• 제목/요약/키워드: Affinity constant

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Purification, Characterization, and Inhibitory Activity of Glassfish (Liparis tanakai) Egg High Molecular Weight Protease Inhibitor Against Papain and Cathepsin

  • Ustadi Ustadi;You Sang-Guan;Kim Sang-Moo
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제16권4호
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    • pp.524-530
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    • 2006
  • Two protease inhibitors of 67 and 18 kDa, respectively, were purified from the eggs of glass fish, Liparis tanakai, by affinity chromatography and electro-elution method. The high molecular weight (HMW) protein was purified with a specific inhibitory activity, yield, and purity of 18.46 U/mg, 0.07%, and 131.86 fold, respectively, and was further characterized: Optimal temperature and pH for inhibitory activity of the HMW glassfish egg protease inhibitor were $40^{\circ}C$ and pH 6, respectively, and it was stable between $5^{\circ}C\;and\;50^{\circ}C$ in the pH range of 5-6 with maximal stability at pH 6. It was shown to be a competitive inhibitor against papain with an inhibition constant $(K_i)$ of 97.02 nM. Moreover, the 67 kDa protein inhibited cathepsin, a cysteine protease, more effectively than did an egg-white protease inhibitor. The HMW glassfish egg protease inhibitor was classified as a member of the family III (kininogen).

Development of a Welding Machine System Using Brown Gas by Improved Water Electrolyzation

  • Lee Yong-Kyun;Lee Sang-yong;Jeong Byung-Hwan;Mok Hyung-Soo;Choe Gyu-Ha
    • Journal of Power Electronics
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    • 제5권4호
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    • pp.305-311
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    • 2005
  • Throughout the world, studies on the water energization are currently under way. Of those, Brown gas, which is generated through the electrolyzation of water and is a mixed gas of the constant volume of 2 parts hydrogen to 1 part oxygen, has better characteristics in terms of economy, energy efficiency, and environmental affinity than those of acetylene gas and LPG (Liquefied Petroleum Gas) used for existing welding machines. This paper analyzes the characteristics of Brown gas and presents methods for increasing the generating efficiency of Brown gas by designing a power supply to deliver power to a water-electrolytic cell and designing a cylindrical electrode to improve the efficiency of the electrolyzer needed for water electrolyzation. Based on the above the methods, a welding machine using Brown gas is developed. And the generation efficiency of Brown gas is measured tinder different conditions (duty ratio, frequency and amplitude) of supplied power.

반응성염료의 반응기에 따른 견섬유염색에 관한 연구 (A Study on Dyeing of Silk with Different Reactive Dyes)

  • 정지인;류효선
    • 한국염색가공학회지
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    • 제4권4호
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    • pp.73-80
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    • 1992
  • The influence of four types of reactive dyes that are different in reactive group on silk fabric were investigated at three different temperatures, 5$0^{\circ}C$, 7$0^{\circ}C$, 9$0^{\circ}C$ and the pH range from 7.0 to 11.0. The amount of absorption and fixation showed the optimum condition. The damage of silk during dyeing was determined by the change of physical properties. The results are given as follows: 1. The amount of dye fixed on fabrics at constant pH varied upon the reactivity of dyes. The affinity of dyes for silk fabrics were in order of Lanasol>Procion>Remazol>Cibacron. 2. The percentage of dye fixation on fabrics showed different tendency with temperature. The dye fixation of Cibacron and Procion was decreased above 7$0^{\circ}C$ because of the influence of hydrolysis. The dye fixation of Lanasol and Remazol was increased with the increase of temperature. This showed that temperature did not affect on hydrolysis. 3. The tensile strength of dyed fabric decreased with increasing pH and temperature owing to high temperature and alkaline damage on silk fabric. 4. The optimum conditions of dyeing silk with reactive dyes were as follows: Cibacron -7$0^{\circ}C$, pH 9.0, Procion-5$0^{\circ}C$, pH 7.0, Remazol-5$0^{\circ}C$, pH 8.0, and Lanasol-9$0^{\circ}C$, pH 9.0.

