• 대한한방피부미용학회지
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• 제1권1호
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• pp.5-15
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• 2005

The purpose of this study was to investigate the effect of the aqueous extract of the Astragalus membranaceous(AM). AM showed inhibitory effect on the tyrosinase activity using L-tyrosine as a substrate. Tyrosinase plays an important role in the process of melanin polymer biosynthesis. In vitro AM extract(1mg/ml) inhibited melanin biosynthesis and are useful for the material used in cosmetics. B16 mouse melanoma cells were cultured in different concentrations. The non-cytotoxicity of the plant extracts was confirmed by MTT assay.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2000년도 추계학술발표대회 및 bio-venture fair
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• pp.115-118
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• 2000

미세 가공 기술을 이용하여 제작된 IDA 전극을 활용하여 임피던스 측정방식의 cell chip으로의 응용에 대해 고찰하였다. IDA 전극은 기존의 반도체 공정으로서 손쉽게 제작할 수 있고, 대량 제작시 전극의 재현성 확보가 용이하고 소형화 할 수 있으며 낮은 단가로 제작될 수 있는 장점이 있다. IDA 전극을 채용한 cell chip을 B16-F1 melanoma 세포 배양에 적용한 결과, 세포성장과 임피던스 변화량이 상관성을 보였고, 세포의 성장을 저해하는 약물의 투과시 cell chip의 임피던스 변화 역시 기존의 방법과 유사한 결과를 보여 주었다.

• Molecular & Cellular Toxicology
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• 제4권1호
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• pp.85-91
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• 2008

These days there is a constant possibility of exposure to UV radiation which can cause abnormal production of melanin and result in skin disease such as hyperpigmentation and melanoma. Many materials were investigated for skin whitening and protection against UV radiation. In this study, we assessed the melanogenesis inhibitory activities of Korean Red Ginseng (KRG, Ginseng Radix Rubra) and Ginkgo (EGb 761 Ginkgo Biloba) in an attempt to develop a new skin whitening agent derived from natural products. B16F10 melanoma cells were treated for 48 hr with KRG and EGb 761. The inhibitory effect on melanogenesis was measured and related cytokines and proteins expression were also investigated by RT-PCR and Western blotting. In addition, we also assessed the effects of these substances on the skin of C57BL/6 mice. Cell growth, melanin content and tyrosinase activity were inhibited effectively in B16F10 melanoma cells treated with KRG and EGb 761. Moreover, tyrosinase mRNA expression was inhibited clearly and melanogenesis related proteins (MRPs) containing tyrosinase, TRP1 and TRP2 were also reduced by KRG and EGb761, while cytokines such as IL-$1{\beta}$ and IL-6 were induced. In the case of UV irradiated mice, we observed induction of cytokine mRNA levels and reduction of MRPs mRNA expression. In addition, a decrease in pigmentation from treatment with KRG and EGb 761 on the skin of mice was observed. These results indicate that KRG and EGb 761 inhibit melanogenesis in B16F10 cells and have display protective activities against UVB. Therefore, we suggest that KRG and EGb 761 are good candidates to be used as whitening agents and UVB protectors for the skin.

• 대한한방부인과학회지
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• 제29권1호
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• pp.14-34
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• 2016

