We investigated whether cadmium (Cd) toxicity affects phosphorus (P) concentration and growth of poplar, which might be related to the ectomycorrhizal associations. Populus ${\times}$tomentoglandulosa cuttings were treated with 0.1 mM and 0.4 mM $CdSO_4$ and inoculated with ectomycorrhizal fungus, Pisolithus tinctorius (Pt) and grown in autoclaved peat vermiculite mixture for five months under greenhouse conditions. Ectomycorrhizal plants showed significantly higher Cd concentration in leaves, stems and roots than in non-mycorrhizal plants. Likewise, P contents in leaves and roots of ectomycorrhizal plants were higher than those of non-mycorrhizal plants. Acid phosphatase activity in leaves of ectomycorrhizal plants, however, was significantly lower than that of non-mycorrhizal plants. 0.1 mM Cd significantly increased P content in leaves and stems of non-mycorrhizal plants. In spite of high P concentration, which is accompanied by lower acid phosphatase activity, plant growth was not improved by inoculation with P. tinctorius. Total plant dry weight was lower than the non-mycorrhizal counterpart. The results imply that this might be caused by the large amount of energy consumption to alleviate Cd toxicity resulted from high Cd accumulation in their tissues.
The subcellular distribution of lipoxygenase in germinating soybean seeds (Glycine max[L.] AmSoy) was investigated by using differential centrifugation and sucrose density gradient fractionation. Most of lipoxygenase -1 and -2/3 activities was present in the supernatant fraction after differential centrifugation of homogenates prepared from three-day-old seedlings; only 1.5% of lipoxygenase activity remained in particulate fractions. The results of a sucrose density gradient fractionation (three-day-old) showed that the lipoxygenase activity coincided with acid phosphatase at the densities of 1.19, 1.23, $1.25g/cm^3$, even though most of lipoxygenase and acid phosphatase activities appeared in supernatant fractions. There was no indication that mitochondria contained any lipoxygenase activity, and it does not appear that glyoxysomes and ER contained any lipoxygenase activity either.
Prostatic acid phosphatase (PAP) expression increases proportionally with prostate cancer progression, making it useful in prognosticating intermediate to high-risk prostate cancers. A novel ligand that can specifically bind to PAP would be very helpful for guiding prostate cancer therapy. RNA aptamers bind to target molecules with high specificity and have key advantages such as low immunogenicity and easy synthesis. Here, human PAP-specific aptamers were screened from a 2'-fluoropyrimidine (FY)-modified RNA library by SELEX. The candidate aptamer families were identified within six rounds followed by analysis of their sequences and PAP-specific binding. A gel shift assay was used to identify PAP binding aptamers and the 6N aptamer specifically bound to PAP with a Kd value of 118 nM. RT-PCR and fluorescence labeling analyses revealed that the 6N aptamer bound to PAP-positive mammalian cells, such as PC-3 and LNCaP. IMR-90 negative control cells did not bind the 6N aptamer. Systematic minimization analyses revealed that 50 nucleotide sequences and their two hairpin structures in the 6N 2'-FY RNA aptamer were equally important for PAP binding. Renewed interest in PAP combined with the versatility of RNA aptamers, including conjugation of anti-cancer drugs and nano-imaging probes, could open up a new route for early theragnosis of prostate cancer.
The effects of folic acid on the oral mucosa of albino rats were histochemically studied in the twenty four male rats, weighing abut 100gm. Seven groups of 3 each were injected with 0.2ml folic acid (folic acid 0.5mg. was dissolved in physiological saline 0.2ml) subcutaneously, during 1,2,3,5,7,10 and 14 days respectively. Oral mucosa of rats sere removed from upper molar region and fixed in 10% formalin, cold absolute alcohol, Carnoy's solution and acetone. The serial sections were histochemically stained by McManu's PAS reaction, Mowry's metachromasia, alloxan-Schiff reaction, and azo dye method for alkaline phosphatase. The comparative staining method was hematoxylin-eosin stain. The results were as follows: 1) Alkaline phosphatase reaction of stratum spinosum and stratum granulosum tended to increase after 7 and 10 days of folic acid administration. 2) PAS reactions of basement membrane and lamina propria increased after folic acid administration. 3) Metachromasia of stratum spinosum and stratum granulosum were slightly increased after 3,5 and 7days of folic acid administration and returned to the level of Control after 10 days. 4) In the oral mucosa, alloxan-Schiff reaction increased after 7 days of folic acid administration.
