In this study, a plant tissue culture system was established for Atractylodes spp., an economically valuable medicinal crop in Korea that has low domestic production and is increasingly imported. In particular, Atractylodes ovata was treated with four types of cytokinins, 6-benzylaminopurine (BA), zeatin, kinetin, and thidiazuron (TDZ), in two different concentrations (0.5 and 1.0 mg/L). Among the four types of cytokinins, the BA treatment was effective for the shoot and root growth of A. ovata. Both the 0.5 mg/L and 1.0 mg/L concentrations of BA showed similar results; however, the 1.0 mg/L concentration of BA was more effective in promoting shoot and root growth. The treatments showed that the TDZ treatment was not effective for the shoot and root growth, except for the number of shoots and the fresh weight (FW) of the root; therefore, it was unsuitable for this species. In this study, we established a mass production system of A. ovata. Our results showed that direct in vitro regeneration may make a significant contribution to improving the cultivation of the medicinal plant A. ovata.
Effects of light, methyl jasmonate(MJ), 6-benzylaminopurine(BA), thidiazouron(TDZ), and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid(2,4-D) on the contents of ecdysteroids (${\beta}$-ecdysone+polypodine B) in Polypodium vulgare L. and Achyranthes japonica Nakai were studied. When the plants of P. vulgare were cultured under light control, the ecdysteroids contents in both leaves and rhizomes decreased with increasing light intensity. The ecdysteroids contents in A. japonica were also lower when cultured under light than under dark. Among the tested plant growth regulators, MJ, BA, and TDZ increased the ecdysteroids contents in both P. vulgare and A. japonica.
Journal of the Korean Society of Environmental Restoration Technology
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v.26
no.6
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pp.155-164
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2023
Sedirea japonica is one of the critically endangered species in South Korea mostly due to artificial harms such as illegal collection and habitat destruction. Therefore, artificial propagation through improving germination rate, increasing growth, and controlling flowering is meaningful for the conservation and reintroduction of S. japonica. It is suggested that cytokinins are one of the multi-factors that contribute to plant growth and floral responses. Especially, exogenous cytokinins have been known to induce or promote shoot growth or earlier flowering in orchids. Therefore, it was investigated how the application of 6-benzylaminopurine (BA) influenced the growth and inflorescence of S. japonica. A foliar spray containing BA at 100, 200, 300, and 400 ppm was applied from 1st July to 30th December 2021. Leaf length, leaf length growth rate, leaf width, and width and length ratio were measured as growth-related factors. Visible inflorescence rate, inflorescence length, the number of flowers per inflorescence, and the distance between the stalks were measured as flowering-related factors. Growth-related factors except for leaf growth rate were not affected by BA treatments, while leaf growth rate was significantly increased by 200 ppm of BA treatment. The visible inflorescence rate increased by 200 ppm of BA treatment, and there seems an optimal concentration and threshold of BA treatment. An iterative experiment with more seedlings and measurement factors would be helpful to figure out the effects of exogenous BA treatment on S. japonica, and it can be applied for mass propagation.
Combinations of plant growth regulators, darkness treatments, and the order of expanding leaves for explants were evaluated for optimizing in vitro shoot regeneration rate of 'Whangkeumbae' pear. In a MS medium, supplemented with $8.88{\mu}M$ 6-benzylaminopurine (BA) and $0.49{\mu}M$ indole-3-butyric acid (IBA), green foci were observed on the surface of the callus 8 days after culture initiation. Some adventitious buds were later induced from those green foci, resulting in the appearance of normal shoots. In a medium containing $22.20{\mu}M\;BA$, the surface of the callus became compact and greenish, and many adventitious buds were formed over the entire area of the callus surface. When comparing BA concentration via histological observation, the section which had been treated with $22.20{\mu}M\;BA$ exhibited closer cell aggregation than those with $8.88{\mu}M\;BA$. The darkness treatment enhanced the formation of adventitious shoots for up to 3 weeks. The youngest two expanding leaves, proximal to the shoot apex, were proved to be the most regenerative, and yielded the highest shoot number per regenerating leaf. A fourth strength MS medium, which was supplemented with $0.54{\mu}M\;NAA$, yielded good quality plantlets, with regard to root number and root length.
Allium hookeri L. (Alliaceae family) is an important ethnomedicinal plant native to the Himalayan region of Asia. The aim of this research was to establish a high-frequency plant regeneration system for in vitro propagation of A. hookeri. Among the tissue types examined, receptacle explants derived from immature flower buds showed the highest regeneration rate of shoots ($93.33{\pm}4.63%$), roots ($76.67{\pm}7.85%$), and calli ($80.00{\pm}7.43%$) when cultured on Gamborg B5 (B5) medium containing $10{\mu}M$ 6-benzylaminopurine (BA) + $1{\mu}M$ naphthalene acetic acid (NAA), $0.5{\mu}M$ BA + $5{\mu}M$ NAA, and $1{\mu}M$ BA + $10{\mu}M$ NAA, respectively. Shoot multiplication was superior when cultured in liquid rather than on solid medium and relatively high concentrations of BA, ranging from 5 to $10{\mu}M$. Efficient bulblet formation following root induction from shoot clumps was achieved with culture in liquid B5 medium containing 7% (w/v) sucrose. Regenerated bulblets were successfully acclimatized to ex vitro conditions with a greater than 95% survival rate. By this method, a maximum of 62 plantlets per receptacle could be propagated within 9 weeks of initial culture. The in vitro propagation system established in this study will promote A. hookeri biotechnology, including large-scale production of healthy and aseptic clones, preserving parental genotypes with desirable traits, and genetic manipulation to enhance medicinal value.
