분만후 젖소의 자궁내 미생물상을 조사하고 미생물로부터 분리한 Lipopolysaccharide를 적용하여 소의 번식효율 증진에 기여하고자 분만후 젖소의 도축장 유래 자궁을 채취하여 혐기적 상태에서 균분리 동정을 실시하였다. 균분리 동정을 위하여, 시료를 1cm$\times$1cm로 채취하여 혐기상태에서 거품이 생길 때까지 vortexing한 후 균액 300$\mu l$를 뽑아 혐기배지에 도말하였고 도말한 plate는 $37{\circ}C$ 혐기chamber에서 24시간 배양하였다. 혐기배지에서 자란 균의 colony를 따서 Mac, BHI+B, BHI 배지에 배양한 후 Gram stain을 실시하였다. BHI 배지에서 자란 균의 colony를 따서 BUA+B 배지에 계대배양하였고 BUA+B 배지에서 자란 균중에 가장 마지막으로 자란 균을 따서 An-IF에 넣고 탁도를 63%T로 맞춘 후 An micro plate에 100$\mu l$씩 분주하였다. 분주한 plate를 $37{\circ}C$ 혐기 chamber에서 20~24시간 동안 배양한 후 Biolog를 실시하였다. 시료의 UV측정을 위하여 Sonic Processor로 세포를 분쇄하였고 분쇄한 세포를 $4{\circ}C$에서 10,000rpm으로 10분간 원심분리한 후 상층액을 분리하여 0.45$\mu m$ 필터로 여과한 다음 여과액을 취하여 UV로 standard(E.coli O26 B6 LPS)와 sample(10배 및 20배 희석액)을 측정하였다. (중략)
Incidence of crown gall on lower stem of chrysanthemum, Chrysanthemum morifolium Ramat., was first observed at Hwasung, Gyeonggi, Korea in 2001, Tumors on the stem were 1.5-2 cm in size and semi-round with rough surface texture of dark brown color. Four strains of bacteria isolated from the tumor tissues were characterized. Their colonies were convex, glistening, circular with an entire edge, and white to tannish-cream in color on PDA plus CaCO$_3$. They were gram negative, oxidase positive, and growing on DIM agar. The bacterial isolates inducing gall formation in chrysanthemum were identified as Agrobacterium tumefaciens based on biochemical and physiological characteristics, fatty acid profile using Sherlock Microbial Identification System, and substrate utilization patterns using Biolog Identification System. Young chrysanthemum plants inoculated with the bacteria developed typical galls within two to three weeks. Seedlings of tomato and slices of carrot roots also produced typical galls two to three weeks after inoculation. This is the first report on crown gall of chrysanthemum in Korea.
A strain antagonistic to Fusarium solani, CHO104, was selected from approximately 100 microorganisms isolated from soil. Strain CHO104 was identified as Bacillus amyloliquefaciens and found to be Gram-positive based on the Biolog system and 16S rRNA methods. A culture broth of B. amyloliquefaciens CHO104 also exhibited antimicrobial activity against various microorganisms. As such, the EtOAc extract of the culture broth was isolated by various column chromatographic procedures and HPLC. The antimicrobial and antifungal substance was then characterized as macrolactin A $(C_{24}H_{34}O_5)$ using high-resolution EI-MS and NMR analyses, and found to be very effective in inhibiting the growth of Staphylococcus aureus, E. coli, and Botrytis cinerea, even when using a concentration of one-twentieth of the benzoic acid as the control compound.
The purpose of this work was to examine the antibacterial activity derived from a lactic acid bacterium isolated from korean rice wine, called makgeolli. Various physiological and biochemical properties of this strain were characterized. Both the BIOLOG system and phylogenetic analysis using 16S rRNA sequencing were utilized for identification, and the strain was designated as Lactobacillus casei HK-9, and registered in GenBank as [JQ951606]. Growth rate, production of organic acids (e.g., lactic acid and acetic acid), and pH changes during growth were monitored. The maximum concentrations of lactic acid and acetic acid were approximately 576 mM and 199 mM, respectively, and pH was changed from 7.00 to 3.74 after 72 h of incubation. HPLC was used to confirm the production of lactic acid and acetic acid. Significant antimicrobial activity of the concentrated supernatant was demonstrated against various food-poison causing bacteria (e.g., Bacillus cereus, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, methicillin-resistant Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella enteritidis). Ethanol tolerance of L. casei HK-9 showed up to 12% of ethanol within the culture.
This study was undertaken to identify and characterize hemolytic Bacillus cereus isolated from commercial ssam-jang. The physiological and biochemical properties of isolate were first examined. Using the BIOLOG system, the isolate was identified and assigned to B. cereus MH-2. Phylogenetic tree of MH-2 was plotted based on 16S rRNA sequence comparisons. Hemolytic activity was observed around wells of sheep blood agar plates seeded with MH-2 cultures; the zone of hemolysis gradually increased with increasing incubation time of the cultures. Zymographic analysis estimated the molecular weight of the presumed hemolysis-causing molecule to be about 30 kDa. Survival rates of MH-2 cells decreased with increasing NaCl concentrations in the media. The stress shock proteins (e.g., DnaK and GroEL) induced by NaCl were reduced in proportion to the NaCl concentration and exposure period to B. cereus MH-2. Analysis of SDS-PAGE and Western blot revealed that the stress shock proteins, 70-kDa DnaK and 60-kDa GroEL were decreased proportionate to the NaCl concentrations as well as exposure period in exponentially growing cultures. Scanning electron microscopy demonstrated the presence of perforations and irregular rod forms with wrinkled surfaces in cells treated with NaCl.
