수소 플라즈마 처리된 유리 기판에 스핀 코팅 시스템을 이용하여 nickel chloride를 코팅하여 단백질칩 플레이트를 제조하였다. 다양한 플라즈마 처리 시간대에서 histidine tagged 단백질의 부착 능력 특성을 연구하였다. 유리 기판 표면에서 nickel chloride와 단백질 특성을 particle size analysis를 이용하여 관찰하였고, 단백질의 부착 능력 정도를 bio imaging analyzer system으로 측정하였다. 실험 결과에 따르면, 플라즈마 처리 시간이 증가할수록 단백질 부착 능력은 감소하는 것으로 나타났다. 기판 표면에서의 단백질 부착능력 특성에 관한 mechanism은 본문의 결과 및 토의에서 논의되었다. 플라즈마 처리된 단백질칩 기판에 대한 표면 안정화는 바이오센서 시장에서 큰 관심을 끌 것으로 기대된다.
Nickel chloride coated protein chip plate was developed by using a spin coating method. The ability of histidine tagged protein adsorption was investigated at various solvents. The surface of plate has a large aggregated nickel complex with high density in water. However, the surface of plate has a very small size of aggregated nickel complex with low density in isopropanol. The ability of protein adsorption decreased as increasing the size of alkyl chain in various alcohol solvents. The mechanism on the ability of protein adsorption at the plate surface is discussed.
[ $NiCl_2$ ] and poly-L-lysine coated protein chip plates have been fabricated using a spin coating system. Water has been used as solvent and scratching effects on glass slides and ITO have been investigated. We also observed the surface properties of $NiCl_2$ and poly-L-lysine coated slides by using PSA(Particle size analyzer) and AFM(Atomic force microscope). The AFM results imply that the surface patterns created in the spin coating system determine the protein adsorption. Adsorption of histidine-tagged KRS proteins immobilized on glass slides and ITO was analyzed using a BAS image system. The results suggest that the scratching effect was increased ability of protein adsorption.
Chitosan의 탈아세틸화도와 분자량 등을 달리하여 chitosan의 제조조건에 따른 수용성 단백질에 대한 흡착율 및 흡착에 영향을 미치는 인자에 대해 검토하였다. Chitosan의 탈아세틸화 조건을 $60\%,\;70\%,\;80\%$로 달리 하여 albumin, hemoglobin, albumin-myoglobin 혼합용액에 적용했을 때 chitosan의 탈아세틸화도가 높을 수록 chitosan과 수용성 단백질 사이의 흡착율은 높게 나타났다. 초음파 처리에 의하여 chitosan의 분자량을 변화시켰을 때 chitosan의 분자량이 작을수록 chitosan과 수용성 단백질 사이의 홉착율은 높게 나타났다 pH 변화에 따른 chitosan과 수용성 단백질의 흡착율은 albumin 및 albumin-myoglobin 혼합용액에서는 pH 4에서, hemoglobin 용액에서는 pH 7에서 홉착율이 높게 나타났다. Chitosan과 수용성단백질과의 흡착에서 반응시간은 albumin 및 albumin-myoglobin 혼합용액에서는 4시간, hemoglobin 용액에서는 3시간까지 흡착을이 증가하였고, 그 이상의 시간을 반응시켜도 흡착율의 증가는 거의 나타나지 않았다. 수용성 단백질 용액에 NaCl 농도를 0.1에서 1.0M로 증가시켜 첨가했을 때 염의 농도가 높을수록 chitosan과 수용성 단백질 사이의 흡착이 잘 일어나지 않았다.
This study investigated the properties and functions of wool and silk dyed with Catechu by examining the effects of dying conditions such as dye concentration, dying temperature, dyeing time, pH level and pre-mordants. These conditions were examined in relation to dye uptake and color changes, washing fastness, light fastness, ultraviolet-cut ability and antimicrobial ability of the dyed fabrics. Catechu showed good affinity to silk fiber. Langmuir adsorption isotherm was obtained, and so it was considered that ionic bondings are formed between Catechu and protein fiber. As the dyeing time and temperature is increased, the dyeability of both silk and wool fabrics also increases. At high temperatures the color of dyed fabrics changes from Y and YR to R. Wool is effective in using Al, Cu, Fe mordant, while silk is effective only in using only Cu mordants. The dyeability was shown to be improved at low pH levels. Additionally, both washing fastness and light fastness were shown to be low. However, the fabric color gradually changed to red was due to mailard reaction of catechol tannin causingby repeated washing and sunlight. The ultraviolet-cut ability was improved for cotton fabric dyed with Catechu. Also, dyed fabric with Catechu showed very good antimicrobial abilities at 99.9%.
Park, Jisoo;Kim, Youngmi;Jung, Donggeun;Kim, Young-Pil;Lee, Tae Geol
한국진공학회:학술대회논문집
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한국진공학회 2016년도 제50회 동계 정기학술대회 초록집
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pp.378.2-378.2
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2016
Biosensors currently suffer from severe non-specific adsorption of proteins, which causes false positive errors in detection through overestimation of the affinity value. Overcoming this technical issue motivates our research. Polyethylene glycol (PEG) is well known for its ability to reduce the adsorption of biomolecules; hence, it is widely used in various areas of medicine and other biological fields. Likewise, amine functionalized surfaces are widely used for biochemical analysis, drug delivery, medical diagnostics and high throughput screening such as biochips. As a result, many coating techniques have been introduced, one of which is plasma polymerization - a powerful coating method due to its uniformity, homogeneity, mechanical and chemical stability, and excellent adhesion to any substrate. In our previous works, we successfully fabricated plasmapolymerized PEG (PP-PEG) films [1] and amine functionalized films [2] using the plasma enhanced chemical vapor deposition (PECVD) technique. In this research, an amine functionalized PP-PEG film was fabricated by using the plasma co-polymerization technique with PEG 200 and ethylenediamine (EDA) as co-precursors. A biocompatible amine functionalized film was surface characterized by X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) and Fourier-transform infrared spectroscopy (FT-IR). The density of the surface amine functional groups was carried out by quantitative analysis using UV-visible spectroscopy. We found through surface plasmon resonance (SPR) analysis that non-specific protein adsorption was drastically reduced on amine functionalized PP-PEG films. Our functionalized PP-PEG films show considerable potential for biotechnological applications such as biosensors.
