본 연구는 웅성 기니픽에 있어 2,3,7,8-tetrachlorod-ibenzolp-dioxin(TCDD)-유도 급성독성에 대한 홍삼의 방어효과를 병리조직학적 관찰을 통하여 밝히고저 수행되었다. 40마리의 기니픽($200{\pm}20g$)은 목적에 따라 4군으로 나누었다. 즉, 시험군 1에 대하여는 TCDD의 운반체(미량의 DMSO와 소량의 아세톤을 함유한 대두유)와 생리식염수를, 시험군 2에 대하여는 TCDD와 생리식염수를 복강 주사하였다. 시험군 3(TCDD투여 7일전부터 14일간 투여)과 4(동시투여군, 7일간)에 대하여는 홍삼 물추출물(KRG-WE)을 200mg/kg b.w./day 용량으로 복강주사 하였다. 한편, TCDD($5{\mu}g/kg$ b.w.)는 1회 복강주사 함으로서 급성독성을 유도하였다. 시험군 2에서는 장기의 무게가 현저히 감소하였으며, 특히 간(p<0.05)과 고환(p<0.05), 신장, 비장 및 폐의 무게는 시험군 1 비하여 유의하게 낮았다. 흥선은 심하게 위축되어 있어 지방조직과 구별하기 어려웠다. 폐조직에 있어서는 간질의 미만성화와 섬유아세포의 출현, 간세포의 펭윤, 비장세포에 있어서는 헤모시더린에 침착된 대식세포의 수적 증가, 고환의 정세관에서는 정자 생성 저하 및 세포의 변성이 관찰되었으며, 신장조직에 있어서도 심한 병변이 관찰되었다. 반면, 홍삼 물추출물의 전 혹은 동시 투여군에 있어서는 TCDD-단독 투여군에서 관찰되었던 병리조직학적 소견이 현저히 개선되었다. 특히, TCDD-투여로 야기되는 고환의 위축은 유의하게 억제된다는 사실을 알았다(p<0.01). 이상의 결과는 홍삼 물추출물이 TCDD투여로 야기되는 장기의 조직 손상을 현저히 방어한다는 사실을 시사한다 하겠다.
2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD) a prototype of the highly toxid halogenated arylhydrocarbons, bioaccumulates in the food chain and induces a complex spectrum of pathological responses. However, its effect on the nerve system is relatively not well studied. In this study we evaluated TCDDs cytotoxicity on the cortical cell and investigated its effect on the expression 2,3-cyclic nucleotide 3-phosphodiesterase(CNPase), a marker for oilgodendrocytes, The survival rates of 4 DIV cortical cells, that are dissociated from E18 rat cortex and maintained in the presence of TCDD, were 88.8, 83.6, 78.5, and 78.6%(5,10, 20 and 50 nM, respectively) where the reduction in 20 and 50mM TCDD were statistically very significant(p<0.01). Imunocytochemistry of cultured cells revealed that the intensities of immunostaining with an anti-CNP1&2 antibody depended on the concentrations of the toxin. Immunoblot analysis also showed differential expression of CNP1 and CNP2 in the presence of TCDD; the CNP1 expression was dose-dependently decreased. Interestingly, the expression of CNP2 in the presence if TDCC; the CNP1 expression was dose-dependently decreased. Interestingly, the expression of CNP2 fluctuated with the TCDD concentration. These results indicated that CNP1 and 2 are differentially regulated by TCDD, implying the functions of oligodendrocytes are modulated by the toxin.
