Some components and antitumor effect of antler and fermented antler with Bacillus P-92 were determined. By fermenting the antler with Bacillus P-92, the amount of free amino acids, polypeptides and other compounds were increased. The free amino acid of the fermented antler was 6-fold higher than those of the untreated antler. Sarcoma 180 cells were intraperitoneally implanted into ICR mice to determine the effect of fermented antler and untreated antler on life span prolongation. The life span of ICR mouse treated with antler and fermented antler were prolonged to 24.4% and 39.2%(p<0.05), and survival rates were 22% and 33%, respectively. In addition, the induction of neutrophil was 2.3-fold and 3.4-fold, respectively.
With the population growth and industrialization, the characteristics of discharged waste water and sewage have become more diverse. The removal of phosphorus (P) in the wastewater is essential for the prevention of eutrophication in the river and stream. This study was performed in order to estimate the field application of the Bacillus sp. 3434 BRRJ. Bacillus sp. 3434 BRRJ was cultured in the raw wastewater and synthetic medium at the 5 L reactor. The best optimum conditions for P removal by Bacillus sp. 3434BRRJ in the synthetic medium at the 5 L reactor were as follows: temperature, $30^{\circ}C$; P concentration, 20 mg/L; carbon sources, glucose + acetate (1:1); oxygen concentration, alternatively anaerobic and aerobic conditions. P removal efficiency under the optimum condition was 89.4%. In case of wastewater, P removal efficiency was 95.5% under controlled at $30^{\circ}C$. Through this study we confirmed that P removal by Bacillus sp. 3434BRRJ in case of wastewater was as effective as the synthetic medium. It is considered that Bacillus sp. 3434 BRRJ can be applied to the treatment of wastewater in order to biologically remove P from the wastewater on a large scale.
재조합 플라스미드 pAL850에 함유된 Bacillus circulans KCTC3004 $\alpha$-amylase 유 전자를 pUB110을 이용하여 shuttle 플라스미드 pALS111을 만들어 Bacillus 세포에 이동. 발현시켰다. Bacillus subtilis(고초균)와 Bacillus megaterium(거대균)으로 형질전환된 pALS111로부터 $\alpha$-amylase는 세포증식과 비례하여 생산되었다. 형질전화주가 생산하는 $\alpha$ -amylase의 최대활성을 유전자 공여 균주인 B. circulans와 비교했을 때 고초균은 약 95배, 거대균은 약 34배 정도의 높은 활성을 나타내었다. 그리고 대장균 형질전환주는 분비율이 10% 정도인데 반하여 고초균 형질전화주는 생산된 효소전부를 , 거대균 형질전환주는 약 98%를 세포외로 분비함을 보임으로써 고초균과 거대균은 실용적인 면에서 대장균보다 우월 함을 나타내었다, pALS111의 각 숙주 내에서의 안정성을 살펴본 결과 거대균에서는 92%, 고초균에서는 76%, 대장균에서는 38% 로 나타났다. SDS-PAGE와 zymogram을 통해 추정 된 대장균과 고초균, 거대균에서 발현된 효소의 분자량은 약 55,000으로 확인되었다. 이들 형질전환주가 생산하는 $\alpha$-amylase는 starch 에 작용하여 주된산물로서 maltotriose 이상의 다양한 maltooligosaccharide들을 생산함이 확인 되었다.