A protocol is described for rapid multiplication of Zanthoxylum piperitum DC. (Rutaceae), an important aromatic and medicinal plant, through shoot-tip explant cultures. Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with various concentrations of N-6-benzyladenine (BA), N-6-benzylaminopurine (BAP) and thidiazuron (TDZ), in single or in combination with ${\alpha}-naphthaleneacetic$ acid (NAA), was used to determine the rate of shoot proliferation. N-6-benzyladenine (BA) used at 0.5mg/l, was the most effective in initiating multiple shoot proliferation at the rate of 23 microshoots per shoot-tip explants after 40 days of culture. Shoot multiplication increased 1.2-fold in each successive subculture. Induction of rooting (98%) was achieved by transferring the shoots to the same basal medium containing 2 mg/l indole-3-butyric acid (IBA). Plantlets went through a hardening phase in a controlled growth chamber, prior to in vivo transfer. These results represented that possible application for the mass production of plantlets through in vitro culture system of Zanthoxylum piperitum DC.
The effects of various plant growth regulators, both auxins and cytokinins, on cell growth and berberine production were investigated in cell suspension cultures of Thafictrum rugosum. Indole-%-acetic acid (IAA) was found to be the best for berberine production among five examined plant growth regulators and the optimum concentration of IAA was 1 $\mu \textrm M$. The enhancement compared to control 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid (2, 4-D) was more than 60%. Simultaneous addition of cytokinins such as kinetin and 6-benzylamiroyurine (BA) was inhibitory.
Kim, Jin-Ho;Oh, Hye Jin;Kim, Su Hyun;Kim, Sang Yong;Suh, Gang Uk
Korean Journal of Plant Resources
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v.34
no.2
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pp.166-171
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2021
This research was conducted to investigate the effect of foliar application of 6-benzylaminopurine (BA), sprayed weeks after pinching (SWP), on ornamental usage of Veronica longifolia L, which is native to Korea. Foliar application of 0, 500, 1,000, and 2,000 mg/L BA on 10 cm long V. longifolia L. plant was evaluated at 0, 7, and 14 days after pinching for growth and flowering. The maximum result of multiple shooting was seen in the 2,000 mg/L BA at 1 week after pinching, and almost all the treatments showed dwarf growth in V. longifolia L. The number of days to flowering was delayed by BA treatments. Moreover, the length and the number of flowers decreased with high concentrations of BA. Thus, foliar application of BA via pinching technique can improve the ornamental usage of V. longifolia L. by controlling the plant type.
When bougainvilleas are subjected to indoor low-light conditions, flower bracts regularly abscise. This study elucidates the effects of plant growth regulators on bract longevity of potted bougainvillea. Potted 'Taipei Red' bougainvillea in four different bract development stages were treated with 1-MCP (1-methylcyclopropene), NAA (1-naphthaleneacetic acid), SNA (sodium salt of naphthaleneacetic acid), IBA (indolebutyric acid), BA (6-benzylaminopurine), $KH_2PO_4$ (potassium dihydrogen phosphate), Put (diamine putrescine), SA (salicylic acid), or STS (silver thiosulfate) and were moved to indoor low-light conditions after treatments. Experimental results indicate that 1-MCP, NAA, SNA, BA, Put, and SA prolonged bract longevity, and this effect increased as bract stage increased. The effect of STS was significant in early bract stages and decreased as bract stages increased. Additionally, 1-MCP, NAA, SNA, BA, Put, SA, and STS treatment significantly reduced endogenous ACC (1-aminocyclopropene-1-carboxylate) content and ACC oxidase activity, suggesting that the inhibition of ethylene production was achieved via physiological metabolism. However, treatment with IBA or $KH_2PO_4$ had no effect on the bract longevity at any stage. In the combined chemical treatments, NAA + STS or NAA + SA were effectively for prolonging bract longevity and contained less protein or chlorophyll degradation, decrease ACC oxidase or ethylene production than the control. In conclusion, we propose that combined chemical treatment significantly prolonged the bract longevity and more effectively than single chemical treatment at any stage.
To establish in vitro nodal culture conditions of Echinosophora koreensis Nakai, one of rare and endangered species famous for beautiful flowers in the Korean Peninsula, the influence of plant growth regulators (PGRs) on shooting and rooting from in vitro shoots was investigated. In shoot multiplication, addition of 6-benzylaminopurine (BA) to the half-strength Driver and Kuniyuki's media in the range of 2.22 to 8.88 ${\mu}M $induced 2.5 to 2.7 shoots per axillary bud; and addition of 2.27 ${\mu}M $ thidiazuron (TDZ) produced 3.2 shoots, during 4 weeks of culture, while zeatin and isopentenyl adenine (2ip) were not effective on shoot multiplication as observed from several combination treatments of BA with other PGRs. Shoots established were smaller than 2 cm in length, in most of the treatments. while in BA 8.88 ${\mu}M $ treatment more than 30% of shoots were longer than 2 cm and shorter than 4 cm. In rooting, naphthalene acetic acid (NAA) from 5.37 to 21.48 ${\mu}M $ showed the rooting rate from 40.0 to 62.5%. Indole butyric acid (IBA) addition had little effect on rooting (<10%), although some roots in IBA-containing media were longer than those in NAA. Micropropagation from axillary buds of nodular explants was applicable and promising to multiplication and conservation of Echinosophora koreensis Nakai.
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