제강산업의 냉연 산회수 설비공정을 검토하였고, 공정에서 발생되는 염화수소 가스를 처리하기 위하여 마이크로버블이 발생되는 DIWS 시스템을 운전하였다. 염화수소 가스의 대기배출허용기준을 만족하기 위해서는 추가공정의 도입이 필요한 것으로 나타났다. DIWS 장치로 유입되는 평균 염화수소 가스의 농도는 22.3 ppm, 배출가스의 농도는 0.59 ppm으로 평균 제거율은 97.3%였다. TMS 장치에 의한 10시간 5분 간격 측정에서도 평균 0.69 ppm으로 안정적이었으며, 수동으로 측정하여 TMS 장치의 신뢰도를 검증하였다.
Factors affecting regeneration of different Rubus varieties (blackberry, raspberry and their hybrid) were examined and a reliable regeneration system was established. Media for stock plant maintenance were tested; different explants and media were investigated to find the best circumstances for the regeneration. The effect of the commonly used antibiotics was studied to determine the most suitable one for selection of the transformants. We found that both MS and LS media supplemented by $20\;gL^{-1}$ sucrose are suitable for the stock plant maintenance. The optimal hormone content for the stock plants is $0.125\;mgL^{-1}$ 6-benzylaminopurine (BAP) with $0.01\;mgL^{-1}$ indole-3- butyric acid (IBA). The highest regeneration rate was observed on medium containing MS salts with B5 vitamins complemented with glucose, sucrose, maltose, $10\;gL^{-1}$ each, supplemented with benzylaminopurine riboside (BAR) ($2\;mgL^{-1}$) and indole-3-acetic acid (IAA) ($0.1\;mgL^{-1}$). The regenerated shoots appeared directly from the cut edges, without callus phase. Hygromycin and geneticin proved to be good selection agents for the Rubus explants, but due to their severe effect on the tissues we propose to use marker-free constructions for the transformation.
An efficient plant regeneration system has been developed for figleaf gourd (Cucurbita ficifolia Bouch$\'{e}$), which is exclusively used as a rootstock for cucumber. The protocol is based on results obtained from a series of culture experiments involving different parts of the cotyledons and various media. The culture of cotyledon explants was critical for the enhancement of shoot regeneration frequency. The lower parts of the cotyledon excised at the plumule base were found to display a markedly enhanced production of adventitious shoots compared to other cotyledon regions. Culture in silver nitrate-supplemented Murashige and Skoog (MS) medium was not beneficial for shoot regeneration and suppressed root regeneration. Efficient shoot regeneration was obtained on MS medium containing 1.0 $mg\;l^{-1}$ zeatin and 0.1 $mg\;l^{-1}$ indole-3-acetic acid. Regenerated shoots successfully elongated and rooted in medium containing 0.1 $mg\;l^{-1}$ 1-naphthalene-acetic acid after 10-15 days of subculturing. The plantlets were satisfactorily acclimatized in a greenhouse and grew into normal plants without any morphological alterations.
팔레놉시스 PLB (protocorm-like bodies) 조직을 이용하여 대량증식 및 신초재분화 체계 확립을 위하여 다양한 증식배지, 액체배지와 고체배지의 효과, sucrose 농도 등이 PLB 증식과 신초 재분화에 효과가 있는지 그리고 활성탄소, citric acid 및 ascorbic acid 등이 팔레놉시스 PLB 배양시 갈변화 현상을 감소하는데 효과가 있는지 알아 보고자 본 연구를 수행하였다. 그 결과, 난과 식물에서 증식배지로 널리 사용되는 VW, HCa, Orchimax 및 Kudson C 배지 중 VW 배지가 PLB 증식에서 타 배지와 비교해서 최소 1.3배에서 최대 2배의 증식효율 그리고 신초 재분화에서도 50% 이상 높은 효율을 보여 주었다. 최적 배지로 선정된 VW배지에 apple powder 및 banana powder를 첨가한 VWAB 배지를 기반으로 액체 및 고체배양에서 PLB 증식효율과 신초재분화율을 비교한 결과, 통계적으로 유의한 차이는 발견되지 않았다. Sucrose 농도를 0 ~ 50 g 처리한 실험에서는 PLB 증식과 재분화 효율 둘 다 10 g 처리구에서 가장 좋은 결과를 보여 주었다. 마지막으로 팔레놉시스 PLB 증식 및 재분화 과정에서 자주 발생하는 갈변화를 감소시키기 위하여 활성탄소, citric acid와 ascorbic acid를 처리한 실험에서는 활성탄소 1 g이 1.5%의 가장 낮은 갈변율을 나타내었다. 이러한 실험결과는 향후 팔레놉시스 PLB를 이용한 대량증식 및 재분화 체계 확립에 크게 기여하리라 판단된다.