포자형성균은 사람과 동물용의 프로바이오틱 제제로서 사용되어져 왔다. 포자형성균의 낮은 pH에 대한 안정성과 위내 생육저해 환경에 생존능은 프로바이오틱 제제로서 매력적이다. 본 연구는, 한국 전통 대두 발효 식품의 종균인 BCNU 9028균주를 메주로부터 분리하였다. 생리학적, 생화학적 특성과 16S 리보좀 DNA 염기서열 분석 결과 BCNU 9028균주는 $Bacillus$에 속하는 것을 확인하였다. $Bacillus$ sp. BCNU 9028은 pH 2.5에서 92%의 생존률을 보였으며, 0.3% 담즙산에서도 저항성을 나타냈다. 그리고, 식품 병원성균과의 응집정도와 자가결합능에 의해 $Bacillus$ sp. BCNU 9028는 $Listeria$$monocytogenes$, $S.$$aureus$ 및 $E.$$coli$와 같은 식품 병원성균의 생물막형성과 부착을 저해할 수 있는 것을 확인하였다. BCNU 9028의 소수성 특성(63.3%)은 장관내 부착능이 우수할 것으로 나타났다. 특히, $Bacillus$ sp. BCNU 9028 균주는 그람양성 및 그람음성 병원성균 모두에 항균력을 갖는 것을 확인하였다. 이상의 결과로 $Bacillus$ sp. BCNU 9028균주가 프로바이오틱스로서 이용가능성이 있음을 제시하였다.
목적: 본 연구는 임상대상자 16명에게 Bacillus 발효용액(ENM)을 8주간 섭취시키기 전 후에 임상대상자들의 변에서 주요 목표 장내 유익세균의 증식이 촉진 되는지 및 유해균은 감소하는지를 연구하는 것이 목적이었다. 방법: 장내세균은 16S rRNA 특정 Primer를 이용하여 PCR 증폭기로 동정 검색하였다. 결과: Bifidobacterium속 gene index (%)(=gi%)는 ENM섭취 후에는 대조군이 58.92%, 임상군은 69.53%로 증가하였으나 유의성은 없었다. Lactobacillus 속 지수는 사후에는 대조군이 49.37%, 임상군은 66.43%로 유의성이 있게 증가하였다 (p<.029). Clostridium 속 지수는 사후에는 대조군이 83.16%, 임상군은 67.76%로 유의하게 감소하였다(p<.077). Bacteroides 속 지수는 사후에는 대조군이 12.58%, 임상군은 20.87%로 유의성이 있게 증가하였다(p<.095). Prevotella 속 지수는 사후에는 대조군이 7.55%, 임상군은 17.28%로 유의성이 있게 증가하였다(p<.005). 중간균체는 사후검사의 경우에는 대조군이 20.06%, 임상군은35.88%로 유의성이 있게 증가하였다(p<.001). 결론: Bacillus 발효액(ENM)을 섭취후에는 유익균 수는주로 증가하였고, 유해균인 Clostridium균수는감소하는경향을보였다. 이는 발효음료 ENM의 섭취가 유익한 장내세균의 증식에 영향을 주는 것으로 판단된다.
Bacillus P-92 which fermented antler was isolated from intestinal bacteria. The biological activites, carbon clearance and growth activity of lactic acid bacteria, of fermented antler was better than those of untreated antler. The enyzmes activities, ${\beta}-glucosidase,\;{\beta}-glucuronidase$ and tryptophanase, of intestinal bacteria of mice treated with fermented antler were lower than those of mice treated with untreated antler, although those of mice treated with fermented antler or untreated antler were higher than those of control. Biological activity of the antler seems to be increased by fermentation.
The isolation and characterization of a new type II methylase, BmaI methylase, from Bacillus macerans ATCC 8244 were described. BmaI methylase was isolated by procedures of ammonium sulfate fractionation, DEAE-cellulose chromatography and phosphocellulose chromatography. Two types of methylases were present in this strain and only one of the two was a site specific BmaI methylase. The pBR322 DNA methylated by BmaI methylase was not cleaved by BmaI endonuclease, and pBR322 DNA cleaved by BmaI endonuclease was not methylated by BmaI methylase. The optimal pH for the BmaI methylase activity was 7.5, and optimal NaCl concentration was about 50 mM. BmaI methylase could methylate single-stranded M13mp18 DNA.
