분만후 젖소의 자궁내 미생물상 조사 및 Lipopolysaccharide의 분리

  • 백광수 (농촌진흥청 축산기술연구소) ;
  • 김태일 (농촌진흥청 축산기술연구소) ;
  • 우제석 (농촌진흥청 축산기술연구소) ;
  • 전병순 (농촌진흥청 축산기술연구소) ;
  • 박수봉 (농촌진흥청 축산기술연구소) ;
  • 김현섭 (농촌진흥청 축산기술연구소) ;
  • 이현준 (농촌진흥청 축산기술연구소) ;
  • 홍의철 (농촌진흥청 축산기술연구소) ;
  • 안병석 (농촌진흥청 축산기술연구소)
  • Published : 2003.10.01

Abstract

분만후 젖소의 자궁내 미생물상을 조사하고 미생물로부터 분리한 Lipopolysaccharide를 적용하여 소의 번식효율 증진에 기여하고자 분만후 젖소의 도축장 유래 자궁을 채취하여 혐기적 상태에서 균분리 동정을 실시하였다. 균분리 동정을 위하여, 시료를 1cm$\times$1cm로 채취하여 혐기상태에서 거품이 생길 때까지 vortexing한 후 균액 300$\mu l$를 뽑아 혐기배지에 도말하였고 도말한 plate는 $37{\circ}C$ 혐기chamber에서 24시간 배양하였다. 혐기배지에서 자란 균의 colony를 따서 Mac, BHI+B, BHI 배지에 배양한 후 Gram stain을 실시하였다. BHI 배지에서 자란 균의 colony를 따서 BUA+B 배지에 계대배양하였고 BUA+B 배지에서 자란 균중에 가장 마지막으로 자란 균을 따서 An-IF에 넣고 탁도를 63%T로 맞춘 후 An micro plate에 100$\mu l$씩 분주하였다. 분주한 plate를 $37{\circ}C$ 혐기 chamber에서 20~24시간 동안 배양한 후 Biolog를 실시하였다. 시료의 UV측정을 위하여 Sonic Processor로 세포를 분쇄하였고 분쇄한 세포를 $4{\circ}C$에서 10,000rpm으로 10분간 원심분리한 후 상층액을 분리하여 0.45$\mu m$ 필터로 여과한 다음 여과액을 취하여 UV로 standard(E.coli O26 B6 LPS)와 sample(10배 및 20배 희석액)을 측정하였다. (중략)

Keywords