국내 연안에서 하계에 출현하는 Alexandrium 속 와편모류의 종 다양성 연구를 위해, 2013년 7월부터 10월까지 19개 정점에서 해수 시료를 채취하였고, 이 가운데 4개 지역에서 Alexandrium 속의 와편모류가 확인되었다. 해당 4개 해수 시료에 단세포/단세포사 분리법을 적용하여, 총 22 종류의 Alexandrium 단종배양체를 확립하였다. 이 가운데 4종류의 Alexandrium 단종배양체에 대한 형태학 및 유전학적 특성을 분석한 결과, 각각 A. catenella, A. affine, A. fraterculus 및 Alexandrium sp.(strain WEB-Alex-01)인 것으로 확인되었다. 우리나라 연안에서 일반적으로 Alexandrium이 춘계 또는 추계의 중수온기에 주로 출현하는 것으로 알려진 바와는 대조적으로, 다양한 Alexandrium 종들이 하계에도 출현함을 확인하였다. 미동정 Alexandrium sp.(strain WEB-Alex-01) 종주는 국내 최초 보고 종으로서, 이 단종배양체에 대한 분류, 생리, 생태, 독성 등에 관한 추가적인 연구가 필요하다.
Mixotrophy in marine organisms is an important aspect of ecology and evolution. The discovery of mixotrophic abilities in phototrophic dinoflagellates alters our understanding of the dynamics of red tides. In the phototrophic dinoflagellate genus Alexandrium, some species are mixotrophic, but others are exclusively autotrophic. There are differences in the ecological roles of autotrophic and mixotrophic Alexandrium in marine food webs. However, of the 34 known Alexandrium species, the mixotrophic ability of >20 species has yet to be explored. In this study, the mixotrophic capabilities of Alexandrium insuetum CCMP2082, Alexandrium mediterraneum CCMP3433, Alexandrium pacificum CCMP3434, Alexandrium tamutum ATSH1609, and Alexandrium margalefii CAWD10 were investigated by providing each species with 22 diverse prey items including bacterium-sized microbeads (1 ㎛), the cyanobacterium Synechococcus sp., algal prey species, and the ciliate Mesodinium rubrum. None of the 5 Alexandrium species fed on any of the prey items. These results increase the number of Alexandrium species lacking mixotrophic abilities to 9, compared to the 7 known mixotrophic Alexandrium species. Furthermore, the Alexandrium phylogenetic tree based on the large subunit ribosomal DNA contained 3 large clades, each of which had species with and without mixotrophic abilities. Thus, the acquisition or loss of mixotrophic abilities in Alexandrium might readily occur.
This study looked at toxicity of Mediterranean mussels, Mytilus galloprovincialis, which had accumulated paralytic shellfish toxins (PST) from early March to late May 2005 at Jinhae Bay, Korea. Alexandrium sp. was observed in low densities (< 1,000 cells/L) at the beginning of the study in March, increased rapidly in April, declined rapidly and disappeared in May. Although low densities of Alexandrium sp. were observed in March, mussel toxicity exceeded regulation level ($80{\mu}g$ STXeq. /100 g). Peak PSP (Paralytic Shellfish Poisoning) toxicity in the mussels occurred during high Alexandrium sp. cell densities in April. Mussels toxicity decreased with decline of Alexandrium sp. cell density. Major toxin components identified were $GTX_1$, $GTX_4$, followed by $C_1$, $C_2$, $GTX_2$, $GTX_3$ and neoSTX. Trace or sporadic toxin components were STX, $GTX_5$, $dcGTX_2$, $dcGTX_3$ and dcSTX. Toxin component analysis from the middle to end of the study showed that $11{\beta}$-epimers ($GTX_{3,4}$, $C_2$) were converted into $11{\alpha}$-epimers ($GTX_{1,2}$, $C_1$) and started to determine STX.
BACKGROUND: The aim of this study was to isolate and identify algicidal bacterium that tends to kill the toxic dinoflagellate Alexandrium catenella, and to determine the algicidal activity and algicidal range of algicide. METHODS AND RESULTS: Among of algicidal bacteria isolated in this study, NH-3 isolate was the strongest algicidal activity against A. catenella. NH-3 isolate was identified on the basis of biochemical characteristics and analysis of 16S rRNA gene sequences. The NH-3 isolate showed over 99% homology with Arthrobacter oxydans, and was designated as Arthrobacter sp. NH-3. The optimal culture conditions were $25^{\circ}C$, initial pH 7.0, and 2.0% (w/v) NaCl concentration. The algicidal activity of Arthrobacter sp. NH-3 was significantly increased to maximum value in the late of logarithmic phase. Arthrobacter sp. NH-3 showed algicidal activity through indirect attack, which excreted active substance into the culture filtrate. When 10% culture filtrate of NH-3 was applied to A. catenella, 100% of algal cells were destroyed within 30 h. In addition, the algicidal activities were increased in dose and time dependent manners. The pure algicide was isolated from the ethyl acetate extract of the culture filtrate of NH-3 by using silica gel column chromatography and high performance liquid chromatography (HPLC). We investigated the algicidal activity of this algicide on the growth of harmful algal bloom (HAB) species, including A. catenella. As a result, it showed algicidal activity against several HAB species at a concentration of $100{\mu}g/mL$ and had a relatively wide host range. CONCLUSION: Taken together, our results suggest that Arthrobacter sp. NH-3 and its algicide could be a candidate for controlling of toxic and harmful algal blooms.