Hydrolase activities of excretory-secretory products (ESP) and somatic extracts (SE) from Anisakis simplex sensu stricto (s.s.) and Anisakis pegreffii larvae were investigated by using API ZYM kit. In esterase group, acid phosphatase showed high activity from both of A. simplex (s.s.) and A. pegreffii. Esterase (C4) showed activity only from SE and A. simplex (s.s.) showed higher activity than A. pegreffii. Alkaline phosphatase, acid phosphatase and naphthol-AS-BI-phosphohydrolase showed higher activity in 3rd stage larvae than in 4th stage larvae of both species. In aminopeptidase group, only leucine arylamidase showed remarkable activity in SE of both anisakid species, and A. simplex (s.s.) SE showed higher activity than A. pegreffii SE. In glycosidase group, N-acetyl-${\beta}$-glucosaminidase, ${\alpha}$-mannosidase, ${\alpha}$-fucosidase showed higher activity in A. simplex (s.s.) than A. pegreffii, and 4th larvae showed higher activity than 3rd larvae. These differences in hydrolase activity of anisakid nematodes larvae are thought to be due to different metabolism such as growth, moulting, digestion and feeding.
PURPOSE. In this study, the aim of this study was to evaluate the effect of implant surface treatment on cell differentiation of osteoblast cells. For this purpose, three surfaces were compared: (1) a modified SLA (MSLA: sand-blasted with large grit, acid-etched, and immersed in 0.9% NaCl), (2) a laser treatment (LT: laser treatment) titanium surface and (3) a laser and acid-treated (LAT: laser treatment, acid-etched) titanium surface. MATERIALS AND METHODS. The MSLA surfaces were considered as the control group, and LT and LAT surfaces as test groups. Alkaline phosphatase expression (ALP) was used to quantify osteoblastic differentiation of MC3T3-E1 cell. Surface roughness was evaluated by a contact profilometer (URFPAK-SV; Mitutoyo, Kawasaki, Japan) and characterized by two parameters: mean roughness (Ra) and maximum peak-to-valley height (Rt). RESULTS. Scanning electron microscope revealed that MSLA (control group) surface was not as rough as LT, LAT surface (test groups). Alkaline phosphatase expression, the measure of osteoblastic differentiation, and total ALP expression by surface-adherent cells were found to be highest at 21 days for all three surfaces tested (P<.05). Furthermore, ALP expression levels of MSLA and LAT surfaces were significantly higher than expression levels of LT surface-adherent cells at 7, 14, and 21 days, respectively (P<.05). However, ALP expression levels between MSLA and LAT surface were equal at 7, 14, and 21 days (P>.05). CONCLUSION. This study suggested that MSLA and LAT surfaces exhibited more favorable environment for osteoblast differentiation when compared with LT surface, the results that are important for implant surface modification studies.
Effects of restraint stress and its modulations by ursodeoxycholic acid(UDCA) were evaluated on some biochemical and biophysical parameters in rats. Restraint stress induced elevations in blood alkaline phosphatase (ALP). cholesterol (CHOL), aspartate transaminase (GOT), alanine transaminase (GPT), lactate dehydrogenase (LDH) levels. It was also caused adrenal hypertrophy, decrease in weight of spleen and contents of ascorbic acid in stressed rats. As a results, stress indicators such as spleen, ascorbic acid, GOT, GPT, LDH were fastly changed after imposing stress, but those such as ALP, CHOL, adrenal were induced relatively later. UDCA was tested if it has an inhibitory effect against 18-hr restraint induced stress. UDCA lowered ALP, CHOL, LDH level and also effectively elevated the ascorbic acid contents in 25 mg/kg dosage of UDCA. In organ weights. the restraint stress induced increases in spleen and adrenal were attenuated by UDCA in 50 mg/kg dosage. However. stress-induced GOT and GPT levels were unaffected by UDCA.