철강산업의 산 회수설비에서 발생하는 염화수소 가스를 처리하기 위하여 마이크로버블을 발생할 수 있는 습식스크러빙 장치(DIWS)가 도입되었다. 산 회수 설비에서 발생하는 염소가스는 수소 가스와 결합하여 염화수소 가스의 농도를 50% 정도 증가시켰다. DIWS장치에 염소 제거를 위한 Na2S2O3를 투입한 이후의 유입수 염화수소 가스 농도는 13.1 ~13.4 ppm, 유출수는 1.5~1.7 ppm이었고, 제거율은 87.5~88.8%로 안정되게 유지하였다. DIWS는 대기배출기준을 안정적으로 만족함에 따라 현장 적용에 적용할 수 있는 공정으로 판단된다.
Fungal cytochrome P450 (CYP) enzymes catalyze versatile monooxygenase reactions and play a major role in fungal adaptations owing to their essential roles in the production avoid metabolites critical for pathogenesis, detoxification of xenobiotics, and exploitation avoid substrates. Although fungal CYP-dependent biotransformation for the selective oxidation avoid organic compounds in yeast system is advantageous, it often suffers from a shortage avoid intracellular NADPH. In this study, we aimed to investigate the use of bacterial glucose dehydrogenase (GDH) for the intracellular electron regeneration of fungal CYP monooxygenase in a yeast reconstituted system. The benzoate hydroxylase FoCYP53A19 and its homologous redox partner FoCPR from Fusarium oxysporum were co-expressed with the BsGDH from Bacillus subtilis in Saccharomyces cerevisiae for heterologous expression and biotransformations. We attempted to optimize several bottlenecks concerning the efficiency of fungal CYP-mediated whole-cell-biotransformation to enhance the conversion. The catalytic performance of the intracellular NADPH regeneration system facilitated the hydroxylation of benzoic acid to 4-hydroxybenzoic acid with high conversion in the resting-cell reaction. The FoCYP53A19+FoCPR+BsGDH reconstituted system produced 0.47 mM 4-hydroxybenzoic acid (94% conversion) in the resting-cell biotransformations performed in 50 mM phosphate buffer (pH 6.0) containing 0.5 mM benzoic acid and 0.25% glucose for 24 h at $30^{\circ}C$. The "coupled-enzyme" system can certainly improve the overall performance of NADPH-dependent whole-cell biotransformations in a yeast system.
In this study, we established a novel somatic embryogenesis and plant regeneration system through cell suspension culture of white dandelion (Taraxacum coreanum NAKAI.). Embryogenic calli could be initiated from leaf and root explants of sterile seedlings on solid Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 1.0 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) after 3-week cultures. To proliferate embryogenic calli rapidly, cell suspension culture was performed with transferred to liquid MS medium with various combinations of plant growth regulators (PGRs) including 2,4-D, ${\alpha}$-naphthalene acetic acid (NAA), indole-3-acetic acid (IAA), $N^6$-benzylamino purine (BAP), thidiazuron (TDZ), and kinetin. During suspension cultures, embryogenic calli not only greatly proliferated, but shoot organogenesis also simultaneously occurred from the surface of somatic embryos. Among them, TDZ at lower concentration, 0.1 mg/L produced the highest efficiency of somatic embryo formation and shoot organogenesis. Rooting of embryogenic calli with adventitious shoots was done on solid MS medium containing 0.1 mg/L NAA and 0.3% activated carbon. Nearly 80% of embryogenic calli with shoot organogenesis could be rooted normal. Well-rooted plantlets were transferred into pots under a greenhouse condition, and plants derived from this system appeared phenotypically normal.