Kim, Keun-Yong;Matoko Yoshida;Yasuwo Fukuyo;Kim, Chang-Hoon
ALGAE
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제17권1호
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pp.11-19
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2002
Twenty-nine culture strains belonging to the genus Alexandrium Halim (Dinophyceae) were established from water column or sediments in Korea. Seventeen isolates were identified as A. tamarense (Lebour) Balech, eight isolates as A. sp. cf. catenella and one as A. catenella (Whedon et Kofoid) Balech according to the presence or absence of a ventral pore, the shape of the posterior sulcal plate and the sulcal width. Three isolates were unable to be identified due to considerable distortion of thecal plates and lack of enough materials, but typical of A. tamarense and/or A. catenella. The overall cell shape of A. tamarense was usually longer than wide. The posterior sulcal plate was definitely longer than wide dorsoventrally, and sulcus extended posteriorly without apparent widening. They were distributed in three major coasts of Korea. In contrast, the cell shape of A. sp.cf. catenella was generally anterior-posteriorly flattened. The transversal axis of the posterior sulcal plate was always longer than the longitudinal, or both axes were nearly equal in length. Its sulcus was broader than that of A. tamarense and widened in the direction of antapex about 1.5 times. This morphotype existed in nearshore and offshore waters of the southern Korea sea. One of A. catenella isolates from Jinhae Bay showed no conspicuous differences with A. sp. cf. catenella except for the consistent absence of a ventral pore.
Sequences of the large subunit ribosomal (LSD) rDNA D1-D2 region of Alexandrium catenella(=A. sp. cf. catenella) and A. tamarense isolates, which were collected along the Korea coasts, were analyzed to understand their phylogenetic relationships and geographical distributions. All A. catenella and A. tamarense isolates belonged to the A. tamarense/catenella/fundyense complex and were grouped with the North American and temperate Asian ribotypes, respectively, regardless of the presence or absence of a ventral pore in the first apical plate. A consistent and peculiar characteristic that differentiated the Alexandrium isolates was amplification of a second PCR product with a lower molecular weight in addition to the predicted one; ten A. catenella isolates belonging to the temperate Asian ribotype yielded this additional PCR product. Sequence alignment revealed that the shorter PCR product resulted from an unusual large deletion of 87 bp in the LSD rDNA D1 domain. The North American and temperate Asian ribotypes were prevalent along the Korean coasts without geographical separation. Given the high genetic homogeneity among widely distributed Alexandrium populations, each ribotype appeared to be pandemic rather than to constitute a distinct regional population.
Cho Hyun-Jin;Matsuoka Kazumi;Lee Joon-Baek;Moon Chang-Ho
Fisheries and Aquatic Sciences
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제4권3호
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pp.120-129
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2001
Thirty-six dinoflagellate cysts, representing 15 genera were identified in the surface sediments obtained from the northwestern East China Sea. Three cyst morphotypes found in this survey have not previously been described in the East China Sea and adjacent waters: Selenopemphix sp. 2, Selenopemphix sp. 3 and Trinovantedinium sp. 1. In the northwestern East China Sea, Operculodinium centrocarpum, Spiniferites bulloideus and ellipsoidal cysts of Alexandrium were commonly observed. Moreover, it was recognized that the ellipsoidal cysts of Alexandrium, whose motile cells of A tamarense and/or A catenella are responsible to paralytic shellfish poisoning, distributed not only restricted to the coastal areas but also to the offshore stations far from the Changjiang River mouth.
