Chlorella is a eukaryotic organism that can be used as an industrial host to produce recombinant proteins. In this study, a salt-inducible promoter (SIP) was isolated from the freshwater species Chlorella vulgaris PKVL7422 from the screening of genes that were upregulated after salt treatment. Several cis-acting elements, including stress response elements, were identified in the isolated SIP. Moreover, the Gaussia luciferase gene was cloned after the SIP and transformed into C. vulgaris to test the inducibility of this promoter. Reexamination of transcriptome of C. vulgaris revealed that genes involved in the synthesis of methyl jasmonic acid (MeJA), gibberellin (GA), and abscisic acid (ABA) were upregulated when C. vulgaris was treated with salt. Furthermore, the expression level of recombinant luciferase increased when the transformed C. vulgaris was treated with salt and MeJA, GA, and ABA. This study represents the first report of the C. vulgaris SIP and highlights how transformed microalgae could be used for robust expression of recombinant proteins.
To produce ${\gamma}$-linolenic acid (GLA) by cell cultures of Lithospermum erythrorhizon, we optimized medium compositions including carbon sources, nitrogen sources and growth regulators. MS basal medium supplemented with 1.0 mg/L 2, 4-D was effective for callus induction from mesophyll tissue. Addition of sucrose at 88mM concentration induced active proliferation of suspension cells and increased GLA content. Increased supplement of potassium nitrate as nitrogen source resulted in proliferous cell growth and increased total fatty acid content Abscisic acid increased cell growth and fatty acid content in callus culture, whereas as it had an inhibitory effect in suspension cell culture.
Ginseng zygotic embryos, seedlings, and exised cotyledonary nodes were cultured on Murashinge and Skoog's(MS) medium, supplemented with 6-benzyladenine(BA) and gibberellic acid(GA3) to induce flower buds. As the concenteration of nitrogen compounds in MS medium was reduced to half of its strength, the flowering frequency of zygotic embryos increased up to 90%. The optimum concentration of sucrose in the medium for flowering of seedlings was 30-60 g/1. In all cases flower buds were formed on elongated axillary branches from the cotyledonary nodes, while the apices remained vegetative. When zygotic embryos and excised cotyledonary nodes were cultured on the medium, supplemented with all possible combinations of BA, GA3, and abscisic acid(ABA) of 5 $\mu$M indole-3-acetic acid(IAA) in the above combinations did not affect flowering. These results suggest that cytokinins, gibberellins, and inhibitors play primary, permissive, and preventive roles, respectively, in the induction of flowering of ginseng.
The aim of this study was to investigate the effect of plant growth at several different growing periods on antioxidant activities and zeatin and ABA contents of Artemisia iwayomogi. Measurements of antioxidant activities, lipid peroxidation inhibition, and superoxide radical scavenging activity were done using PMS, NBT and lipid auto-oxidation analysis, respectively. The results show that activities of antioxidants from Artemisia iwayomogi had much higher than BHT. DPPH free radical scavenging effect of Artemisia leaf extract was increased from $71.06{\pm}4.36%$ in April to $90.06{\pm}4.41%$ in October. Activities of superoxide radical scavenging and lipid peroxidation inhibition were $33.83{\pm}3.45%$ and $45.60{\pm}3.10$ in April and then increased to $84.40{\pm}4.00%$ and $75.86{\pm}3.50%$ in October, respectively. An ELISA technique has been developed for the determination of zeatin and ABA in Artemisia leaves. By this method, the content changes of zeatin and ABA from Artemisia during the growth were investigated. The zeatin content in leaf was measured to be $186.86{\pm}1.40$ pmol/g dry weight in April, however, decreased to $117.93{\pm}5.83$ pmol in October. The ABA content in leaf increased from $19.00{\pm}1.26$ nmol in April to $68.20{\pm}2.52$ nmol in October. Relationship between antioxidant activities and plant hormone contents was indicated that antioxidant activity may depend on decreasing zeatin content or increasing ABA content.
Invertase (${\beta}$-D-fructofuranosidase; EC 3.2.1.26) catalyzes the conversion of sucrose into glucose and fructose and is involved in an array of important processes, including phloem unloading, carbon partitioning, the response to pathogens, and the control of cell differentiation and development. Its importance may have caused the invertases to evolve into a multigene family whose members are regulated by a variety of different mechanisms, such as pH, sucrose levels, and inhibitor proteins. Although putative invertase inhibitors in the Arabidopsis genome are easy to locate, few studies have been conducted to elucidate their individual functions in vivo in plant growth and development because of their high redundancy. In this study we assessed the functional role of the putative invertase inhibitors in Arabidopsis by generating transgenic plants harboring a putative invertase inhibitor gene under the control of the CaMV35S promoter. A transgenic plant that expressed high levels of the putative invertase inhibitor transcript when grown under normal conditions was chosen for the current study. To our surprise, the stability of the invertase inhibitor transcripts was shown to be down-regulated by the phytohormone ABA (abscisic acid). It is well established that ABA enhances invertase activity in vivo but the underlying mechanisms are still poorly understood. Our results thus suggest that one way ABA regulates invertase activity is by down-regulating its inhibitor.