목 적: 본 연구에서는 한의학에서 다양한 피부질환과 대사질환에 빈번히 사용되고 있는 온청음 물 추출 동결건조물(수율=13.82%)의 피부 노화 개선 효과 평가의 일환으로 세포독성, 피부재생, 주름개선, 미백 및 보습 효과를 각각 평가하였다.방 법: 본 연구에서는 human normal fibroblast(CRL-2076) 및 B16/F10 murine melanoma(CRL-6475) 세포에 대한 온청음의 세포독성을 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium Bromide) 방법으로 평가하였으며, 피부 재생 및 주름 개선 효과를 transforming growth factor(TGF)-β1와 비교한 fibroblast의 collagen type I 합성능, phosphoramidon disodium salt(PP)와 비교한 elastase 활성 억제, oleanolic acid(OA)와 비교한 hyaluronidase, collagenase 및 matrix metalloproteinase (MMP)-1 활성 억제를 통해 각각 평가하였고, 미백효과를 B16/F10 murine melanoma cells의 melanin 생성 억제 정도 및 tyrosinase 활성 억제를 통해 arbutin과 비교 평가하였으며, 모든 실험은 OCE의 농도별로 군을 나누어 농도에 따른 효과의 변화를 함께 분석하였다. 보습효과는 흰쥐의 피부 수분함량 변화를 통해 평가하였다.결 과: 본 실험의 결과, 온청음은 human normal fibroblast 및 B16/F10 murine melanoma 세포에 대해 의미 있는 세포독성을 나타내지 않았으며, fibroblast의 collagen type I 합성을 증가시켰고, 세포외 기질의 파괴에 관여한다고 알려진 hyaluronidase, elastase, collagenase 및 MMP-1 활성을 억제하였으며, 피부의 색을 결정하는 melanin 의 생성에 관여하는 tyrosinase의 활성 및 B16/F10 murine melanoma cells의 melanin 생성을 억제하는 것으로 관찰되었다. 이 반응의 효과들은 모두 농도에 비례하여 증가하였고, 이와 함께 정상 매체 대조군에 비해 흰쥐의 피부 수분 함량이 세 용량의 온청음 경구 투여군 모두에서 투여용량 의존적으로 의미 있는 증가를 보였다.결 론: 이상의 결과에서, 온청음은 세포 독성 없이 비교적 우수한 피부 재생, 주름개선, 미백 및 보습 효과를 나타내는 것으로 관찰되어, 차후 피부 노화 억제 개선제 또는 기능성 화장품의 주요 소재로서 그 가치가 매우 높을 것으로 판단되나, 금후 개별 구성 약재 각각에 대한 효능 및 생리활성을 나타내는 화학성분의 검색과 더불어 다양한 방면으로 기전적인 연구와 피부 보호 효과에 대한 in vivo 평가를 체계적으로 수행해야 할 것으로 판단된다.

• 대한한의학방제학회지
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• 제26권3호
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• pp.223-236
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• 2018

Objectives : We compared the inhibitory effects of herb-combined remedies, which were recorded on "Yooam" prescription of Dongeuibogam, on cell migration and invasion, two critical cellular processes that are often deregulated during metastasis, in B16F10 melanoma cells. For this purpose, water extracts of Sipyukmiryukieum (SYMRKU), Danjacheongpitang (DJCPT), Cheongganhaeultang (CGHUT) and Jipaesan (JPS) were used. Methods : Cytotoxicity was assessed by an MTT assay. Wound healing and matrigel transwell assays were used to examine on B16F10 cell migration and invasion. The levels of mRNA and protein expression of matrix metalloproteinases (MMPs) and tissue inhibitor of metalloproteinases (TIMPs) were analyzed by RT-PCR and Western blotting. Results : Our data showed that DJCPT showed the strongest inhibitory effect among the four prescriptions in inhibiting cell motility of B16F10 melanoma cells within the concentration range that was not cytotoxic. The inhibitory potential of colony formation was higher in DJCPT and SYMRKU compared to the other two types of prescriptions, and the inhibitory effect of invasiveness is shown in order of DJCPT, SYMRKU, CGHUT and JPS. DJCPT, and SYMRKU strongly inhibited the activity and expression of MMP-2 and MMP-9, which are important mediators in cancer invasion, compared to CGHUT and JPS, and the increased expression of TIMP-1 and TIMP-2 was also more effective in these two prescriptions. In conclusion, DJCPT is expected to exhibit the most potent blocking effect on migration and invasion among four herb-combined remedies compared in B16F10 melanoma cells. Conclusion : Overall, the results of this study will be used as an important source to validate these prescriptions in animal models and to understand the mechanism of action of herbal remedies recorded in Dongeuibogam.