우리나라뿐만 아니라 전 세계적으로 적조 및 마비성 패독을 일으켜 문제시되고 있는 유독성 와편모류인 A. catenella 를 살조시키는 해양미생물 Pseudoalteromonas sp. NH-12를 마산만의 적조발생 해역에서 분리, 동정하고 그 특성과 살조능에 대해 연구함으로써 보다 환경 친화적인 적조 구제 기술개발의 기초 자료를 제공하고자 하였다. 적조발생 해역인 마산만의 해수에서 분리한 38개의 해양미생물 균주 중 4종의 미생물이 A. catenella 에 대해 살조능을 나타내었으며, 이중 살조능이 가장 우수한 NH-12 균주를 선별하였다. 본 균주는 API kits 및 16S rRNA gene 염기서열을 분석하여 계통분류를 행한 결과 Pseudoalteromonas 속으로 분류되었으며, 최적 배양조건은 $25^{\circ}C$, pH 8.0, 3.0% NaCl 농도였다. Pseudoalteromonas sp. NH-12의 성장 단계별 살조능은 대수증식기 후기, 정지기, 대수증식기 중기, 유도기 순으로 높게 나타났다. 살조물질은 대수증식기 중기 이후에 활발히 생산되기 시작하여 대수증식기 후기에 가장 고농도로 축적되는 것으로 판단된다. 2조 배양계를 이용한 살조 유형 조사에서 Pseudoalteromonas sp. NH-12는 격리된 상태에서도 A. catenella 를 살조시켜 '직접 공격형'이 아니라 세포외로 물질을 분비하여 살조시키는 '살조인자 분비형'으로 확인되었다. 또한 NH-12 균주 배양여과액을 5% 첨가하였을 때 36시간 후에 A. catenella 는 100% 살조되었고, 10%를 첨가한 경우 24시간 후에 99% 이상 살조되었다.
휴안포자를 형성하는 과편모조류중 우리나라 남해동부와 동해남부의 연안수역 특히 진해만에서 1982년 이래 3월부터 9월에 걸쳐 적조를 일으킨 종은 8종이었으며 이들은 6종의 과편모조류와 2종의 녹색편모조류로 구성되었다. 계절별로는 이른 봄철에 Scrippsiella trochoidea와 Heterocapsa triquetra종이, 늦봄에 Heterosigma akashiwo가 그리고 여름철에는 Gyrodinium instriatum과 Pheopolykrikos hartmannii가 적조를 일으켰다. 한편 Cochlodinium sp.와 Alexandrium affine는 늦여름부터 가을철에 적조를 일으켰다. 이중 Heterosigma akashiwo는 매년 같은 곳에서 같은 시기에 발생하는 경향을 뚜렷히 나타냈으며 Cochlodinium sp.에서도 이와 같은 특성을 발견할 수 있었다. 한편 적조발생시의 밀도는 $10^3\~10^5\;cells/ml$ 수준이었으며, 밀도변화는 환경특성 보다는 오히려 세포의 크기에 따라 변화하고 있었다.
해양저질에서 휴면포자의 분포와 분포량에 대한 조사는 미래의 와편모조류 적조발생 시기나 장소를 예측할 수 있게 한다. 그러므로 저질내의 휴면포자를 찾고 분리하는 기술이 기본적으로 수행되어야 하며 지금까지 여러 방법이 개발되어 왔다. 이 연구의 목적은 기존의 휴면포자 계수방법들을 비교함으로써 연구의 효율을 제고 하고자 하는데 있다. 이 실험에서는 새만금 해역의 동일정점 저질내에 존재하는 휴면포자를 형광 염색하여 계수하는 Primuline 염색법, 해수, 휴면포자, sodium polytungstate의 비중차이를 이용하여 밀도구배원심법으로 분리하는 방법, 그리고 10% HCl로 탄산질을 제거하고 47% HF로 규산질을 제거한 뒤 휴면포자를 계수하는 고전적 계수방법 (palynological technique)을 사용하여 저질 내의 휴면포자를 분리 비교하였다. Primuline 염색법을 이용하였을 경우 Alexandrium famarense/catenella complex, Alexandrium sp. (spherical), Gonyaulax verior, Gonyaulax scrippsea, Gonyaulax spinifera complex등의 일부 종만 염색되어 관찰되었다. sodium polytungstate를 비중 1.3 g$cm^{-3}$으로 조정한 후 휴면포자를 분리한 밀도구배 원심법은 생물에 거의 무해한 것으로 알려져 있어서 발아가 가능해 휴면포자와 영양세포간의 관계를 규명할 수 있다는 장점이 있으나 계수에 있어서는 재현성이 떨어졌다. 반면 Palynological technique은 발아는 되지 않지만 석회질 벽을 가지는 휴면포자를 제외한 대부분의 종들이 관찰되었다. 이 결과는 실험 목적별로 휴면포자 계수방법을 달리 할 수 있음을 보여준다. 즉 발아실험을 할 경우에는 밀도구배원심법을, Alexandrium과 같은 특정종의 계수목적시에는 Primuline 염색법을, 정점 내 정확한 종 분포 파악을 위해서는 palynological technique을 사용하는 것이 효과적일 수 있다. 하지만 종분포 파악시에는 시간이 많이 소요되므로 좀더 신속하고 정확한 실험을 위해 분자생물학적인 기법들이 요구된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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