This study was conducted to investigate the effects of chemical application and amout of soil moisture on low temperature stress of cucumber seedling under the greenhouse conditions. When chilling treatments ($2^{\circ}C$) were begun at 07:00AM, survival rates of seedlings of two conditions; -0.3 bar and -5.5 bar were 28.3% and 83.3% respectively. But when chilling treatments were begun at 6:00PM - even the soil moisture condition was -0.3 bar - the survival rate was above the 87%. When reducing the soil moisture from -0.3 bar to -9.0 bar, ABA content in leaf was inc.eased by 6.5fo1d. Spraying of abscisc acid (ABA) before or after the chilling significantly increased the survival rates of seedlings, decreased the amounts of leaking electrolytes and prevented the yield reductions. ABA application on the soil before the chilling appeared to be more effective than the application after the chilling with foliar spray. Spraying of ABA ($10^{-5}M$), urea (0.2%) or $KH_2PO_4$ was effective in counteracting the low temperature, which causes growth deterioration and yield reduction in cucumbers.
The enzyme invertase contributes to sugar unloading, pathogen defense, differentiation and development in plants. We cloned the complete cDNA of a soluble acid invertase from pea seedlings (Pisum sativum) via RT-PCR and the rapid amplification of the cDNA end (RACE) technique. The full-length cDNA of the soluble pea invertase comprised 2237 bp and contained a complete open reading frame encoding 647 amino acids. The deduced amino acid sequence showed high homology to soluble acid invertases from various plants. Northern blot analysis demonstrated the soluble acid invertase gene of P. sativum was strongly expressed in sink organs such as shoot tips and root tips, and induced by abscisic acid, gibberellic acid and jasmonic acid in shoots. Especially, gibberellic acid enhanced the gene expression of the soluble acid invertase in a time-dependent manner. This study presents that the gene expression patterns of a soluble acid invertase from pea are strongly consistent with the suggestion that individual invertase gene product has different functions in the growing plant.
Choi, Myoung-Goo;Lee, Hyen-Seok;Hwang, Woon-Ha;Yang, Seo-Yeong;Lee, Yun-Ho;Lee, Chung-gun;Yun, Song Joong;Jeong, Jae-Hyeok
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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v.65
no.4
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pp.274-283
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2020
Seed dormancy is an adaptive trait in which seeds do not germinate under unfavorable environmental conditions. Low dormancy seeds are easily germinated under optimal environmental conditions, and these characteristics greatly reduce the yield and quality of crops. In the present study, we compared the pre-harvest sprouting (PHS) rate of two cultivars, Joun and Jopyeong, using the Winkler scale after heading day and temperature of the test. The PHS rate increased as the Winkler scale after heading day increased from 700℃ to 1100℃ and the temperature of the test increased. In all conditions, the PHS rate of Jopyeong was higher than that of Joun. RNA-sequencing was used to analyze the cause of the high PHS rate. We analyzed the biological metabolic processes related to the abscisic acid (ABA) metabolite pathway using the KEGG mapper with selected differentially expressed genes in PHS seeds. We found that the expression of ABA biosynthesis genes (OsNCEDs) was down-regulated and that ABA catabolic genes (OsCYP707As) was up-regulated in PHS seeds. However, the quantitative real-time PCR results showed that Joun had a higher expression of OsNCEDs than that of Jopyeong, but OsCYP707As did not yield a significant result. Joun displayed higher ABA content than that of Jopyeong not only during ripeness time but also during PHS treatment. Taken together, we provided evidence that the ABA content remaining in the seed is important to the PHS rate, which is determined by the expression level of the ABA biosynthesis gene OsNCEDs.
This work was conducted to investigate the important rooting factors through comparative analysis of a physiological differentiation after layering treatment using four apple rootstocks of different rooting abilities; M.26, M.9, O.3, and Mo.84. Mo.84 showed the highest rooting rate in from rootstocks, while O.3 was the lowest. Mo.84 also found to have the highest indole-3-acetic acid (IAA) content, although the fluctuation of IAA contents was not consistent with layering treatment. In contrast, abscisic acid (ABA) content of Mo.84 which showed highest rooting was lowest among rootstocks regardless of layering treatment. And ABA contents of all rootstocks were decreased after layering treatment than before layering treatment. O.3 which showed poor rooting rate revealed lowest in boron content. Carbohydrate/nitrogen (C/N) ratio of Mo.84 was the highest in all rootstocks. Therefor, we assumed that he IAA contents in layering treated rootstocks were not seemed to be a major rooting factor, but the changes in ABA contents and boron levels limit rooting in dwarf apple rootstocks.
To understand the molecular mechanism of hardening process in somatic embryo development and artificial seed germination in celery (Apium graveolens L.), the changes of protein synthesis by ABA or cold teatment at early globular stage were examined. Protein content and nitrate reductase activity in ABA- or cold-treated somatic embryo and seedlings were higher than that in unheated ones. The protein content and nitrate reductase activity were more prominent in somatic embryos than in seedlings. From two-dimensional electrophoresis, several protein spots specific to ABA or cold treatment were identified: 30 KD, 32 KD, 171 KD and 205 KD at heart-shaped stage; and 29 KD, 33 KD, 37 KD, 38 KD, 41 KD, 55 KD, 66 KD, and 110 KD at cotyledonary stage were the most specifically synthesized However the synthesis of certain polypeptides were repressed at heart-shaped or cotyledonary stage: 42 KD, 44 KD, 59 KD, 64 KD, 101 KD, 104 KD, and 190 KD at heart-shaped stage; and 29 KD and 116 KD at cotyledonary stage. The protein pattern changes by ABA or cold treatment occurred simultaneously and mainly in acid-soluble proteins during somatic embryo development and artificial seed germination. Therefore it is suggested that the metabolic changes for adaptation to environmental change occur during somatic embryo development and the germination and growth of seedling from embryo.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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