In order to observe metabolic effects of an oral conceptive, Norinyle, on female Guinea pig, the changes of ascorbic acid amount and alkaline phosphatase activity in the liver and serum were determined, and histochemical changes of the uterus were observed by microscopic and electronmicroscopic methods by administration of Norinyle with or without ascorbic acid. The results obtained are summerized as follows: 1) The metabolic changes were clearly influenced by the administration of Norinyle alone, but the changes were diminshed by administration of Norinyle with ascorbic acid. 2) The adimnistration of Norinyle influenced to increases the requirment of ascorbic acid in the liver. 3) The uterus weight of the Norinyle administered group was much increased, while the weight was less increased in the group of administered Norinyle with ascorbic acid than the control. 4) The Norinyle administration was brought about an atrophy of endometrium, of uterus especially, functional layer, that the formation of glands were inadequately and the fromation of basal layer and stroma were diminished. 5) An acute infarction on the all layers of the uterus was developed at 9th and 25th days of Norinyle administration and 20th day of Norinyle with ascorbic acid administration. 6) A hypertrophy of stromal and endovascular cells were observed on the groups administered of Norinyle alone(group II ) or Norinyle with ascorbic acid(group IV). 7) It was observed that amount of collagen fiber in the basal and muscular layeres of uterus were diminished under a microscopical observation by the special stained specimen on the Norinyle administered group, but the amount and distribution of reticulin fiber were not changed significantly. 8) The fille structure of outer functional layer of the uterus were significantly changed by administration of Norinyle which were shown irregurarity of nuclear membrane, poor development ana significant expansion of enaoplasmic reticulum, decreases of the amount of ribosome due to slip off, increases of the number of dense bodies, obvious formation of vaccule, an4 decreases the amount of collagen in inner and outer layer of the stroma. 9) The amount of ascorbic acid in the serum did not much changed but the amount in the liver was much decreased by the administration of Norinyle, And the administration of Norinyle with ascorbic acid induced for a significant diminishing on the changes of uterus which might be able to developed by the administration of Norinyle alone.
The pyruvate dehydrogenase complex (PDC), a member of $\alpha$-keto acid dehydrogenase complex, catalyzes the oxidative decarboxylation of pyruvate with the formation of $CO_2$, acetyl-CoA, NADH, and $H^+$. This complex contains multiple copies of three catalytic components including pyruvate dehydrogenase (E1), dihydrolipoamide acetyltransferase (E2), and dihydrolipoamide dehydrogenase (E3). Two regulatory components (E1-kinase and phospho-E1 phosphatase) and functionally less-understood protein (protein X, E3BP) are also involved in the formation of the complex. In this study, we have partially cloned the gene for E3BP in human. Nine putative clones were isolated by human genomic library screening with 1.35 kb fragment of E3BP cDNA as a probe. For investigation of cloned genes, Southern blot analysis and the construction of the restriction map were performed. One of the isolated clones, E3BP741, has a 3 kb-SacI fragment, which contains 200 bp region matched with E3BP cDNA sequences. The matched DNA sequence encodes the carboxyl-terminal portion of lipoyl-bearing domain and hinge region of human E3BP. Differences between yeast E3BP and mammalian E3BP coupled with the remarkable similarity between mammalian E2 and mammalian E3BP were confirmed from the comparison of the nucleotide sequence and the deduced amino acid sequence in the cloned E3BP. Cloning of human E3BP gene and analysis of the gene structure will facilitate the understanding of the role(s) of E3BP in mammalian PDC.
Purpose: This study evaluated the systemic and local effects of doxycycline (DOX) and low-intensity laser (LIL) treatment as adjuvants to scaling and root planing (SRP) in the treatment of experimental periodontitis in rats. Methods: The sample consisted of 180 male rats (Rattus norvegicus albinus, Wistar), of which 30 did not receive induction of periodontal disease (negative control [NC] group) and 150 received induction of periodontal disease in the lower first molar. After 7 days, the ligature was removed, and the animals were divided into the following groups: NT (no treatment), SRP (SRP), DOX (SRP and DOX irrigation), LIL (SRP and laser irradiation), and DOX+LIL (SRP, DOX, and LIL). The animals were euthanized at 7, 15, and 30 days; thereafter, biochemical, radiographic, histological, and immunohistochemical analyses were performed. Results: In the intragroup analysis, lower concentrations of α-1-glycoprotein acid (α-1-Ga) and complement 3 (C3) were observed in the DOX+LIL group than in all other groups at all time points, as well as lower levels of complement 4 (C4) at 15 and 30 days (P<0.001). Less bone loss was observed in the DOX, LIL, and DOX+LIL groups than in the NC and SRP groups at all time points (P<0.001). There was a smaller number of tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP)-positive cells in the DOX+LIL group than in the other groups at all time points (P<0.001). Positive correlations were observed between the systemic levels of α-1-Ga, C3, and C4 and the number of TRAP-positive cells. Conclusions: The combination of DOX with LIL as SRP adjuvants was effective both systemically and locally for the treatment of experimental periodontitis in rats.
