The optimal condition for manufacturing the yoghurt by using B. bifidum and L. acidophilus was studied. Optimal growth condition of B. bifidum and fermentation effects of B. bifidum, L. acidophilus and Str. thermophilus in mixed culture were investigated separately. Fermentation conditions of B. bifidum were optimized in 12% reconstitued skim milk. The addition of BIOS 2000 to 12% skimmilk was effective on the growth and acid production of B. bifidum. There was asymbiosis among B. bifidum, L. acidophilus and Str. thermophilus in mixed culture which resulted in higher viable cell numbers and acid production. The optimum production of yoghurt was achieved by incubation at $37^{\circ}C$ for 8 hours with 5% mixed starter culture (B. bifidum+L.acidophilus+Str. thermophilus). In this case the effective ratio of B. bifidum: L. acidophilus: Str. thermophilus was 2:1:1 on both acid production and viable cell counts.
Bifidobacterium bifidum OFR9 that exhibits acquired resistance to rifampicin and fluoroquinolones was selected by MNNG and multi-step mutation method. To investigate the resistance mechanism to rifampicin in the strain, RNA polymerase from B. bifidum parent strain and rifampicin-resistance OFR9 was partially purified and its sensitivity to rifampicin was assayed. The profile of RNA polymerase preparation of B. bifidum parent and B. bifidum OFR9 is similar to that of E. coli RNA polymerase that includes the basic subunits of ${\beta}$`, ${\beta},\;{\sigma},\;{\alpha}$ but which are a little different in size when they are compared with E. coli RNA polymerase subunits. RNA polymerase isolated from the parent strain was inhibited by 1${\mu}$g/ml rifampicin but that from B. bifidum OFR9 was not affected by 100${\mu}$g/ml concentration of rifampicin. RNA polymerase activity of B. bifidum OFR9 was maintained over 90% through that rifampicin concentration. This result is consistent with MIC values of in vitro test. It can be concluded that the mechanism of rifampicin resistance in B. bifidum OFR9 is due to an alteration of RNA polymerase.
Proceedings of the Korean Society for Food Science of Animal Resources Conference
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2001.11a
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pp.43-56
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2001
Colostrum contains various kinds of cytokines including TGF-${\beta}$ which is known to be multifunctional in immune response and act as an anti-inflammatory agent. First, we measured the amount of TGF-${\beta}$ in bovine and human colostrum. Expression pattern of TGF-${\beta}$ isotypes was dramatically different between human and bovine colostrial samples. Bovine colostrum collected on day 1 post-delivery retained $41.79{\pm}16.96ng/ml$ of TGF-${\beta}$ 1 and $108.4{\pm}78.65ng/ml$ of TGF-${\beta}$ 2 while in human, $284{\pm}124.75ng/ml$ of TGF-${\beta}$ 1 and $29.75{\pm}6.73ng/ml$ of TGF-${\beta}$ 2. Thus, TGF-${\beta}$ is the predominant TGF-${\beta}$ isotype in bovine colostrum and vice versa in human colostrum. Both TGF-${\beta}$ isotypes diminished significantly in human and bovine colostrum with time. Next, biological activity of colostrial samples was examined in vitro. Both human and bovine colostrum increased IgA synthesis by LPS-activated mouse spleen B cells, which is a typical effect of TGF-${\beta}$ on the mouse B cell differentiation. Futhermore, we found that anti-proliferative activity in MV1LU cells by colostrum samples disappeared by addition of anti-TGF-${\beta}$ 1 and anti-TGF-${\beta}$ 2 antibody. In conclusion, there are substantial amounts of biologically active TGF-${\beta}$ 1 and TGF-${\beta}$ 2 in bovine and human colostrum. The results that the colostrum can increase IgA expression has important implications since IgA is the major Ig class produced in the gastrointestinal tract. We have previously shown that the stimulatory effect of Bifidobacteria bifidum on spllen B cells was quite similar to that of LPS which is a well-known polyclonal activator for murine B cells. In the present study, we further asked whether B. bifidum regulate the synthesis of IgA by mucosal lymphoid cells present in Peyers patches (PP) and mesenteric lymph nodes (MLN). B. bifidum alone, but not C. perfringens, significantly induced overall IgA and IgM synthesis by both MLN and PP cells. This observation indicates that B. bifidum possesses a modulatory effect on the mucosal antibody production in vivo. We, therefore, investigated the mucosal antibody prodduction following peroral administration of B. bifidum to mice. Ingested B. bifidum significantly increased the numbers of Ig (IgM, IgG, and IgA) secreting cells in the culture of both MLN and spleen cells, indicating that peroally introduced B. bifidum enhances mucosal and systemic antibody response. Importantly, however, B. bifidum itself does not induce the own specific antibody responses, implying that B. bifidum do not incite any unwanted immune reaction. Subsequently, it was found that excapsulation of B. bifidum further augments the total IgA production by increasing the number of IgA-secreting cells in the culture of both MLN and spleen cells. Finally, we found that the immuno-stimulating activity of B. bifidum is due to its cell wall components but not due to any actively secreting component(s) from bacteria. Thus our data reveal that peroral administration of B. bifidum can enhance intestinal IgA production and that encapsulation of B. bifidum further reinforces the IgA production.