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Effect of a Nonionic Surfactant on the Adsorption and Kinetic Mechanism for the Hydrolysis of Microcrystalline Cellulose by Endoglucanase Ⅰ and Exoglucanase II

  • 김동원;장영훈;정영규;손기향
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제18권3호
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    • pp.300-305
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    • 1997
  • Effect of a nonionic surfactant, Tween 20 on the adsorption and kinetic mechanism for the hydrolysis of a microcrystalline cellulose, Avicel PH 101, by endoglucanase Ⅰ (Endo Ⅰ) and exoglucanase Ⅱ (Exo Ⅱ) isolated from Trichoderma viride were studied. The Langmuir isotherm parameters, amount of maximum adsorption (Amax) and adsorption equilibrium constant (Kad) for the adsorption, were obtained in the presence and the absence of nonionic surfactant. On the addition of Tween 20, the Kad and Amax values of Exo Ⅱ were decreased, while those of Endo Ⅰ were not affected. These indicate that the adsorption affinity of Exo Ⅱ on the cellulose is weakened by nonionic surfactant, and the surfactant enhanced desorption of Exo Ⅱ from insoluble substrate. The enzymatic hydrolysis of the cellulose can be described by two parallel pseudo-first order reactions using the percentages of easily (Ca) and hardly (Cb) hydrolyzable cellulose in Avicel PH 101 and associated rate constants (ka and kb). The Ca value was increased by adding Tween 20 for all enzyme samples (Exo Ⅱ, Endo Ⅰ and their 1:1 mixture) implying that the low-ordered crystalline fraction in the cellulose may be partly dispersed by surfactant. The ka value was not affect by adding Tween 20 for all enzyme samples (Exo Ⅱ, Endo Ⅰ and their 1:1 mixture). The kb value of Exo Ⅱ was increased by adding Tween 20, while that of Endo Ⅰ was not affected. This suggests that the surfactant helps the Exo Ⅱ desorb from microcrystalline cellulose, and increase the hydrolysis rate. These results were show that the increase of hydrolysis of cellulose by the nonionic surfactant is due to both the activation of Exo Ⅱ and partial defibrillation of the cellulose.

Effect of the stagnation pressure of a real gas on oblique shock waves

  • Mechta Mohammed;Yahiaoui Toufik;Dahia Ahmed
    • Advances in aircraft and spacecraft science
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    • 제11권2호
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    • pp.195-213
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    • 2024
  • This article deals with the changes in flow air properties across an oblique shock wave for a real gas. The flow through is investigated to find a general form for oblique shock waves. The main objective of this work will result in the development of a new numerical algorithm to determine the effect of the stagnation pressure on supersonic flow for thermally and calorically imperfect gases with a molecular dissociation threshold, thus giving a better affinity to the physical behavior of the waves. So, the effects of molecular size and intermolecular attraction forces are used to correct a state equation, emphasizing the determination of the impact of upstream stagnation parameters on oblique shock waves. As results, the specific heat pressure does not remain constant and varies with the temperature and density. At Mach numbers greater than 2.0, the temperature rise considerably, and the density rise is well above, that predicted assuming ideal gas behavior. It is shown that caloric imperfections in air have an appreciable effect on the parameters developed in the processes is considered. Computation of errors between the present model based on real gas theory and a perfect gas model shows that the influence of the thermal and caloric imperfections associated with a real gas is important and can rise up to 16%.

고분자로 표면 코팅된 BaTiO3와 이를 이용한 폴리이미드 나노복합필름의 제조 및 특성 (Preparation and Characterization of Polymer Coated BaTiO3 and Polyimide Nanocomposite Films)

  • 한승산;한지연;최길영;임승순;김용석
    • 공업화학
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    • 제17권5호
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    • pp.527-531
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    • 2006
  • 본 연구는 커패시터(capacitor) 등의 유전재료로서 응용이 가능한 고분자로 코팅된 무기입자 및 이를 이용하여 제조된 유전율이 높은 폴리이미드(polyimide; PI) 나노복합재에 관한 것이다. 무기입자로는 높은 유전상수를 가지는 barium titanate(BT)를 선정하였고, 이를 유기 고분자인 나일론 6으로 표면 코팅하여 매트릭스 고분자인 폴리이미드와의 친화력을 향상시켰다. FT-IR과 TEM을 통하여 5 nm 두께의 고분자 셀(shell)이 형성된 친유기화된 무기입자(BTN)를 확인하였으며, 나일론 6이 코팅된 BT의 내경과 외경의 비, 그리고 $\alpha$와의 관계를 나타낸 모식도를 통해 고분자 코팅 두께를 조절할 수 있음을 제안하였다. 제조된 BTN과의 복합화를 통하여 폴리아믹산 나노복합용액을 제조하였으며, 이를 탈수 고리화하여 열적 및 전기적 특성이 우수한 폴리이미드 나노복합필름을 제조하였다. SEM을 통하여 BTN이 매트릭스 고분자 내에 균일 분산상을 형성함을 확인하였으며, TGA와 전기적 측정을 통하여 BTN의 함량에 따른 폴리이미드 나노복합필름의 열안정성 지수, 적분 열분해 온도 및 유전율의 변화를 각각 조사하였다.