Lee Jeong-Sun;Kim Chang-Kyun;Kim In-Sung;Lee Eun-Ju;Choi Hong-Keun
Journal of Plant Biotechnology
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제8권1호
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pp.21-25
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2006
Phragmites australis (reed) has received much attention as being one of the principle emergent aquatic plants for treating industrial and civil wastewater. Plant regeneration via plant tissue culture in p. australis was investigated. Three types of callus were identified from seeds on N6 medium plus 4.5 UM 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D). Yellow compact type showed the best redifferentiation, whereas white compact type and yellow friable were not competent to differentiate into plane. Solid medium culture was better than liquid suspension culture for enhancing callus growth when N6 medium supplemented with 4.5 ${\mu}M$ 2,4-D was used. Phytagel, as a gelling agent, was superior to agar in plant regeneration on N6 medium, supplemented with 9.4 ${\mu}M$ kinetin and 0.54 ${\mu}M$$\alpha$-naphthaleneacetic acid (NAA). Transfer of the plantlets regenerated from kinetin and NAA-supplemented N6 medium to growth regulator-free MS medium enhanced the further development of the plantlets. Plantlets on subsequently grown to maturity when tansferred to potting soil. The regenerated plants exhibited morphologically normal. The system for plant regeneration of P. australis enables to propagate elite lines on a large scale for water purification in the ecosystem
The establishment of cell suspension culture and plant regeneration of the halophytic Leymus chinensis (Trin.) are described in this study for the first time. Callus induction solid medium containing Murashige and Shoog (MS) basic salt, $2.0\;mg\;l^{-1}$ 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), and $5.0\;mg\;l^{-1}$ L-glutamic acid with $30.0\;g\;l^{-1}$ sucrose and $4.0\;g\;l^{-1}$ gelrite for solidification induced the highest rate of cell division in Type 1 callus among calli of various types. Liquid medium with the same hormone distribution was therefore, used for cell suspension culture from Type 1 callus. Over a 30 d suspension culture at 100 rpm, great amounts of biomass were accumulated, with 71.07% average daily increment and 22.32-fold total fresh weight increment. Comparison of before and after suspension culture, the distribution of different size callus pieces and the maintenance of callus type were basically unaltered, but a slight increase in relative water contents was observed. To induce the potential of plant regeneration, the directly transferring on plant regeneration solid medium containing MS basic salt, $0.2\;mg\;l^{-1}$$\alpha$-naphthalene acetic acid (NAA), $2.0\;mg\;l^{-1}$ kinetin (Kn), and $2.0\;g\;l^{-1}$ casamino acid and indirectly transferring were simultaneously performed. Even now growth rates of suspension-derived callus on solid medium were approximately half of those of Type 1 callus, but faster somatic embryogenesis was observed. Rooting of all regenerated shoots was successfully performed on half-strength MS medium. All plants appeared phenotypically normal.
Allium hookeri L. (Alliaceae family) is an important ethnomedicinal plant native to the Himalayan region of Asia. The aim of this research was to establish a high-frequency plant regeneration system for in vitro propagation of A. hookeri. Among the tissue types examined, receptacle explants derived from immature flower buds showed the highest regeneration rate of shoots ($93.33{\pm}4.63%$), roots ($76.67{\pm}7.85%$), and calli ($80.00{\pm}7.43%$) when cultured on Gamborg B5 (B5) medium containing $10{\mu}M$ 6-benzylaminopurine (BA) + $1{\mu}M$ naphthalene acetic acid (NAA), $0.5{\mu}M$ BA + $5{\mu}M$ NAA, and $1{\mu}M$ BA + $10{\mu}M$ NAA, respectively. Shoot multiplication was superior when cultured in liquid rather than on solid medium and relatively high concentrations of BA, ranging from 5 to $10{\mu}M$. Efficient bulblet formation following root induction from shoot clumps was achieved with culture in liquid B5 medium containing 7% (w/v) sucrose. Regenerated bulblets were successfully acclimatized to ex vitro conditions with a greater than 95% survival rate. By this method, a maximum of 62 plantlets per receptacle could be propagated within 9 weeks of initial culture. The in vitro propagation system established in this study will promote A. hookeri biotechnology, including large-scale production of healthy and aseptic clones, preserving parental genotypes with desirable traits, and genetic manipulation to enhance medicinal value.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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