This study was carried out to evaluate the quality attributes of frozen soy yogurts prepared by freezine soy yogurts, which are made of different types of Bifidobacteria (B. bifidum, B.breve, B. infantis) and oligosaccharides (fructooligosaccharides, galactooligosaccharides, isomaltooligosaccharides) containing $\alpha$-chymotrypsin treated soy protein isolate were evaluated in terms of overrun, melt-down quality, changes in the total number of Bifidobacteria after freezing, and sensory evaluation. The quality attributes of soy yogurts were also evaluated in terms of changes in the number of viable cells of Bifidobacteria in soy yogurts after incubation at 37$\^{C}$, pH 3.0 for 90 min, water holding capacity, and viscosity. The overrun of frozen soy yogurts fermented by B. bifidum showed the hiehest value but those fermented by B. infantis showed the lowest, while the melt-down quality of soy yogurts were vice versa. The total numbers of Bifidobacteria after freezing for 30 min in ice cream maker showed more than 10$\^$9/ CFU/ml. In sensory evaluation, all $\alpha$-chymotrypsin treated frozen soy yogsurt showed little beany flavor. In sour, sweet, and bitter tastes and mouth feel, the frozen soy yogurts fermented by B. bifidum evaluated better but those fermented by B. infantis evaluated worse. Also in the overall quality, the frozen soy yogurts fermented by B. bifidum were evaluated desirable but those fermented by B. infantis were evaluated undesirable. The water holding capacity and viscosity of soy yogurts fermented by B. bifidum showed the highest values but those fermented by B. infantis showed the lowest values. The total numbers of Bifidobacteria of all soy yogurts decreased from 10$\^$9/ CFU/ml to 10$\^$8/ CFU/ml after incubation at 37$\^{C}$, pH 3.0 for 90 min.
This study was carried out to evaluate the quality characteristics of frozen soy yogurts prepared with different proteolytic enzymes and starter culture. The viable cell counts of lactic acid bacteria in frozen soy yogurts were measured $10^8$ CFU/g by the single culture method, while $10^9$ CFU/g by the mixed culture method except ${\alpha}-chymotrypsin$ treatment. The viable cell counts of lactic acid bacteria did not decrease after freezing for 30 min in ice cream maker. The lactic acid bacteria from the mixed culture showed better bile acid tolerance than those from the single culture. The lactic acid bacteria from the frozen soy yogurt prepared with ${\alpha}-chymotrypsin$ and mixed culture of Bifidobacterium bifidum and Lactobacillus bulgaricus showed better acid tolerance and bile acid tolerance. The highest(73.45%) overrun was observed in the frozen soy yogurt treated with ${\alpha}-chymotrypsin$ and mixed culture of B. bifidum and L. bulgaricus. The melt-down percent was higher in the single culture than the mixed culture. In sensory test, the frozen soy yogurt prepared with ${\alpha}-chymotrypsin$ and mixed culture of B. bifidum and L. bulgaricus was the most desirable, the highest scores in sourness, bitterness and mouthfeel.
Bifidobacterium bifidum, one strain of medical preparation being on the market for human intestinal disorders, was sensitive to rifampicin and fluoroquinolones. If this preparation is taken with rifampicin and fluoroquinolones, its therapeutic effect can't be expected. Serial passage of B. bifidum RFR61, which was obtained by MNNG mutation method, on agar with 2-fold minimal inhibitory concentration of ofloxacin produced B. bifidum OFR9 with minimal inhibitory contentrations of fluoroquinolones up to $4{\sim}256-fold$ higher than that for the original strain. B. bifidum OFR9 produced almost the same amount of organic acid as parental strain. This strain showed growth inhibitory activity against E. coli NM522, Shigella dysenteriae ATCC9752 and E. coli 078. No inactivations of rifampicin and ofloxacin by this resistant mutant strain were found.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.46
no.7
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pp.801-808
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2017
The present study investigated the protective effects of Bifidobacterium bifidum culture supernatants (BbSC) and intracellular cell-free extracts (BbICFE) on human dermal fibroblasts (HDFs) against ultraviolet-B (UV-B) irradiation. HDFs were treated with UV-B, UV-B+BbCS, and UV-B+BbICFE. Treatment of UV-B-irradiated HDFs with BbCS and BbICFE significantly increased cell viability compared to UV-B-irradiated HDFs. BbCS treatment reduced senescence in HDFs by approximately 40.0%. Moreover, sub-G1 phase was significantly reduced in BbCS- and BbICFE-treated HDFs (3.3% and 4.5%, respectively). The effect of UV-B on oxidative damage of HDFs was measured by dichlorofluorescin diacetate. Fluorescence intensity significantly increased in UV-B-irradiated HDFs. Inhibition of cellular reactive oxygen species in HDFs treated with 0.01% BbCS was the highest at 34.1%. Levels of p21 and p53 protein expression induced by UV-B irradiation were reduced by treatment with BbCS and BbICFE (47.0% and 35.6%, respectively). These results show that BbCS and BbICFE reduce UV-B-induced cellular senescence and apoptosis in HDFs. Thus, BbCS and BbICFE can be used as potential agents for protection of UV-B-induced skin cell damage.