본 연구는 TCDD로 급성독성을 유도한 자정 기니픽의 대퇴골 무게감소에 대한 홍삼사포닌의 효과를 조사하기 위해 수행하였다. 48 마리의 자성기니픽 ($820{\pm}25\;g$)을 6 군으로 나누어 정상군 (NC), TCDD 단독투여군 (TT), 사포닌 전투여 군 (PE10, 20), 사포닌후투여군 (CE10, 20)으로 나누었다. NC군은 vehicle과 saline 만을 투여하였고, TT군은 TCDD를 단회투여 ($5.0\;{\mu}g$, i.p) 하였다. PE10 및 20군은 TCDD 투여 1 주일 전부터 총 3 주동안 사포닌을 투여 (복강) 하였다. 반면 CE10 및 20군은 TCDD 투여한 직후부터 총 3 주동안 사포닌을 투여 (복강) 하였다. 사포닌 투여군의 체중변화를 살펴보면 TT군은 TCDD 투여후 유의적인 체중감소 현상이 관찰되었으나 PE10, 20 및 CE10, 20 등 사포닌 투여군에서는 TT군에 비해 체중이 모두 증가하는 경향을 보였다 . TCDD 투여는 지정기니픽의 대퇴골 무게를 유의적으로 감소시키는 반면 홍삼사포닌의 투여는 대퇴골 무게감소를 억제하는 경향을 보였다. 대퇴골 무게감소 억제현상은 PE20군에서 가장 높게 나타났다. 대퇴골의 $Ca^{2+}$도 TT군은 NC군 대비 약 20.4% 감소하는데 반해 사포닌 투여군은 TT군 대비 $Ca^{2+}$ 함량이 증가되는 경향을 나타내었다. 이러한 결과로부터 홍삼사포닌은 TCDD에 의해 억제된 기니픽의 대퇴골 내 $Ca^{2+}$ 함량을 증가시킴으로써 대퇴골의 무게감소를 회복시키는 것으로 추론할 수 있겠다.
Dioxins, especially 2, 3, 7, 8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD or dioxin), are ubiquitous environmental contaminants. TCDD is known that it has toxic effects in animals and humans, including chloracne, immune, reproductive and developmental toxicities, carcinogenicity, wasting syndrome and death. TCDD induces a broad spectrum of biological responses, including disruption of normal hormone signaling pathways, reproductive and developmental defects, immunotoxicity, liver damage, wasting syndrome and cancer. Many researches showed that TCDD induces gene expression of transcriptional factors related cell proliferation, signal transduction, immune system and cell cycle arrest at molecular and cellular levels. These toxic actions of TCDD are usually mediated with AhR (receptor, resulted from cell culture, animal and clinical studies). cDNA microarray can be used as a highly sensitive and informative marker for toxicity. Additionally, microarray analysis of dioxin-toxicity is able to provide an opportunity for the development of candidate bridging biomarkers of dioxin-toxicity. Through microarray technology, it is possible to understand the therapeutic effects of agonists within the context of toxic effects, classify new chemicals as to their complete effects on biological systems, and identify environmental factors that may influence safety.
Dioxin represents a group of halogenated aromatic hydrocarbons of which 2,3,7,8-tetrachlorod-ibenzo-p-dioxin (TCDD) is well known for its extremely toxic properties as well as ubiquitous presence in our environment and ecosystems. In order to better assess the carcinogenic mechanism of dioxin, we should utilize the reliable biomarkers that can precisely and correctly reflect multi-stage carcinogenesis. When MCF10A cells were exposed to TCDD (10 nM), expression of both CYP1A1 and CYP1B1 was induced in a time-related manner. The expression as well as activity of ornithine decarboxylase was transiently induced by TCDD treatment. In contrast, the induction of COX-2 that is implicated in carcinogenesis as well as inflammation, was not induced by TCDD. In another study, gap-junctional intercellular communication (GJIC) was attenuated by TCDD treatment as revealed by the dye-transfer assay. Based on these findings, TCDD has both tumor initiating and promoting potential in human breast epithelial cells in culture. Also, treatment of MCF10A cells with the carcinogen 7,12-dimethylbenz[a]anthracene plus TCDD resulted in malignant cell transformation as revealed by increased anchorage-independent growth of exposed cells. Additional studies may be necessary to assess the effects of TCDD on multi-stage carcinogenesis in vivo.