Re-188과 Tc-99m 표지 단일클론항체 CEA79.4의 생체외 특성과 생체내 분포 (In Vitro Properties and Biodistribution of Tc-99m and Re-188 Labeled Monoclonal Antibody CEA79.4)

  • 홍미경;정재민;여정석;김경민;장영수;이용진;이동수;정준기;이명철;이승진
    • 대한핵의학회지
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    • 제32권6호
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    • pp.516-524
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    • 1998
  • 목적: 현재 Re-188 표지 단일클론항체는 종양의 방사면역치료제로서 주목받고 있으며 많은 연구가 진행되고 있다. 이 연구에서는 골수성 백혈구 세포에 존재하는 NCA-95에 대한 단일클론항체 CEA79.4를 사용하여 Re-188의 항체 표지법을 개발하고 그 특성을 분석하여 Tc-99m 표지항체와 비교하고자하였다. 대상 및 방법: 표지는 항체에 방사성 핵종을 직접 붙이는 직접법을 사용하였다. 환원제인 ${\beta}$-mercaptoethanol로 단일클론항체 CEA79.4를 환원하여 SH-기를 생성시키고 여기에 발생기로부터 얻은 Tc-99m과 Re-188을 표지 하였다. Tc-99m의 표지를 위해서는 pH 6.5인 PBS에서 반응시켰으며 착화제와 환원제로 MDP kit를 사용하였다. Re-188은 50 mM acetate buffered saline (ABS, pH 5.3)에서 stannous tartrate를 환원제로 사용하여 표지 하였다. 표지효율은 ITLC로 확인하였으며 표지항체는 PD-10 칼럼을 이용하여 분리하였다. 분리한 표지항체를 1% 사람혈청 알부민과 비타민 C를 넣어 산화를 방지하고 실온과 사람혈청(5% $CO_2$, $37^{\circ}C$)에서 안정성 검사를 실시하였다. 대장암세포주인 SNU-C4와 세포결합검사를 실시하여 면역반응성과 항원에 대한 친화상수를 측정하였다. 또한 정상 ICR 마우스에 꼬리정맥으로 주사하여 1, 14, 24시간에 체내분포를 보았다. 결과: Tc-99m의 항체 표지효율은 $92.4{\pm}5.9%$ (n= 15)이고 Re-188은 $84.7{\pm}4.6%$ (n=4)로 우수한 표지효율을 보였다. 표지항체의 체외안정성검사를 실시한 결과 실온에서는 Tc-99m 표지항체의 경우 24시간까지 90% 정도로 안정하였으나 Re-188 표지항체는 70% 정도를 유지하였다. 사람혈청에서는 Tc-99m 표지항체는 24시간에 60% 이상이었으나 Re-188은 50% 이하로 낮았다. Tc-99m과 Re-188의 표지항체의 면역반응성은 각각 59.2%, 41.6%, 친화상수는 $6.59{\times}10^9\;M^{-1}$, $4.2{\times}10^9\;M^{-1}$ 이었다. 또한 정상 마우스에서 체내 분포는 비 특이적으로 집적되지 않고 배설되어 유사한 경향을 보였다. 결론: 기존의 Tc-99m 표지법과 같은 원리를 이용하여 단일클론항체 CEA79.4를 Re-188과 표지하였다. Re-188-CEA79.4는 면역반응성과 친화력등 체외 면역학적 특성과 체내분포에서 Tc-99m 표지항체와 큰 차이를 보이지 않았다. 따라서 Re-188-CEA79.4는 골수성 백혈병, 림프종 등 질병의 방사면성역치료에 적용 할 수 있을 것이다.

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생물학적 자극 통제 수단으로 활용하기 위한 돼지 페로몬성 냄새 물질의 탐색: Ligand Based Approach에 의한 돼지 페로몬성 Tetrahydrofuran-2-yl 계 화합물의 예측 (The Search of Pig Pheromonal Odorants for Biostimulation Control System Technologies: Prediction of Pig Pheromonal Tetrahydrofuran-2-yl Family Compounds by Means of Ligand Based Approach)