Bifidobacterium bifidum, one strain of medical preparations being on the market for human intestinal disorder, is very sensitive to rifampicin. If this preparation is taken with rifampicin, its therapeutic effect can't be expected. To develope rifampicin resistant mutants, B. bifidum was treated with N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG). All of thirty strains grown on the plates containing 10 $\mu\textrm{g}$/ml rifampicin were over 1, 000 times more resistant to rifampicin than parental strain and they were identified as B. bifidum by fructose-6-phosphoate phosphoketolase test. Three strains out of thirty, which produced almost same amount of organic acid as parental strain, were selected for further studies. They showed identical growth inhibition activity aganist E. coli compared with that of parental strain. And rifampicin was not inactivated.
Survival and stability of 19 bifidobacterial strains included 13 isolates from Korean infants against acid, bile acid and oxygen exposure were examined. Acid resistance of selected strains at pH values of 4.0, 3.0 and 2.0 was tested. Among the bifidobacterial strains tested, B. bifidum B3, B. longum D6, and B. adolescentis F1 exhibited higher viable cell counts exposed to acid whereas other strains had various results. The abilities of the strains to grow in the MRS broth containing 0.2% thioglycolic acid and 0.2% oxgall were tested and the tolerance of B. bifidum B3 and B. longum D6 to bile acid were higher than that of others. Even though in same species, the tolerance of tested strains to bile acid were variable. Stabilities of tested strains to oxygen exposure were variable and B. bifidum and B. longum strains showed relatively higher viable cell counts after 48 hours exposure to aerobic incubation. These results demonstrated that the survival and stability of bifidobacterial strains to acid, bile acid, and oxygen exposure were variable and strain-dependent. Due to their tolerant ability to environmental factors like acid, bile acid, and oxygen, B. bifidum B3 and B. longum D6 had good potential properties as probiotic cultures and may be useful for industrial application.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1994.04a
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pp.252-252
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1994
현재 시판되고 있는 정장용 생균 제제에 함유되어있는 정장균주의 하나인 Bifidohacterium bifidum은 항결핵제 중 rifampicin에 감수성으로 rifimpicin과 병용 투여시 본래의 정장 효과를 기대할 수 없다. 따라서, rifampicin에 내성인 돌연변이 균주를 얻기 위해 B. bifidum을 N-methyl-N'-nitro-N-nitroso- -guanidine(MNNG)로 처리하여 rifampicin에 내성인 30종의 균주를 선별 하였고, rifampicin에 대한 Minimal Inhibitory Concentration(MIC)를 측정해 본 결과 내성이 1,000배 이상 상승하였다. 또한 rifampicin에 내성인 균주 RFR61을 자연 돌연변이시켜 ofloxacin에도 내성인 돌연변이 균주 20종을 선별 하였고, MIC를 측정한 결과 내성이 4배 이상 증가하였다. 또, fructose-6-phosphate phosphoketolase test를 실시해 본 결과, 모두 Bifidobacterium임이 확인되었다. 유기산 생성량을 측정하여 모균주의 유기산 생성량과 가장 유사한 3균주, B. bifidum RFRll, RFR21, RFR61 그리고 OFR9을 선별하였다. 이 네 균주의 E. coli 생육 억제능을 측정한 결과 모두 모균주와 유사한 E. coli 생육 억제능을 가지고 있었다. Rifampicin 내성균주들에 대하여 내성 유지 시험을 한 결과 복귀 돌연변이에 의해 내성이 소실될 가능성은 없는 것으로 여겨진다. 마지막으로, 내성 균주에 의한 rifampicin 불활성화 여부를 알아 본 결과 rifampicin이 불활성 화되지 않음을 알 수 있었다. 이상의 결과를 통해 본 연구실에서 개발한 B. bifidum RFR11, RFR21 그리고 RFR61 균주들은 rifampicin에 내성이며, B.bifidum OFR9은 rifampicin과 ofloxacin에 이중 내성을 갖는 균주로서 모균주와 유사한 생화학적 특성을 갖는 우수한 정장 세균으로 여겨진다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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