The Journal of the Korean bone and joint tumor society
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v.7
no.2
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pp.41-50
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2001
Purpose : To investigate biochemical markers for osteosarcoma, activities of deoxyribocuclease(DNase), ribonuclease(RNase), 5'-nucleotidase, alkaline phosphatase and amylase were determined in the osteosarcoma tissue and serum of patients with osteosarcoma. Also studied were DNase, RNase in osteosarcoma tissue, isolating the enzymes from the sarcoma tissue and investigating the sarcoma specific enzymes. Materials and Methods : The experimental tissue and serum were obtained from twelve patients with osteosarcoma. The control group were obtained from the normal healthy tissue of the same patients. The tissue were centrifugalized to obtain extracts. The extracts were analized for the estimation of nucleic acid, protein contents and enzyme activities. And then each enzymes were isolated and analized by DEAE-cellulose chromatography and estimated for activities. Result : Activities of acid DNase, RNase, 5'-nucleotidase and alkaline phosphatase were significantly increased in osteosarcoma tissue. Neutral RNase in osteosarcoma tissue was shown to bo highly active, exhibiting secretory form of RNase inhibitor associated with the RNase was also increased. In the serum of patients with osteosarcoma, RNase activity was significantly increased. DEAE-cellulose column chromatographical analysis revealed that acid DNase was isolated as a single enzyme and neutral RNase as five isozymes in osteosarcoma tissue. Conclusion : The results indicated that combination of these enzymes could be used as markers for osteosarcoma. The results indicated that acid DNase and neutral RNase might play a role in genesis of sarcoma and suppression of sarcoma.
Seo, Kwang-Seok;Park, Sook-Kyung;Ju, Bong-Gun;Jeon, Sang-Hak;Kim, Won-Sun
Development and Reproduction
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v.2
no.1
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pp.53-62
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1998
The lysosomal acid hydrolases including lysosomal acid phosphatase (LAP) are believed to play an important role in intracellular and extracellular degradation. LAP was reported to increase its activity in dedifferentiation stage during urodele limb regeneration. In the paresent study, LAP localization in the Mexican axolotl (Ambystoma mexicanum) limb regenerates was investigated by immunohistochemistry. LAP immunoreactivity with monoclonal antibody against Korean salamander (Hynobius leehii) LAP was observed mainly in the wound epidermis, blastema cells, muscle, and cartilage which were under dedifferentiation process in axolotl limb regenerates. Moreover, LAP immunoreactivity increased gradually during the early phase of lib regeneration and reached the peak level at dedifferentiation stage. However, as redifferentiation begans, LAP immunoreactivity decreased slowly to the basal level. Retinoic acid (RA) which is known to induce skeleton pattern duplication in regenerating urodele limb appears to enhance LAP immunoreactivity. In the RA-treate limg regenerates, LAP immunoreactivity was higher than in the normal regenerates. In addition, the LAP expression period was more extended in the RA treated regenerates than in the normal regenerates. These results suggest that RA is involved in the extension of dedifferentiation state in RA-treated limb regenerate.
The present investigation has been undertaken to understand the mechanism of implantation process, by demonstrating the role of ovarian steroids in connection with phosphatase activity in the differentiation of uterine endometrium for implantation. The results obtained are as followings: The differentiation of the uterine endometrial tissue was closely influenced by the ovarian steroid hormones; at first, 17${\beta}$-estradiol initiated the differentiation of the uterine luminal and glandular epithelial cells, and then progesterone induced differentiation of stromal cells, and thereby two steroids maintain decidualization of the uterine tissues. We observed that the phosphatase activities seem to be dependent upon the ovarian steroids; that is the activity showed higher level in progesterone treated group than in estradiol treated one, and the highest activity was found in the group treated with both estradiol and progesterone. Acid phosphatase showed the highest activity whereas alkaline phosphatase showed the lowest in the rat uterine endometrium during early pregnancy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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