양이온성 천연고분자 물질로서 유전자와 효과적으로 복합체를 형성할 수 있는 저분자량 수용성 키토산(LMWSC)에 유전자 발현 효율을 높이기 위해 histidine을 컨쥬게이션 시킨 유전자 전달체를 제조하였다. 히스티딘-LMWSC의 제조는 무수프탈산으로 LMWSC의 아민기를 보호한 후 히스티딘과 결합한 다음 무수프탈산을 제거하는 반응으로 제조하였다. 제조한 유전자 전달체의 물리화학적 특성은 FT-IR과 NMR 스펙트럼을 통하여 확인하였고, 전기영동 결과로부터 본 실험에서 제조된 유전자 전달체와 DNA가 복합체를 형성하였다는 것을 알 수 있었다. 또한 유전자 전달체의 입자크기는 DLS를 이용하여 측정한 결과 히스티딘-LMWSC-DNA 복합체입자의 크기는 100~200 nm임을 확인하였다. 이로부터 히스티딘을 함유하는 LMWSC가 유전자 전달체로서 사용될 수 있음을 확인하였다.
공기를 제거한 상태에서 0.5M HCl과 0.5M $H_2SO_4$ 용액에서 일어나는 니켈의 부식에 대하여 히스티딘 과 메티오닌의 부식억제 효과를 연구하였다. 각 경우에 니켈의 부식은 산화반응 속도가 감소되어 억제되었다. HCl 용액에서 니켈 표면에 일어나는 아미노산의 흡착은 수정된 Langmuir 흡착 등온식을 따르지만, $H_2SO_4$ 용액에서는 흡착된 분자들 간의 상호 작용에 영향을 받아 Temkin의 대수함수 등온식이 잘 적용되었다. HCl 용액에서 흡착되는 히스티딘의 경우만 히스티딘의 {$-NH{_3}{^+}$}, {$-NH^+=$}와 니켈 표면의 {$Ni-Cl^-$}사이의 정전기적 인력에 의해 물리흡착으로, 다른 경우는 Ni의 빈 d-orbital과 히스티딘 또는 메티오닌에 존재하는 비결합 전자쌍 사이에 화학흡착으로 설명할 수 있었다.
세균을 이용한 복귀돌연변이 시험계는 Salmonella typhimurium 히스티딘 요구성 변이주를 이용하여 염기대치환(base change)의 돌연변이를 검출하는 S. typhimurium TA100, TA1535와 frameshift형의 돌연변이를 검출하는 S. Tphimurium TA98, TA1537로 구성되어 있으며, 화학물질의 변이원성에 의하여 히스티딘 비요구성으로 복귀하는 돌연변이를 검토하는 시험계로 널리 이용되고 있다. 시험결과, Yellow pigment는 S. typhimurium에 대한 독성도 나타나지 않았으며, 배지 1$m\ell$당 200$\mu\textrm{g}$ 이하의 모든 농도에서 S-9 Mix(대사활성계)의 유무에 관계없이 S. typhimurium 모든 변이주에서 히스티딘 요구성에 대한 복귀돌연변이를 유발하지 않는 물질로 판단되었다. 이상의 결과로부터 치자황색색소는 S. typhimurium을 이용한 복귀돌연변이 시험에서 유전독성이 없는 물질로 사료되었다.
갑상선 호르몬이 10-formyltetrahydrofolate dehydrogenase에 미치는 영향을 흰 쥐의 간을 이용하여 조사 하였다. 흰 쥐에게 갑상선 호르몬의 형성을 저지하는 thiouracil을 먹였을 때 히스티딘의 산화속도가 5배 증가 되었으며, 10-formyltetrahydrofolate dehydrogenase의 활성도가 142%로 증가 되었고, 또한 methylenetetrahydrofolate reductase의 활성도는 정상 쥐의 32% 수준으로 저하되었다. thyroid powder를 먹여 갑상선 기능이 항진된 상태에서는 이와 반대 경향을 보였다. 갑상선의 기능이 저하되었을 때 히스티딘의 산화속도가 상승되는 것은 methylenetretrahydrofolate reductase의 활성도의 감소로 인해, folate를 필요로 하는 반응에서 주로 이용되는 non-methyl folate의 비율이 증가되었기 때문이며, 10-formyltetrahydrofolate dehydrogenase의 활성도의 상승으로 인해 히스티딘의 산화속도는 더욱 증가한 것으로 보인다.
코발트의 부식에 대한 시스테인(Cys), 메티오닌(Met), 히스티딘(His)의 부식억제 효과를 공기를 제거한 0.5 M HCl과 0.5 M $H_2SO_4$ 용액에서 연구하였다. 코발트에 대한 아미노산의 부식 억제효과는 혼합 부식억제 방식에 의하여 나타나지만, $H_2SO_4$ 용액에서는 산화반응 속도의 감소가 그리고 HCl 용액에서는 환원반응 속도의 감소가 더 큰 영향을 미쳤다. 코발트 표면에서 일어나는 아미노산의 흡착은 수정된 Langmuir 흡착 등온식을 따르며 HCl, $H_2SO_4$ 용액에서 흡착되는 히스티딘은 히스티딘의 {$-NH_3{^+}$}, {$-NH^+=$}와 코발트 표면의 {$Co-Cl^{-{\delta}}$}와의 정전기적 인력에 의한 물리흡착으로, 다른 경우는 Co의 빈 d-orbital과 시스테인 또는 메티오닌에 존재하는 S의 비공유 전자쌍 사이에서 일어나는 화학흡착으로 설명할 수 있었다.
