The inefficiency of in vivo gene transfer using currently available vectors reflects a major hurdle in cancer gene therapy. Both viral and non-viral approaches that improve gene transfer efficiency have been described, but suffer from a number of limitations. Herein, a fiber-modified adenovirus, carrying the small peptide ligand on the capsid, was tested for the delivery of a transgene to cancer cells. The fiber-modified adenovirus was able to mediate the entry and expression of a $\beta$-galactosidase into cancer cells with increased efficiency compared to the unmodified adenovirus. Particularly, the gene transfer efficiency was improved up to 5 times in OVCAR3 cells, an ovarian cancer cell line. Such transduction systems hold promise for delivering genes to transferrin receptor overexpressing cancer cells, and could be used for future cancer gene therapy.
Lee , Jeong Ho;Hong , Su Hee;Kim , Han Woo;Kim , Young Ok;Kim, Kyung Kil
Journal of fish pathology
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v.16
no.2
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pp.69-73
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2003
In this study, GFP reporter gene was transfected into a fibroblast cell line RTG-2 using a polycationic transfection reagent (Superfect) and showed a successful expression of GFP. The transfection efficiency by Superfect was compared to the commonly used transfection method, i.e. DNA-calcium phosphate coprecipitatlon. Transfection by Superfect was more effective than calcium phosphate coprecipltation method (frequency of cell expressing orr was 11.3% and 3.5%, respectively). The optimal expression of GFP and {\beta}-galactosidase was observed when $5-6\;{\mu}{\ell}$ of Superfect per ${\mu}g$ DNA was used for transfcction, 1:5-6 ratio between DNA(${\mu}g$) and Superfect ($\mu\ell$).
Vita, Carolina Elena;Esquivel, Juan Carlos Contreras;Voget, Claudio Enrique
Food Science and Biotechnology
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v.18
no.6
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pp.1365-1370
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2009
Aspergillus kawachii extracellular pectinases were screened in liquid cultures with different carbon sources. The fungus grown on citrus pectin or lemon pomace produced at least one of these inducible pectinases: acidic polygalacturonase, pectin lyase, pectin methylesterase, $\alpha$-L-arabinofuranosidase, $\alpha$-1,5-endoarabinase, $\beta$-D-galactosidase/exogalactanase, and $\beta$-1,4-endogalactanase. The lemon-pomace filtrates also contained significant $\alpha$-L-rhamnosidase and $\beta$-D-fucosidase activities. Most of the screened pectinases were active at pH 2.0-2.5, indicating that the A. kawachii enzymes were acidophilic. Under the culture conditions employed we could not detect enzymatic degradation of soybean rhamnogalacturonan. The A. kawachii pectinase-production-related regulatory phenomena of induction-repression resemble those described for other Aspergillus sp.
This study was performed to report the outbreaks of canine intestinal spirochetosis and to characterize the canine isolates. Three canine isolates were weakly beta-hemolytic and had sharp end shape with 5 flagella. Isolates didn't produce indole but fermented fructose. In $API-ZYM^{(R)}$ study, isolates were alpha-glucosidase negative and alpha-galactosidase positive, which is the typical characteristics of B. pilosicoli. In multilocus enzyme electrophoresis(MEE) study, isolates were divided into 2 electrophoretic types. Isolates showed different properties with B. hyodysenteriae but closely related with pathogenic canine intestinal spirochete(B. pilosicoli). This is the first report of the isolation and characterization of canine intestinal spirochete in Korean dogs.
Lactobacillus plantarum FH185 was isolated from the feces of healthy adults. In our previous study, L. plantarum FH185 was demonstrated that it has anti-obesity effect in the in vitro and in vivo test. In order to determine its potential for use as a probiotic, we investigated the physiological characteristics of L. plantarum FH185. The optimum growth temperature of L. plantarum FH185 was 40℃. L. plantarum FH185 showed higher sensitivity to novobiocin in a comparison of fifteen different antibiotics and showed higher resistance to polymyxin B and vancomycin. It also showed higher β-galactosidase and N-acetyl-β-glucosaminidase activities. Moreover, it was comparatively tolerant to bile juice and acid, and inhibited the growths of Salmonella Typhimurium and Staphylococcus aureus with rates of 44.76% and 53.88%, respectively. It also showed high adhesion activity to HT-29 cells compared to L. rhamnosus GG.
