\circ}C$이였고 플라스크배양에서는 48시간에 약 4 4350U/ml, 회분배양에서는 36시간에 4200 4400U/ml의 효소가 생산되였다. 또한 유가배양에서 는 120시간에 5200U/ml, 연속배양에셔는 34시간에 4000U/ml의 효소가 생산되었으며 효소의 비활성은 연속배양시 약 3077U/mg으로 제일 좋았다.

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Bacillus sp. HSA-925 Pectate Lyase의 정체 및 특성 (Purification and Characterization of a Pectate Lyase from Bacillus sp. HSA-925)

  • 박성희;김태호;김종국;홍순덕
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제22권1호
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    • pp.65-72
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    • 1994
  • Purification and characterization of pectate lyase from Bacillus sp HSA-925. Bacillus sp. HSA-925 isolated from soil produced constitutively an extracellular pectate lyase when cultivated in LB broth. The pectate lyase(EC 4.2.2.2) was purified from the cuylture broth by preciptation with ammonium sulfate, followed by column chromatography on CM-cellulose C-50 and repeated gel filtration on Sephadex G-75G. The enzyme had a molecular weight of 32-33 kDa. The activity was mazimum at pH 9.5 AND 45$\CIRC $C. The enzume activity was stable at 55$\circ $C for 15 min and between pH7-12. The activation energy, Km and V$_{max}$ for the pectate lyase were 5.8779 kcal/mol, 6.33$\times $10$^{-2}$ mol/ml and 2.09$\times $10$^{2}$ $\mu $mol/min respectively. The enzyme was activated by Ca$^{2+}$, Cu$^{2+}$ and inhibited by Li$^{+}$, Hg$^{2+}$, EDTA.

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호알칼리성 Bacillus sp.가 생성하는 포도당 이성화효소의 정제 및 특성 (Purification and Properties of Glucose Isomerase of Alkalophilic Bacillus sp.)

  • Lee, Eun-Sook;Kim, Hyang-Ja;Yang, Cha-Bum
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제17권4호
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    • pp.385-391
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    • 1989
  • 토양으로부터 분리한 호알카리성 세균 Bacillus sp. No. 1911 파쇄하여 유안투석, DEAE-cellulose column chromatography, Sephadex G-150 gel filtration으로 포도당 이성화효소를 정제하여 효소적 특성을 조사하였다. 이 효소는 Sephadex G-200 gel filtration에서 분자량은 170,000으로 측정되었고 SDS-polyacrylamide 전기영동에서 43,000의 단일 band를 얻어, 이 효소는 4개의 동일한 subunit로 구성되었음을 나타내었다. 이 효소는 pH7.5 및 $65^{\circ}C$에서 최적활성을 나타내었으며 pH7.5에서 7$0^{\circ}C$ 까지 안정하였고 Co$^{++}$ 존재하에 6$0^{\circ}C$에서 30분간 가열하였을 때 pH 6-9까지는 비교적 안정되었다.

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Bacillus sp. K-1과 그의 변이주가 생산하는 Biopolymer의 물성에 관한 연구 (Studies on the Rheology of the Biopolymer produced by Bacillus sp. K-1 Strain and its Mutants)

  • 김성호;임무현;정낙현
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제39권3호
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    • pp.165-171
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    • 1996
  • 볏짚으로부터 분리한 Bacillus sp. K-1과 그 변이주 KM-21과 KM-83이 생산하는 biopolymer들의 물성학적 성질을 비교 조사하였다. 은도에 따른 biopolymer의 겉보기 점도는 온도가 높아짐에 따라 감소하였으며, $20^{\circ}C$일 때에 비해 $80^{\circ}C$일 때 KM-21 균주가 생산하는 biopolymer는 1.7배, K-1균주의 biopolymer는 2.7배, KM-83 균주의 biopolymer는 1.9배 정도로 낮은 점성을 보였다. Biopolymer 용액의 점성은 농도가 증가함에 따라 크게 증가하여 6%의 농도에서 가장 높게 나타났으며, 2%, 4%, 6% 모두 pseudoplastic특성을 나타내어 농도에 대한 의존성이 매우 높았다. 6%의 농도일 때 2%의 농도와 비교해서 전단 속도가 $93\;sec^{-1}$ 일 때 KM-21은 26배, K-1은 56배, KM-83은 28배로 모균주의 biopolymer인 K-1이 가장 높은 점성을 보었다. pH에 따른 점도 변화는 pH7.0에서 최고를 보였으며, 알칼리성 조건일 때에 비해 산성조건에서 상대적으로 낮은 값의 점성을 보였다.

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과메기에서 histamine 분해능을 나타내는 세균의 분리 동정 (Isolation and Identification of Histamine Degrading Bacteria from Kwamegi)