  • 성민규;조윤기;박창식;성낙도
    • Reproductive and Developmental Biology
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    • 제32권3호
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    • pp.141-146
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    • 2008
  • 돼지 페르몬성 냄새 물질을 탐색하기 위하여 tetrahydrofuran-2-yl 계 화합물들과 관측된 결합 친화력상수(Obs.p$[Od]_{50}$) 사이의 정량적인 구조-활성관계(QSAR)로부터 4개 형태의 모델(2D-QSAR, HQSR, CoMFA 및 CoMSIA)들이 유도되었다. Ligand based approache로부터 최적화된 CoMFA 모델(예측성; $r^{2}_{cv.}(q^2)$=0.886 및 상관성: $r^{2}_{ncv.}$=0.984)이 가장 좋은 모델이었다. CoMFA 모델로부터 돼지 페르몬성 냄새 물질로 예측된 $N^{1}$-allyl-$N^{2}$-(tetrahydrofuran-2-yl)methyl) oxalamide (P1), 2- (4-trimethylammoniummethylcyclohexyloxy)tetrahydrofurane (P5) 및 2- (3-trimethylammonium-methylcyclohexyloxy)tetrahydrofurane (P6) 분자들은 비교적 높은 결합 친화력 상수값(Pred.p$[Od]_{50}=8{\sim}10$)과 몇 가지 독성에 대하여 낮은 독성간을 나타내었다.

국산 항 백혈병 항체(항 CALLA, 항 JL-1)의 동위원소 표지 및 면역학적 특성에 관한 연구 (Radiolabeling and Immunological Characteristics of In-house Anti-Leukemic Monoclonal Antibodies(Anti-CALLA, Anti-JL-1 Antibodies))

  • 소영;정준기;정재민;이동수;이명철;고창순;박성회
    • 대한핵의학회지
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    • 제29권1호
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    • pp.98-104
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    • 1995
  • 필자는 서울대학교 의과대학 병리학 교실에서 만든 항 백혈병 항체(항 CALLA 항체, 항 JL-1 항체)에 대해 $^{99m}Tc$$^{125}I$의 표지 방법 및 면역학적 성상을 연구하여 임상 응용의 토대를 만들고자 하였다. $^{99m}Tc$은 pretargeting transchelation법으로 $^{125}I$는 lodogen법으로 표지하였다. 각 항체에 대해 결합 반응검사, Scatchard 분석, 변조 현상 검사를 시행하였다. $^{125}I$는 두 항체 모두에서 90%전후의 높은 표지율을 보인 반면, $^{99m}Tc$ 경우 70%이하의 표지율을 보여 개선점이 요구되었다. 결합반응검사에서도 $^{99m}Tc$을 표지한 항체는 30%정도의 낮은 면역 반응성을 보였다. Scatchard 분석 결과 결합상수 모두가 $10^9$으로 좋은 친화력을 보였고, 세포당 항체 결합 수는 $10^4$으로 비교적 높은 농도로 나타났다. 변조 현상은 모든 경우에서 나타나지 않았다. 항 CALLA 항체, 항 JL-1 항체는 향후 림프종과 백혈병의 진단 및 치료에 도움이 될 수 있으리라 기대된다.

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Corynebacterium ammoniagenes에서 purF 유전자의 조절 및 이에 특이적인 조절 단백질의 분리 (Regulation of Corynebacterium ammoniagenes purF and Isolation of purF-Specific Regulatory Proteins)

  • 이석명;김연희;이흥식
    • 미생물학회지
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    • 제45권3호
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    • pp.233-238
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    • 2009
  • Corynebacterium ammoniagenes의 purF 유전자의 발현을 purF의 프로모터 추정 부위에 cat 유전자를 융합시킨 transcriptional fusion 플라스미드를 제작하여 분석하였다. 유전자 purF는 adenine과 guanine에 의해 20~30%의 전사 저해효과를 나타내지만, hypoxanthine에는 저해를 받지 않는 것으로 나타났다. 또한 purF의 발현은 대수기중반에 최대에 달한 후 정체기 후반부까지 일정한 것으로 나타났다. 동시에, C. glutamicum에서 사용되는 강력한 프로모터인 $P_{180}$이 Escherichia coli의 $P_{tac}$보다 C. ammoniagenes에서 모든 성장 단계에서 40~50%의 향상된 프로모터 활성을 나타내었고 대수기 후반부에 최고 활성에 달해, C. ammoniagenes의 연구에도 활용 가능함을 확인하였다. DNA-affinity purification에 의해 C. ammoniagenes의 purF 프로모터에 결합하는 단백질로서 C. glutamicum의 Crp-family transcriptional regulator (NCgl0120)와 상동성이 높은 단백질을 검출하였다. 이 단백질은 크기가 40.1 kDa으로서 PAGE에서 관찰된 단백질 크기와 일치하였다. 이에 상응하는 C. ammoniagenes의 단백질은 400개의 아미노산으로 구성되어 있고, 42 kDa의 단백질을 만들며, pI는 4.9일 것으로 추정되었다. 이는 기존에 알려져 있는 E. coli 및 Bacillus subtilis의 PurR과 각각 14.1%, 15.8%의 아미노산 상동성을 보여, PurR과는 다른 종류의 단백질일 것으로 여겨진다.