이 연구에서는 6개의 히스티딘이 첨부된 파지 K11 라이소자임의 제조 분리 및 특성을 알아보고자 하였다. 첨부된 히스티딘에 의한 이 효소의 활성도의 변화는 없었으며, 효소 활성의 최적 pH는 7.2-7.4 이었다. 여러 다른 종류의 양이온 존재하의 활성도를 측정한 결과 칼슘과 마그네슘 이온에 의해 효소 활성이 완전히 억제되었으나, 아연이나 나트륨 이온은 효소의 활성도를 이 이온들이 없을 때와 같은 정도로 유지하였다. 단지 100 mM 이상의 아연 이온 농도에서 K11 라이소자임 효소 활성도를 완전히 억제하였다.
적색육어류의 히스타만생성에 미치는 첨가물의 영향을 검토하기 위하여 고등어를 시료로 하여 이에 glucose, sucrose, glycine 및 sorbic acid 등을 첨가하여 저장하여 두고 저장기간에 따른 히스타민함량 및. 히스티딘탈탄산효소활성의 변화를 측정하였으며, 아울러 시료육의 성상이 히스타민생성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 시료육의 역쇄정도를 달리 하였을 때의 히스타민함량의 변화를 비교, 검토하였다. 1. 균질화한 시료육에 glucose, sucrose 및 glycine을 각각 $5\%$ 및 $10\%$ 첨가하여 $25^{\circ}C$에 저장하였을 때 glucose 및 sucrose를 첨가한 것은 히스타민 생성을 다소 촉진하는 경향을 나타낸 반면, glycine을 첨가한 것은 히스타민생성 및 히스티딘탈탄산효소활성을 크게 억제하는 효과를 나타내어, $10\%$ 첨가한 것은 저장 5일 후에도 히스타민중독한계농도에 달하지 않았다. 2. 마쇄정도가 다른 시료육에 glucose 및 sucrose를 첨가하여 히스타민 생성에 미치는 영향을 조사한 결과 마쇄정도가 큰 것이 히스타민 생성을 촉진하는 경향을 나타내었다. 3. 시료육에 sorbic acid를 $0.1\%$ 및 $0.2\%$ 첨가하였을 때 히스타민 생성 및 히스티딘탈탄산효소활성은 크게 억제되었으며, $0.2\%$ 첨가한 것은 저장 6일째에 히스타민 함량이 최고치(275mg/100g)를 나타내었다.
Phytoextraction은 식물을 이용하여 환경 정화하는 phytoremediation의 일부분으로서 금속으로 오염된 토양을 정화하는 것이다. 토양에 존재하는 금속의 추출을 용이 하기 위해서 현재 다양한 킬레이트가 사용되고 있다. Phytoextraction이 경제적이고 친환경적인 장점이 있지만 고농도로 오염된 지역에서는 적용이 어려운데 이는 식물이 이러한 지역에서 살아남기 어렵기 때문이며 이러한 문제점을 해결하는 것이 본 연구의 목적이다. 연구 대상의 금속으로서 구리를 선택하였고, 킬레이트는 아미노산인 시스테인과 히스티딘, 작은 크기의 유기산으로서 citric acid, malic acid, succinic acid, oxalic acid, 그리고 ethylenediamine (EDA)를 선택하였으며, EDTA는 비교대상으로 본 연구에 사용되었다. 다양한 농도의 구리를 포함하는 배지에 식물을 키우면서 여러 킬레이트가 식물의 뿌리 성장에 미치는 영향을 분석하였다. 시스테인, 히스티딘, 그리고 citric acid은 식물의 성장을 억제하는 구리의 영향을 완화시켜 주었지만 EDA는 오히려 더 강화시켜 주었다. 또한 킬레이트의 식물성장에 대한 영향은 구리의 식물 내 흡수를 억제 또는 촉진에 의한 것이다. 따라서 구리의 식물성장억제를 완화시켜주는 시스테인, 히스티딘, 그리고 citric acid는 고농도의 구리로 오염된 지역에 식물의 성장이 가능하도록 사용될 수 있으며 EDA는 기존의 phytoextraction에 유용하게 사용될 수 있을 것이다.
엽산의 항비타민제인 9-methyl folate가 흰 쥐의 엽산 대사에 미치는 영향을 조사하기 위하여, Sprague-dawley 암컷 쥐를 엽산 결핍식이군, 대조군, x-methyl folate 투여군으로 나누어 실험하였다. 9-methyl folate는 실험동물에게 엽산 결핍증을 유발시키는 x-methyl folate의 성분 가운데 주된 항비타민제이며, 본 실험에서는 식이 1kg당 5g의 x-methyl folate를 첨가하였다. x-methyl folate를 실험동물에게 먹였을 때 히스티딘의 산화속도와 간장내의 엽산 농도가 크게 저하되었으며, $[^{3}H]folate$를 복강에 투여한 후 24시간 내에 간장에 보유되는 엽산의 양도 x-methyl folate 투여군에 있어 유의적인 감소를 보였다. 이 실험 결과에서 9-methyl folate는 흰 쥐에 있어 엽산이 간으로 유입되어 보유되는 과정을 저해하므로써 간장 내의 엽산의 양을 저하시키며, 그 결과 히스티딘의 산화속도도 저하된 것으로 보인다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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