  • 김민우;김영만
    • 생명과학회지
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    • 제16권1호
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    • pp.120-125
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    • 2006
  • 과메기에서 histamine분해능을 가진 세균을 분리 동정하기 위하여 histamine만을 첨가한 제한배지에서 균을 분리했다. 기본적인 형태 및 생화학적 동정시험을 거쳐 10종의 시험균주를 선택하여 16S rDNA 염기서열 비교에 의한 계통발생학적 분석으로 동정하였다. 동정된 세균의 histamine분해능은 탁도측정법과 효소법에 의해 재 확인하였으며 그 실험 결과는 다음과 같다. 16S rDNA 염기서열 비교에 의한 계통 발생학적 분석을 이용하여 동정한 결과, E americana B791, Arthrobacter sp. R45S, H. marisflava, P. sp. 9B-7, Bacillus sp. LMG 21002, P. cibarius JG-220, B. megaterium KL-197 7종이 동정되었고, 각각 $99\%,\;95\%,\;98\%,\;99\%,\;99\%,\;99\%,\;98\%$의 상동성을 보였으며, 3종은 미동정되었다. 동정된 세균의 histamine분해능을 탁도측정법과 효소법에 의해 재 확인한 결과, Arthrobacter sp. R45S, H. marisflava, Bacillus sp. LMG 21002, B. megaterium KL-197이 분해능을 나타내었고, Psychrobacter sp. 9B-7은 미약한 분해능을 보였으며 미동정된 3종도 분해능이 있는 것으로 나타났다. 그리고 E. americana B791과 P. cibarius JG-220은 분해능이 불확실한 것으로 확인되었다 자반고등어에서 분리한 균주보다 시험균주 모두가 생육과 histamine의 분해속도가 비교적 빨랐다.

토양으로부터 분리한 Bacillus sp. WRD-1이 생산하는 Extracellular Protease의 특성 (Characterization of Extracellular Protease of Bacillus sp. WRD-1 Isolated from Soil)

  • 옥민;김민석;서원석;차재영;조영수
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제28권6호
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    • pp.329-333
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    • 2000
  • Alkaline bacterium producing a high pro-tease activity at low temperature was isolated by using enrichment culture from soil samples and identified as Bacil-lus sp. WRD-1 Cell growth was maximal at 10 hours and the optimal initial pH and culture time of culture condition for enzyme production was pH 7 and 10 hours, respectively. Temperature range of high enzyme activity were $10~40^{\circ}C$. The optimal pH and temperature for the enzyme activity were pH9 and $30^{\circ}C$.

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갯지렁이(Perinereis aibuhitensis)에서 분리한 광염성 해양 미생물 Bacillus sp. EBW4의 특성 및 유기물 분해능 분석 (Characterization and Organic Hydrocarbons Degradation Potential of Euryhaline Marine Microorganism, Bacillus sp. EBW4 Isolated from Polychaete (Perinereis aibuhitensis))

  • 신세연;;이상석;이동헌;강경호;강형일
    • 미생물학회지
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    • 제49권1호
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    • pp.38-45
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    • 2013
  • 본 연구에서는 연안갯벌 갯지렁이(Perinereis aibuhitensis)에서 분리한 광염성 미생물, Bacillus sp. EBW4의 특성과 다양한 환경조건에서 유기물 분해능을 분석하였다. 16S rRNA 염기서열에 기초하여 동정한 결과, 균주 EBW4는 Bacillus hemicentroti $JSM076093^T$와 98.3%, Bacillus hwajinponensis SW-$72^T$와 97.96% 그리고 Bacillus algicoa $KMM3737^T$와 96.28%의 상동성을 보였다. EBW4의 생장 가능한 온도 범위는 $4-40^{\circ}C$, 염분도 범위는 0-17%, pH 범위는 5-9로 나타나 EBW4는 광염성 균주로 밝혀졌다. EBW4의 세포막을 구성하는 주요 지방산으로는 anteiso $C_{15:0}$, iso $C_{16:0}$, anteiso $C_{17:0}$, iso $C_{14:0}$ 등으로 각각 48.2, 12.1, 11.6, 9.4% 비율로 나타났다. EBW4는 탄수화물, 단백질, 지방 등 다양한 고분자 유기물을 분해할 수 있는 DNase, amylase, protease, lipase 등의 효소 활성뿐만 아니라, alkaline phosphatase, esterase (C4), leucine arylamidase 그리고 ${\alpha}$-chymotrypsin 효소활성도 가지고 있었다. 다양한 염분 농도 조건에서 합성폐수를 이용한 실험에서 EBW4은 조사한 모든 범위의 염분 조건에서도 유기물 분해능이 우수하였다.

Large-Scale Purification of Protease Produced by Bacillus sp. from Meju by Consecutive Polyethylene Glycol/Potassium Phosphate Buffer Aqueous Two-Phase System

  • Cho, Seong-Jun;Kim, Chan-Hwa;Yim, Moo-Hyun;Lee, Cherl-Ho
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제9권4호
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    • pp.498-503
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    • 1999
  • Protease produced from Bacillus sp. FSE-68 was isolated from Meju, a Korean fermented soybean starter, and was purified by a two-consecutive aqueous two-phase system. The change of partition coefficient (K) in the polyethylene glycol (PEG)/potassium phosphate buffer (PPB) aqueous two-phase system was measured at different pHs (6.0- 9.2), PPB concentrations (8-12%), and temperatures (4 and $20^{\circ}C$). As the PPB concentration in the aqueous two-phase system increased, the protease concentration in the top phase (PEG-rich phase) increased, thereby enhancing the partition coefficient. The minimum partition coefficient of the protease was achieved at pH 7.0, whereas that of the total protein was at pH 6.0. The biggest difference in partition coefficients of total protein and protease occurred at pH 6.0. It was interesting to note that the partition coefficient of protease decreased as the temperature increased. The optimum condition of the primary aqueous two-phase extraction of Bacillus sp. FSE-68 was pH 6.0, 14% (w/w) PPB, and 16% (w/w) PEG at $4^{\circ}C$, and the crude enzyme concentration in this system was 50% (w/w). The protease, which was concentrated in the top phase, was further mixed with 15% (w/w) PPB (pH 7.0) in the ratio of 1:1 at $20^{\circ}C$ to elute the bottom phase (PPB-rich phase). Using these steps, the purification fold achieved was 9.2 with a 44.7% yield.

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