본 연구의 목적은 TCDD로 인해 발생하는 산화적 스트레스에 대한 GYB의 내분비 기능 및 항산화 효능에 미치는 영향을 평가하기 위한 것이다. 2017년도에, 산화적 스트레스에 대한 GYB의 효능을 평가하기 위해 35마리의 수컷 SD랫드를 5개의 그룹으로 나누어 실험하였다. 정상 대조군은 vehicle 및 saline을 투여하였으며, TCDD 단독투여그룹은 TCDD(2 ㎍/kg, weeks) 및 생리식염수를 복강 내 투여하였으며, 시험 군은 6주 동안 GYB (75, 150, 300 mg/kg)를 3가지 농도로 나누어 경구로 투여하였다. 체중은 NC 그룹의 랫드와 비교하였을 때 TCDD 노출 후 6주 후에 유의하게 감소하였다(p<0.001). 그러나 TCDD에 의한 체중 감소는 GYB 300 mg/kg 투여에 의해 현저하게 보호되었다(p<0.01). TCDD로 유도된 랫드의 간은 세포질의 공포 변성이 나타났으며, 간의 동양 혈관과 중량의 증가를 나타냈다. MDA, SOD를 측정한 결과, TCDD 투여에 의하여 두 항목 모두 감소하는 경향이 나타났다. 반면, GYB 투여에 의한 변화는 나타나지 않았고, SOD 결과에서 GYB 300군에서 NC군 대비 유의성이 관찰(p<0.05) 되었다. 이러한 발견은 GYB가 랫드에서 TCDD 유도 간 독성에 대해 보호 효과를 가질 수 있음을 증명하였다.
Jaehong Suh;Jeon, Young-Jin;Kim, Hwan-Mook;Norbert E. Kaminski;Yang, Kyu-Hwan
한국독성학회:학술대회논문집
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한국독성학회 2001년도 International Symposium on Signal transduction in Toxicology
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pp.125-125
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2001
B cell has been identified as the sensitive cellular target responsible for 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD) -induced immune suppression. In isolated cell systems, the differentiation of B cells into antibody secreting plasma cells is believed to be inhibited by TCDD. We also have previously demonstrated IgM secretion was suppressed by TCDD in LPS-activated murine B cell line, CH12.LX.(omitted)
Objectives: The aim of this study was to examine the levels of serum 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD) and evaluate their association with age, body mass index, smoking, military record-based variables, and estimated exposure to Agent Orange in Korean Vietnam veterans. Methods: Serum levels of TCDD were analyzed in 102 Vietnam veterans. Information on age, body mass index, and smoking status were obtained from a self-reported questionnaire. The perceived exposure was assessed by a 6-item questionnaire. Two proximitybased exposures were constructed by division/brigade level and battalion/company level unit information using the Stellman exposure opportunity index model. Results: The mean and median of serum TCDD levels was 1.2 parts per trillion (ppt) and 0.9 ppt, respectively. Only 2 Vietnam veterans had elevated levels of TCDD (>10 ppt). The levels of TCDD did not tend to increase with the likelihood of exposure to Agent Orange, as estimated from either proximity-based exposure or perceived self-reported exposure. The serum TCDD levels were not significantly different according to military unit, year of first deployment, duration of deployment, military rank, age, body mass index, and smoking status. Conclusions: The average serum TCDD levels in the Korean Vietnam veterans were lower than those reported for other occupationally or environmentally exposed groups and US Vietnam veterans, and their use as an objective marker of Agent Orange exposure may have some limitations. The unit of deployment, duration of deployment, year of first deployment, military rank, perceived self-reported exposure, and proximity-based exposure to Agent Orange were not associated with TCDD levels in Korean Vietnam veterans. Age, body mass index and smoking also were not associated with TCDD levels.