• 한국응용과학기술학회지
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• 제34권1호
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• pp.41-49
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• 2017

본 연구는 우엉 뿌리 추출물의 항산화 활성 및 피부에 대한 안전성을 평가하기 위하여 총 폴리페놀 함량, 총 플라보노이드 함량, DPPH radical 소거 활성을 통하여 항산화 활성을 살펴보고, B16F10 melanoma 세포에 대한 세포 독성 및 자외선 A에 대한 피부 세포 보호 효과를 확인하였다. 또한 화장품 소재로서의 활용을 검증하기 위하여 1차 피부 첩포 테스트를 실시하였다. 본 실험 결과 우엉뿌리 추출물의 함량이 증가됨에 따라 높은 폴리페놀과 플라보노이드의 함량이 확인되었으며, DPPH radical 소거 활성을 확인하였다. B16F10세포에 대한 세포 독성을 확인한 결과 B16F10 melanoma 세포에 대해 독성이 낮고, 자외선 A에 대해 80% 이상의 세포 보호 효과를 확인하였다. 또한 1차 피부 첩포 테스트를 통해 우엉 뿌리 추출물이 피부에 자극이 거의 없음을 확인하였다. 이러한 결과를 통하여 우엉뿌리 추출물이 항산화 활성과 자외선에 대한 피부 보호 효과가 뛰어나고 피부 세포에 대한 독성이 낮으며, 피부에 대한 안전성이 확인됨에 따라 화장품 소재로서의 가능성을 확인하였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제30권8호
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• pp.1184-1194
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• 2020

Melanin is a major factor that darkens skin color as one of the defense systems to prevent the harmful effects of UV light. However, darkened skin from the localized or systemic accumulation of melanin is viewed in many cultures as an esthetic problem. Consequentially, searching for anti-melanogenic agents from natural sources is very popular worldwide. Previous screening of fermented rice products, obtained from various rice cultivars fermented with different sources of loog-pang (Thai traditional fermentation starter), revealed that the highest ability to reduce the melanin content in B16F10 melanoma cells was from unpolished black rice fermented with a defined starter mixture of microbes isolated from loog-pang E11. The aim of this study was to investigate the mechanism of the fermented unpolished black rice (FUBR) on the inhibition of melanogenesis in B16F10 melanoma cells. The strongest reduction of cellular melanin content was found in the FUBR sap (FUBRS). The melanin reduction activity was consistent with the significant decrease in the intracellular tyrosinase activity. The FUBRS showed no cytotoxic effect to B16F10 melanoma or Hs68 human fibroblast cell lines. It also significantly reduced the transcript and protein expression levels of tyrosinase, tyrosinase-related protein 1 (TYRP-1), TYRP-2, and microphthalmia-associated transcription factor. Furthermore, it induced a significantly increased level of phosphorylated ERK, p38 and Akt signaling pathways, which likely contributed to the negative regulation of melanogenesis. From these results, a model for the mechanism of FUBRS on melanogenesis inhibition was proposed. Moreover, these results strongly suggested that FUBRS possesses anti-melanogenesis activity with high potential for cosmeceutical application as a skin depigmenting agent.

• 생명과학회지
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• 제27권3호
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• pp.318-324
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• 2017

본 연구는 참깨 70% 에탄올 추출물의 항산화 효과와 미백효과를 검증하여 나타내었다. 참깨 추출물의 전자공여능 측정실험은 $1,000{\mu}g/ml$에서 71.7%의 효과를 나타냈으며, tyrosinase 저해활성 측정은 $1,000{\mu}g/ml$의 농도에서 42%의 효과를 보였다. 참깨 추출물의 세포 생존율을 melanoma cell (B16F10)에서 확인하기 위하여 MTT assay를 진행하였으며, 세포 생존율을 측정한 결과, $1,000{\mu}g/ml$ 농도에서 84.3%의 독성을 보였다. 이하의 세포실험에서는 세포 생존율이 90% 이상되는 농도인 $500{\mu}g/ml$ 이하에서 실험을 진행하였다. 참깨 추출물의 MITF, TRP-1, TRP-2 및 tyrosinase의 단백질 발현 효과를 50, 250, $500{\mu}g/ml$ 농도에서 측정하였으며, 그 결과 MITF, TRP-1, TRP-2 및 tyrosinase의 각각 $500{\mu}g/ml$ 농도에서 68.3%, 39.2%, 89.7%, 22.3%의 단백질 발현 억제 효과를 보였다. 또한, MITF, TRP-1, TRP-2 및 tyrosinase의 mRNA발현을 RT-PCR로 50, 250, $500{\mu}g/ml$ 농도에서 측정하였고, 양성 대조군으로 GAPDH를 사용하였다. 그 결과, 참깨 추출물의 $500{\mu}g/ml$ 농도에서 각각 81.8%, 66.5%, 84.2%, 68.1%의 mRNA 발현이 감소함을 확인할 수 있었다. 이상의 결과로 부터 참깨 추출물의 화장품 소재로서의 가능성을 확인할 수 있었다.