A novel process for urokinase purification was studied using p-aminobenzamidine as the ligand and sepharose 4B as the matrix. The adsorption, washing, and elution conditions were optimized by an unusual method. An adsorption buffer containing 2.5 M NaCl and $1\%$ Tween 80 facilitated the adsorption of urokinase on the affinity media and prevented contaminants from binding to the p-aminobenzamidine affinity gel. It was found that $5\%$ Tween 80 removed most of the contaminants from the affinity column. A 0.2 M glycine elution buffer containing 0.5 M NaCl (pH 3.0) was found to have a strong elution ability with a high recovery and purity of urokinase. A crude urokinase material of231 IU/mg protein from human urine was purified to 124,300 IU/mg protein with a purification factor of 538 and yield of $86.7\%$. As a result, a high purity urokinase was obtained with only a single affinity chromatography step. The purification process was successfully scaled-up to a 2-1 chromatography column. The resulting urokinase eluate could be directly lyophilized, thereby complying with Chinese pharmacopoeia (1995 version) standards.
The design of DNA nanostructures is of fundamental importance, the intrinsic value of DNA as a building-block material lies in its ability to organize other bio-molecules with nanometer-scale spacing. Here, we report the fabrication of DNA scaffolds with nano-pores (<10 nm size) that formed easily without the use of additives (i.e., avidin, biotin, polyamine, or inorganic materials) into large-scale structures by assembling DNA molecules at near room temperature ($30^{\circ}C$) and low pH (~5.5). Protein immobilization results also confirmed that a fibronectin (FN) proteins/large scale DNA scaffolds/aminopropylytriethoxysilane (APS)/SiO2/Si substrate with high sensitivity formed in a well-defined manner. The DNA scaffolds can be applied for use with DNA-based biochips, biophysics, and cell biology.
E-beam 전조사법을 이용하여 HPP-g-styrene 공중합체와 술폰화 반응을 통한 술폰화 HPP-g-styrene 섬유이온교환체를 합성하였다. 그라프트율은 스티렌 단량체 농도가 증가함에 따라 증가하였으며 스티렌 단량체 농도가 80%에서 그라프트율이 128%로 최대를 나타냈다. 술폰화율은 그라프트율이 증가함에 따라 증가하는 경향을 나타내었으며, 그라프트율이 100%일 때 13.4%로 최대값을 나타내었다. 술폰화 HPP-g-styrene 섬유이온교환체의 이온교환용량은 약 3.42 meq/g으로써 흡착 성능이 매우 우수한 소재임을 확인하였다. BET 분석결과 술폰화 HPP-g-styrene의 비표면적은 62.54 $m^2/g$, 기공크기는 25 $\AA$으로 반응전보다 비표면적은 감소하였고 기공크기는 약간 증가하는 경향을 보였다. 또한 Bovine Serum Albumin (BSA) 흡착 실험 결과 술폰화도가 증가함에 따라 BSA 흡착 용량이 증가하는 경향을 나타내었으며, 술폰화도 13.4%에서 BSA 흡착용량 3.8 mg/g으로 최대를 나타내었다. 따라서 본 연구에서 합성한 섬유이온교환체가 BSA 흡착.분리에 적합한 소재임을 확인하였다.
배경: 체외순환으로 발생하는 전신성 염증반응을 줄이기 위해 체외순환 회로의 표면에 초친수성 표면개질을 시행한 후 혈장 단백의 흡착 및 혈소판의 변화를 관찰하였다 대상 및 방법: 60kg 내외의 돼지 10마리를 대상으로 하였다. 체외순환은 좌심방과 상행대동맥에 캐눌라를 거치하여 원심성 바이오펌프를 이용해 2시간 동안 정상체온 하에서 시행하였다. 이때 실험군(n=5)에서는 체외순환회로에 초친수성 표면처리를 하였으며 대조군(n=5)에서는 상용화된 일반적인 튜빙을 사용하였다. 체외순환에 따른 염증반응의 정도를 비교하기 위하여 혈소판 수 및 응집능 검사, 트롬빈-안티트롬빈 복합체 검사, 그리고 혈액 내 총 단백량을 측정하였다. 결과: 양 군에서 모두 혈소판의 수 및 응집능 기능검사에서 유의한 차이를 보이지 않았으며 또한 트롬빈-안티트롬빈 복합체의 농도에서도 두 군 간에 유의한 차이를 보이지 않았다. 그러나 총 단백량의 측정에서는 체외순환 후 대조군에서 실험군에 비해 유의하게 감소되었다. 결론: 초친수성 표면처리는 체외순환 시 혈장 단백의 표면흡착에 따른 혈장 단백의 감소를 줄일 수 있었으나 이로 인한 염증반응의 감소효과는 관찰할 수 없었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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