Osteoprotegerin (OPG) is a secreted glycoprotein that regulates bone resorption by inhibiting differentiation and activation of osteoclast, thereby potentially useful for the treatment of many bone diseases associated with increased bone loss. In this study, we designed a novel cDNA expression cassette by modifying the potent and mammary gland-specific goat ${\beta}$-casein/hGH hybrid gene construct and examined human OPG (hOPG) cDNA expression in transgenic mice. Six transgenic mice all successfully expressed hOPG in their milk at the level of 0.06-2,000 ${\mu}g/ml$. An estimated molecular weight of the milk hOPG was 55 kDa in SDS-PAGE, which is the same as a naturally glycosylated monomer. This hOPG expression was highly specific to the mammary glands of transgenic mice. hOPG mRNA was not detected in any organs analyzed except mammary gland. Functional integrity of milk hOPG was evaluated by TRAP (tartrate-resistant acid phosphatase) activity assay in bone marrow cell cultures. OPG ligand (OPG-L) treatment increased TRAP activity by two fold but it was completely abolished by co-treatment with transgenic milk containing hOPG. Taken together, our novel cDNA expression cassette could direct an efficient expression of biologically active hOPG, a potential candidate pharmaceutical for bone diseases, only in the mammary gland of transgenic mice.
Kim, Hyun-Ju;Hong, JungMin;Yoon, Hye-Jin;Yoon, Young-Ran;Kim, Shin-Yoon
Molecules and Cells
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v.37
no.9
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pp.685-690
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2014
Osteoclasts are large polykaryons that have the unique capacity to degrade bone and are generated by the differentiation of myeloid lineage progenitors. To identify the genes involved in osteoclast development, we performed microarray analysis, and we found that carboxypeptidase E (CPE), a prohormone processing enzyme, was highly upregulated in osteoclasts compared with their precursors, bone marrow-derived macrophages (BMMs). Here, we demonstrate a novel role for CPE in receptor activator of NF-${\kappa}B$ ligand (RANKL)-induced osteoclast differentiation. The overexpression of CPE in BMMs increases the formation of tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP)-positive multinuclear osteoclasts and the expression of c-Fos and nuclear factor of activated T cells c1 (NFATc1), which are key regulators in osteoclastogenesis. Furthermore, employing CPE knockout mice, we show that CPE deficiency attenuates osteoclast formation. Together, our data suggest that CPE might be an important modulator of RANKL-induced osteoclast differentiation.
This study examined the anti-osteoclastogenic effects of baicalin on receptor activator of NF-${\kappa}$B ligand (RANKL)-induced RAW264.7 cells. Baicalin is a flavonoid that is produced by Scutellaria baicalensis and is known to have multiple biological properties, including antibacterial, anti-inflammatory and analgesic effects. The effects of baicalin on osteoclasts were examined by measuring 1) cell viability; 2) the formation of tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) (+) multinucleated cells; 3) RANK/RANKL signaling pathways and 4) mRNA levels of osteoclast-associated genes. Baicalin inhibited the formation of RANKL-stimulated TRAP (+) multinucleated cells and also suppressed the RANKL-stimulated activation of p-38, ERK, cSrc and AKT signaling. Baicalin also inhibited the RANKL-stimulated degradation of $I{\kappa}B$ in RAW264.7 cells. In addition, the RANKL-stimulated induction of NFATc1 transcription factors was found to be abrogated by this flavonoid. Baicalin was further found to decrease the mRNA expression of osteoclast-associated genes, including carbonic anhydrase II, TRAP and cathepsin K in the RAW264.7 cells. Our data thus demonstrate that baicalin inhibits osteoclastogenesis by inhibiting the RANKL-induced activation of signaling molecules and transcription factors in osteoclast precursors.