A simple and low-cost medium was developed for the growth of Bifidobacterium longum KFRI 977. Of three bifidobacterial strains, B. longum KFRI 977 (ATCC 15707) showed the best growth in MRSC broth containing 0.3% oxgall, grew well in partially anaerobic condition, exhibited highest $\beta$-galactosidase activity, and was inhibitory against Clostridium perfringens KFRI 434. Of three developed media, the population of B. longum KFRI 977 was highest (1.9$\times$$10^9$/ml) in ISP based medium. The composition of ISP based medium is ISP (5%), glucose (1%), L-cysteine HCI (0.05%), Trypticase peptone (0.5%), yeast extract (0.5%), $MgSO_4$ (0.05%), Tween-80 (0.1%), and phosphate buffer (pH 7.0). Hydrolysis of ISP by Protease A was unnecessary, and the use of phosphate buffer (pH 7.0) prevented the formation of protein precipitate. Associative culture of B. longum KFRI 977 with Lactobacillus acidophilus KFRI 233 was proven to be deleterous to the growth of B. longum KFRI 977.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.27
no.2
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pp.244-251
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1998
To understand the effect of supplement of water extract of pine needle(WEPN) on shelf-life enhancement of the kimchi, activities of four enzymes and number of lactic acid bacteria, during fermentation of the kimchi, were assayed. Enzyme activities of kimchi fermented for 7 days with supplement by 2% water extract of pine needle showed amylase of 86.4%, protease of 85.8%, polygalacturonase of 61.5% and $\beta$-galactosidase of 58.8% against the control kimchi. WEPN showed weak inhibitory effect when it was applied to the isolated enzymes in vitro then those menifested by the kimchi in vivo. Number of total bacterial cell of WEPN supplemented kimchi increased by 10 folds than control between 7 to 14 days of fermentation. On contrast, number of lactic acid bacteria decreased maximaly to 21% of control by fermentation. The clear zone formed on paper disk by WEPN against L. plantarum was larger than that of Leu. mesenteroides.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.28
no.2
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pp.371-377
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1999
In order to evaluate the antimicrobial function of natural herb extracts as antimicrobial agent or packaging material for the preservation of foods and greenhouse produce, the water extract of chopi (Zanthoxylum piperitum DC.) was prepared and its antimicobial activity was determined. In the paper disk test its antimicrobial activity was increased in proportion to its concentraion. The growth of microorganisms was completely inhibited above 500ppm of its concentration. It showed wide spectrum of thermal(40 to 180oC) and pH(4 to 10) stabilities. In the electronic microscopic observation(TEM and SEM) of microbial morphological change it showed to decrease the activation of physiological enzymes and to lose the function of cell membranes. Even in the activation test of galactosidase, it seemed to weaken the osmotic function of cell membranes remarkably in comparison with chloroform and its activation corresponded to 40~50% of toluene. Zanthoxylum piperitum DC. extract seemed to be an excellent antimicrobial for the inhibition of food borne microorganisms as well as the pre servation of greenhouse produces.
This study was undertaken to examine the effect of salting in 10% salt solution added 2% calcium chloride on the kimchi fermentation. The addition of calcium chloride extended edible periods of the Kimchi to 4~5 days and increased relatively the hardness of Chinese Cabbage. In the addition of calcium chloride, the activities of amylase and $\beta$ -galactosidase were not high during all periods fermentation. Polygalacturonase and protease activities were low 2~21%, 2~26% all periods fermentation, respectively. There were significant correlations between the delay of ripeness and decreasing enzyme activation. The amount of free amino acid by the treatment with calcium chloride was decreased of 10~16% at the late of fermentation than that of control. the treatment with calcium chloride of the Kimchi was increased hardness, but decreased cohesiveness and gumminess was during all periods fermentation. the adhesiveness was increased at the early of fermentation but decreased at the late of fermentation.
The reporter plasmid pMT-lacZ containing the metallothionein (MT) promoter region (-320∼+58 with respect to the transcription initiation site) fused to the lacZ gene in a P-element vector was constructed. Transgenic Drosophila bearing the MT-lacZ fusion gene were established by P-element mediated transformation. Expression of the MT-lacZ fusion gene in transformants was examined during development. By treatment with low concentration of cadmium (>1O uM) or paraquat (>50 uM), increased expression of B-galactosidase was shown in fat body, brain lobe, and ganglion transgenic larval tissues. The results show that transformants bearing the MT-lacZ fusion gene are useful for further studies on the mechanism of regulation of MT gene expression and for monitoring toxic metals.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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