• 생명과학회지
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• 제20권7호
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• pp.1034-1040
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• 2010

천연의 식물과 추출물은 비용의 효율성과 풍부한 자원을 이점으로 식품, 약, 의약 분야와 마찬가지로 화장품 분야에서도 이용될 수 있다. 현재까지 섬쑥부쟁이는 항산화 활성을 제외하고는 그 효능에 대해 알려진 바가 없다. 따라서 본 연구에서는 울릉도의 대표적인 특산 식물인 섬쑥부쟁이 추출물을 이용하여 화장품 분야에서의 활용방안에 대한 연구를 조사한바, 효소적 in vitro 검색법을 측정하여 이들 중 가장 우수한 EtOAc 추출물을 대상으로 이러한 저해능이 멜라닌 생성에 관련된 단백질 발현과도 연관성이 있는지를 확인하기 위해 B16F10 melanoma cell line 내 단백질 수준을 확인하였다. Tyrosinase, TRP-1의 항체를 이용한 western blot으로 관련 단백질의 발현량을 조사한 결과 섬쑥부쟁이 에틸아세테이트 분획물 100 ug/ml을 처리한 군에서는 tyrosinase protein을 30.5%를 억제하였고, TRP-1은 41.5% 억제하였다. 한편, 섬쑥부쟁이 분획물의 생육 저해환 측정에서는 Staphylococcus epidermidis, Propionibacterium acnes, Escherichia coli에 대하여 헥산 분획물 2 mg/disc에서 각각 21.0 mm, 12.0 mm, 14.0 mm의 저해환을 나타내어 섬쑥부쟁이 헥산 분획물만이 유일하게 높은 항균활성을 나타났다. 이들 실험 결과를 미루어보아, 섬쑥부쟁이의 화장품 분야에서의 활용적 가치가 충분하다고 사료되나, 그 활성 성분에 대한 명확한 규명을 위한 추가적인 연구를 제시하는 바이다.

• Journal of Acupuncture Research
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• 제21권6호
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• pp.63-84
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• 2004

Objective & Methods : To study the effects of anti-cancer, anti-metastasis and immune response improvement of herbal-acupuncture with Eclipta prostrata diffusae herba infusion solution(ELP-HAS), we injected ELP-HAS into Chung-wan(CV12) of C57BL/6 mice implanted intravenously with B16-F10 melanoma. We have reached the following conclusion through the effect on the percentage of $CD25^+/CD4^+$, $CD8^+/CD3e^+$, $CD69^+/B220^+$, $NK1.1^+/CD3e^+$cells in mouse PBMCs, the effect on the pulmonary colony formation number, and the effect on MST(Median Survival Time) and ILS(Increase of Life Span) of C57BL/6 mice implanted intravenously with B16-F10 melanoma. Results : The results were obtained as follows : 1. In the experiment groups treated with ELP(Ecliptae Herba) Herbal acupuncture, the spleen cell proliferation in BALB/c mouse was significantly increased compared with control group. 2. In the experiment groups treated with ELP(Ecliptae Herba) Herbal acupuncture, the percentage of $CD25^+/CD4^+$, $CD8^+/CD3e^+$, $CD69^+/B220^+$, $NK1.1^+/CD3e^+$cells in C57BL/6 mouse PBMCs was increased compared with control group. 3. In the experiment groups treated with ELP(Ecliptae Herba) Herbal acupuncture, the pulmonary colony formation number of C57BL/6 mice implanted intravenously with B16-F10 melanoma was decreased significantly compared with control group. 4. In the experiment groups treated with ELP(Ecliptae Herba) Herbal acupuncture, MST(Median Survival Time) and ILS(Increase of Life Span) of C57BL/6 mice implanted intravenously with B16-F10 melanoma were increased significantly compared with control group. Conclusions : ELP Herbal acupuncture injection into Chung-wan(CV12) of C57BL/6 mice is considered to be effective in anti-cancer, anti-metastasis and immune response improvement.