Sung-Hoon Lee;Shin-Young Park;Jung Ha Kim;Nacksung Kim;Junwon Lee
BMB Reports
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v.56
no.10
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pp.551-556
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2023
Ginsenosides, among the most active components of ginseng, exhibit several therapeutic effects against cancer, diabetes, and other metabolic diseases. However, the molecular mechanism underlying the anti-osteoporotic activity of ginsenoside Rg2, a major ginsenoside, has not been clearly elucidated. This study aimed to determine the effects of ginsenoside Rg2 on receptor activator of nuclear factor-κB ligand (RANKL)-induced osteoclast formation. Results indicate that ginsenoside Rg2 inhibits RANKL-induced osteoclast differentiation of bone marrow macrophages (BMMs) without cytotoxicity. Pretreatment with ginsenoside Rg2 significantly reduced the RANKL-induced gene expression of c-fos and nuclear factor of activated T-cells (Nfatc1), as well as osteoclast-specific markers tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP, Acp5) and osteoclast-associated receptor (Oscar). Moreover, RANKL-induced phosphorylation of mitogen-activated protein kinases (MAPKs) was decreased by ginsenoside Rg2 in BMM. Therefore, we suggest that ginsenoside Rg2 suppresses RANKL-induced osteoclast differentiation through the regulation of MAPK signaling-mediated osteoclast markers and could be developed as a therapeutic drug for the prevention and treatment of osteoporosis.
Ra-Yeong Choi;Bong Sun Kim;Sohyun Park;Minchul Seo;Joon Ha Lee;HaeYong Kweon;In-Woo Kim
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.48
no.1
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pp.13-18
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2024
The rice field grasshopper, Oxya chinensis sinuosa (OC), has traditionally been utilized in Korea for various purposes; however, its potential benefits in the context of osteoporosis remain unclear. The results revealed that OC ethanol extract (OCE) significantly inhibited the formation and activity of tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP)-positive cells in receptor activator of nuclear factor-κB ligand (RANKL)-stimulated RAW264.7 cells. Furthermore, OCE, at concentrations ranging from 100 to 400 ㎍/mL, demonstrated a dose-dependent reduction in the protein expression of osteoclast-specific markers, including nuclear factor of activated T cell cytoplasmic 1, c-Src, and TRAP, when compared to RANKL stimulation alone. Additionally, OCE significantly inhibited RANKL-induced activation of p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) and c-Jun N-terminal kinase (JNK) but not the activation of extracellular signal-regulated kinase. Collectively, these results indicate that OCE suppresses osteoclastogenesis by attenuating the phosphorylation of p38 MAPK and JNK. Consequently, these findings suggest that OCE holds promise for the prevention of osteoporosis.
This study aimed to evaluate the protective effect of Orostachys malacophyllus (OM) and fermented O. malacophyllus (FOM) in Sprague-Dawley rats who had been intoxicated with 1% (w/w) orotic acid (OA) for 10 days. The activities of several hepatic enzymes, aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase (ALP), lactate dehydrogenase (LDH), and cholinesterase, were increased when OA was given, but these parameters were significantly decreased by FOM treatment. In addition, OA treatment resulted in an increased lipid peroxidative index (thiobarbituric acid-reactive substances, TBARS). A worsened antioxidant status (reduced glutathione) in the liver and serum was also observed. FOM treatment improved the antioxidant status of OA-induced fatty-liver rats, which was evaluated by decreased levels of the lipid peroxidative index and improved antioxidant status in the liver and serum. The contents of liver non-heme iron were increased with OA treatment and significantly decreased with FOM treatment, which suggested that the lipid peroxidation contents were inversely correlated with liver non-heme iron content. Based on these results, FOM is considered a material with significant potential for development into a functional health food that can improve fatty-liver conditions.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.21
no.6
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pp.608-616
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1992
This study was designed to observe the effects of feeding the mixed oils of the sardine oil containing n-3 EPA, DHA and the safflower oil which is rich in n-6 linoleic acid on the improvement of the lipids and enzyme activities of serum in rats. Experimental oils mixed with 16% butter (control group) and 8% butter + 8% olive oil, 8% butter and various level of sardine and safflower oils were administered to the male rats of the Sprague Dawley for 4 weeks. The activities of aspartate aminotransferase (AST, EC 2.6.1.1), alanine aminotransferase (ALT, EC 2.6.1.2), lactate dehydrogenase (LDH, EC 1.1.1.27) and alkaline phosphatase (ALP, EC 3.1.3.1) in serum were significantly decreased in the all experimental groups than in the control groups, and activities of ALT and LDH were remarkably lower in the group 5 (4% sardine 0il + 4% safflower oil). Concentrations of total cholesterol and HDL-cholesterol in serum were lower in the other groups than in the dontrol groups, and particularly, lowest in the group 5. Concentrations of LDL, LDL-cholesterol, phospholipid and triglyceride in serum were lower in the all experimental groups than in the control group. Concentrations to total cholesterol and cholesteryl ester in serum were lowest in the group 5. The ratio of cholesteryl ester to total cholesterol was remarkably high in the control group, while group 2 (8% olive oil) was the lowest. From this results, the feeding equal quantity mixed oil with n-3 PUFA rich sardine oil and n-6 PUFA rich safflower oil were effective on the improvement of the lipid composition in the serum. It might be due to the effects of appropriate ratios of P/S, 0.85 and n-6/n-3P, 2.85 in the test lipids.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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