2,3,7,8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD), a prototype of many halogenated aromatic hydrocarbons, is a ubiquitous, persistent environmental contaminant and displays high toxicity in animals and has been implicated in human carcinogenesis. Although the mechanism of carcinogenesis by TCDD is unclear, it is considered to be a non-genotoxic and tumor promoter. In this study, we investigated the tumor promotion effect of TCDD on the two-stage skin chemical carcinogenesis using hairless mouse (SKH1). We induced papillomas after treatment with N-methyl -N'-nitro-N-nitorsoguanidine (MNNG) as a initiator and TCDD as a promoter for 30 weeks. We found that the incidence or multiplicity of papillomas and hyperplastic nodules was maximally induced at MNNG-TCDD group compare to control, MNNG, and TCDD alone. These results suggesting that TCDD can acts as a potent promoter in the hairless mouse skin. In addition, we used cDNA microarray to detect the differential gene expression in normal, tumor surrounding, and tumor regions induced in hairless mouse skin by MNNG plus TCDD protocol. We found that 49 and 42 genes out of 5,592 genes associated with protein synthesis, cell organization, lipid transport and oxidative stress in tumor and surrounding regions were up- or down- regulated two fold or more, respectively. We are currently investigating how these genes play a role in TCDD-mediated chemical carcinogenesis.
다이옥신계 TCDD에 노출된 흰쥐의 지질대사, 및 간 독성물질대사에 있어서 녹차의 방어효과를 알아보고자 Sprague-Dawley rat(수컷, 6주령)를 이용하여 녹차는 건분으로 1%, 3% 첨가식이를 공급하고 TCDD는 실험 초에 복강내 주입하여 3주간 실험하였다. 사육 종료후 혈액조성과 혈청, 간 및 변의 지질을 분석하고 간 조직에서 항산화 효소 활성도와 간 독성물질대사 관련효소의 활성도를 측정하였다. 체중증가와 식이섭취량이 TCDD투여군 모두에서 감소하였다. 간과 뇌 및 고환의 중량은 TCDD투여군에서 모두 유의적으로 증가하였는데 흉선의 무게는 TCDD투여군 모두에서 대조군의 1/3 정도로 현저하게 감소하였고 녹차에 의한 효과는 보이지 않았다. 혈액성분에서 적혈구, 백혈구의 수와 헤모글로빈, 헤마토크리트의 값은 군 간에 유의적인 차이가 없었다. 혈소판의 수와 lymphocyte%가 TCDD투여에 의해 저하되었다가 녹차 3% 첨가군에서 증가되어 개선되는 경향을 보였다. neutrophill%는 TCDD투여에 의해 상승했다가 녹차 첨가에 의해 저하되는 경향이었다. 간 기능 지표가 되는 효소인 혈청 GOT와 ALP활성도에서는 TCDD투여에 의한 상승을 녹차첨가에 의해 저하시켜 개선되었다. 혈청 총콜레스테롤과 HDL-, LDL-콜레스테롤함량은 모두 대조군보다 TCDD 투여군에서 모두 높은 경향을 보였으며 녹차의 콜레스테롤 저하효과는 나타나지 않았다. 혈청 triglyceride는 녹차 첨가식이에 의해 저하되는 경향을 보였다. 간의 콜레스테롤 및 triglyceride 함량은 TCDD투여에 의해 2배정도의 상승을 보였는데 녹차 3%첨가에 의해 억제작용이 나타났다. 변의 총 배설량과 총지질, 총콜레스테롤의 배설량이 녹차 첨가에 의해 현저하게 많았으며 특히 콜레스테롤 배설이 녹차 3% 첨가식이에 의해 유의적으로 증가하였다. 따라서 녹차의 성분이 지질흡수를 저하시키고 배설을 촉진하는 작용이 확인되었다. 항산화효소인 SOD의 활성도가 다른 군보다 녹차 3% 첨가 식이군에서 유의적으로 높아 녹차의 항산화성이 높은 것으로 나타났으며 간의 독성물질대사 효소활성도에서 TCDD투여에 의한 NADPH cytochrome p-450 reductase의 상승을 녹차 3%첨가 식이에 의해, 그리고 cytochrome p-450 의존성 monooxigenase인 BPND는 TCDD투여에 의한 상승을 녹차 1% 첨가식이에 의해 유의적으로 감소시켰다. 이상의 결과에서 녹차가 TCDD투여에 의한 간지질의 축적을 억제시키고 변으로 지질배설량을 증가시켰으며 간 기능에 관련된 효소활성도를 정상화시키는 경향이 있었고 항산화효소인 SOD 활성도를 상승시켜 항산화성을 높이는 것이 확인되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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