This study was conducted to investigate characteristics and antimicrobial susceptibility of Escherichia (E.) coli isolates isolated from vaginal mucosa and clitorial fossa of 105 Thoroughbred mares suspicious of the genital disease in Korea during the period from March 2006 to July 2007. Ninety six E. coli isolates were identified as standard biochemical properties and using BIOLOG system. Fifty three isolates (55.2%) could be classified into a total of 21 O serotypes and forty three isolates (44.8%) were non-typeable with 51 O antisera used in this study. The verotoxin 1 (VT 1) and verotoxin 2 genes were analyzed by multiplex PCR. Among them, one isolate was detected VT 1 gene (130 bp). Most of isolates showed a high susceptibility in ciprofloxacin (100%), enrofloxacin (100%), norfloxacin (100%), cefoxitin (96.9%), gentamicin (96.9%), sulphamethoxazole (96.9%), nitrofurantoin (94.8%), amikacin (93.8%), nalidixic acid (92.7%) and tetracycline (90.6%). These results may provide the basic information to establish strategies for the treatment and prevention of reproductive disease in Thoroughbred mares in Korea.
Kim, Jeong-Ho;Joen, Yong-Ho;Kim, Sang-Gyu;Kim, Young-Ho
The Plant Pathology Journal
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제23권4호
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pp.314-317
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2007
A soft stem rot disease was observed on Chamaecereus silvestrii (Korean name: Sanchui), a scion of graft-cactus, in major growing areas of Suwon (National Horticulture Research Institute), Anseong, Eumseong, Cheonan, Daegu, and Goyang, Korea during 2000 and 2001. Typical symptoms were soft rots characterized by moist and watery decay of the whole cactus stem, which initiated as small water-soaked lesions and enlarged rapidly to the entire stem. The causal organism isolated from the infected stems was identified as Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Erwinia carotovora subsp. carotovora) based on its physiological and biochemical characteristics and confirmed by the cellular fatty acid composition and Biolog analyses. Artificial inoculation of the bacterium produced the same soft rot symptoms on the cactus stems, from which the same bacterium was isolated and identified. This is the first report of the P. carotovorum subsp. carotovorum in the graft-cactus C. silvestrii in Korea.
For the biological treatment of industrial wastewater containing high concentration of phenol, isolation and characterization of phenol - degrading bacterium were carried out. A bacterial strain P2 capable of degrading phenol was isolated from contaminated soils by enrichment culture technique and identified as the genus Rhodococcus by morphological, cultural, biochemical characteristics, and Biolog system. The optimal medium composition and cultural conditions for the growth and degradation of phenol by Rhodococcus sp. P2 were 0.1% of (NH$_4$)$_2$SO$_4$, 0.2% of KH$_2$PO$_4$, 0.25% of Na$_2$HPO$_4$ㆍ12$H_2O$, 0.2% of MgSO$_4$ㆍ7$H_2O$, and 0.008% of CaC1$_2$ㆍ2$H_2O$ along with initial pH 8.5 at 3$0^{\circ}C$. Rhodococcus sp. P2 could grow with phenol as the sole carbon source up to 1,800 ppm in batch cultures, but did not grow in medium containing above 2,000 ppm of phenol. When 800 ppm phenol was given in the optimal media, Rhodococcus sp. P2 completely degraded it within 24 h. Meanwhile, 1,800 ppm of phenol was degraded within 9 days. Rhodococcus sp. P2 could utilize toluene, n-hexane, xylene and benzene as sole carbon source .
KANG HEUI YUN;KIM YONG SUNG;KIM GEUN JOONG;SEO JIN HO;RYU YEON WOO
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제15권2호
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pp.362-367
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2005
On the basis of high osmotic tolerance and xylitol production, a novel yeast strain was screened from soils of rice farming. The isolated strain HY200 was systematically characterized by using general approaches of Biolog Microlog$^{TM}$ and 18S rRNA sequence analyses, and consequently was designated as Candida tropicalis HY200. Under formulated culture conditions, relatively high xylitol yield ($77\%$) and productivity (2.57 g/l$\codt$h) were obtained, in practice, when 200 g/l of xylose was supplemented. In the utilization of nitrogen, inorganic compounds could not serve as nitrogen sources. As a promising phenotype, HY200 steadily flocculated during and/or after growing in the formulated medium. The extent of flocculation was partly affected by nitrogen sources. However, regardless of the kinds of carbon source fed, the flocculent cells were always observed at the end of the exponential growth phase. These observations strongly suggest that the strain HY200 could effectively be used as a potential candidate for the production of xylitol from xylose, especially in repeated batch mode, because of its flocculation ability and tolerance to high substrate concentrations.
The biological removal of 2,4,6-trinitrotoluene (TNT) was studied in a bench-scale bioreactor using a bacterial culture of strain OK-5 originally Isolated from soil samples contaminated with TNT. The TNT was completely removed within 4 days of incubation in a 2.5 L bench-scale bioreactor containing a newly developed medium. The TNT was catabolized in the presence of different supplemented carbons. Only minimal growth was observed in the killed controls and cultures that only received TNT during the incubation period. This catabolism was affected by the concentration ratio of the substrate to the biomass. The addition of various nitrogen sources produced a delayed effect for the TNT degradation. Tween 80 enhanced the degradation of TNT under these conditions. Two metabolic intermediates were detected and identified as 2-amino-4, 6-dinitrotoluene and 4-amino-2, 6-dinitrotoluene based on HPLC and GC-MS analyses, respectively. Strain OK-5 was characterized using the BIOLOG system and fatty acid profile produced by a microbial identification system equipped with a Hewlett Packard HP 5890 II gas chromatograph. As such, the bacterium was identified as a Stenotrophomonas species and designated as Stenotrophomonas sp. OK-5.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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