Lipase-producing bacterial strains were isolated from Antarctic soil samples using the tricaprylin agar plate method. Seven strains with relatively strong lipase activities were selected. All of them turned out to be Bacillus pumilus strains by the 16S rRNA gene sequence analysis. Their corresponding lipase genes were cloned, sequenced, and compared. Finally, three different Bacillus pumilus lipases (BPL1, BPL2, and BPL3) were chosen. Their amino acid sequence identities were in the range of 92-98% with the previous Bacillus pumilus lipases. Their optimum temperatures and pHs were measured to be $40^{\circ}C$ and pH 9. Lipase BPL1 and lipase BPL2 were stable up to $30^{\circ}C$, whereas lipase BPL3 was stable up to $20^{\circ}C$. Lipase BPL2 was stable within a pH range of 6-10, whereas lipase BPL1 and lipase BPL3 were stable within a pH range of 5-11, showing strong alkaline tolerance. All these lipases exhibited high hydrolytic activity toward p-nitrophenyl caprylate ($C_8$). In addition, lipase BPL1 showed high hydrolytic activity toward tributyrin, whereas lipase BPL2 and lipase BPL3 hydrolyzed tricaprylin and castor oil preferentially. These results demonstrated that the three Antarctic Bacillus lipases were alkaliphilic and had a substrate preference toward short- and medium-chain triglycerides. These Antarctic Bacillus lipases might be used in detergent and food industries.
The chitinase-producing strain SC081 was isolated from Korean traditional soy sauce and identified as Bacillus atrophaeus based on a phylogenetic analysis of the 16S rDNA sequence and a phenotypic analysis. A gene encoding chitinase from B. atrophaeus SC081 was cloned in Escherichia coli and was named SCChi-1 (GQ360078). The SCChi-1 nucleotide sequences were composed of 1788 base pairs and 596 amino acids, which were 92.6, 89.6, 89.3, and 78.9% identical to those of Bacillus subtilis (ABG57262), Bacillus pumilus (ABI15082), Bacillus amyloliquefaciens (ABO15008), and Bacillus licheniformis (ACF40833), respectively. A recombinant SCChi-1 containing a hexahistidine tag at the amino-terminus was constructed, overexpressed, and purified in E. coli to characterize SCChi-1. $H_6SCChi$-1 revealed a hydrolytic band on zymograms containing 0.1% glycol chitin and showed the highest lytic activity on colloidal chitin and acidic chitosan. The optimal temperature and pH for chitinolytic activity were $50^{\circ}C$ and pH 8.0, respectively.
선박에서 발생하는 오${\cdot}$폐수를 처리하기 위하여 생물학적 질소 및 인의 제거공정으로 사용되고 있는 연속 회분식 공정을 이용하여 유기물의 제거 특성과 산소 소모량, 반응조내에서 우점하고 있는 Bacillus sp.균주의 상태를 알아보기 위하여 Lab-sacle로 수행하였다. 반응조에서 COD의 제거효율은 $92.0\%$, 암모니아성질소는 $90.0\%$, 총질소의 제거효율은 $84.0\%$, 인의 제거효율은 $93.0\%$로 나타났다. Bacillus sp.를 이용한 SBR를 사용한 선박폐수의 처리효율은 안정적이었다. 포기시에 SBR 내의 pH는 초기의 8.1에서 30분동안에 pH는 7.0으로 감소하였다. 무산소 단계인 3단계와 4단계에서 pH는 증가하기 시작하여 최종적으로 pH는 7.3으로 유지되었다. TOC제거량에 대한 슬러지 생성량은 약$0.36kg{\cdot}MLSS/kg{\cdot}TOC$으로 나타났으며 낮은 슬러지 발생율과 높은 슬러지 침강성을 나타내었다. 반응조에서 바실러스균의 평균 우점율은 $24.2\%$로 나타났고 각 반응단계에서 안정적인 처리효율을 얻을 수 있어 충분히 우점화 되었다고 판단할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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