Actinomycetes produce diverse secondary metabolites which have the primary importance in medicine, agriculture and food production, and key to this is their ability to interact with other organisms in natural habitats. In this study, we have investigated the taxonomical and functional diversity of actinomycetes in fecal sample of rhinoceros beetle larvae (Allomyrina dichotoma L.) by using culture-dependent and -independent approaches. For the culture-independent approach, the community DNA was extracted from the sample and 16S rRNA genes of actinomycetes were amplified using actinomycetes-specific PCR primers. Thirty-seven clones were classified into 15 genera and 24 species of actinomycetes. For the culture-dependent approach, 53 strains were isolated from larval feces, of which 27 isolates were selected based on morphological characteristics. The isolates were classified into 4 genera and 14 species, and 24 isolates (89%) were identified as the genus Streptomyces. Many of the representative isolates had antimicrobial activities against plant pathogenic fungi and Gram-positive bacteria. In addition, most of the isolates (78%) showed biochemical properties to hydrolyze cellulose and casein. The results demonstrated that diverse and valuable actinomycetes could be isolated from insect fecal samples, indicating that insect guts can be rich sources for novel bioactive compounds.
To reduce salt content in Korean traditional kochujang, horseradish powder (1.2%, w/w) was added to kochujang with 4-10% salt, and its microbial characteristics, enzyme activities, and gas formation in kochujang were evaluated during fermentation far 120 days at $25^{\circ}C$. All treatments of kochujang had no effects on total viable bacterial numbers, which kept constant level, during fermentation (7.32-8.765 log CFU/g). Yeast numbers did not change under all treatments up to 90 days of fermentation, then decreased thereafter, ${\alpha}$-Amylase and ${\beta}$-amylase, and neutral- and acid-pretense activities of kochujang added with horseradish powder were higher than those of control group. ${\beta}$-Amylase activity of kochujang increased in proportion to salt concentration. Total accumulative volume of gas produced during fermentation of kochujang without horseradish powder was 5,892 mL/pack then decreased to 121-347mL/pack with low-salted kochujang (salt 4%, 6%) added with horseradish powder, Major gas produced was $CO_{2}(74-80%)$. Results indicate salt contents of kochujang could be lowered up to 6% by addition of horseradish powder without gas formation and quality alteration.
Effects of various concentration of skullcap Scutellaria baicalensis in the diets on a nonspecific immunity and a disease resistance of olive flounder were investigated. After feeding trial, weight gain of fish fed 0.05% skullcap immersed group was higher than that of fish fed 0, 0.1 and 1% skullcap diet but no significant differences were observed among the experimental groups. Furthermore, no significant differences in hematological indices of olive flounder were found among the experimental groups. Lysozyme activity in the serum and kidney of the administrated group(0.05% skullcap immersed group) was significantly higher than the control group. In addition, the chemiluminescent(CL) responses of head kidney leucocytes from the 0.05% skullcap immersed group was significantly higher(P<0.05) than the control group. In the histological results, the 1% skullcap immersed group appeared to have the detrimental effects for fish health. In a challenge experiment with Edwardsiella tarda(GY-01) and Streptococcus iniae(FT5228), relative percent survival (RPS) in the 0.05% skullcap immersed group was higher than the control group injected with E. tarda(GY-01) at $4^{th}$ and $8^{th}$ weeks. The results suggest that the skullcap extract (0.05%) would be effective to enhance the nonspecific immunity and protective ability of olive flounder against fish pathogen such as E. tarda.
Sphingomonas sp. KS 301, which was isolated from oil contaminated soil, was shown to have five different SODs (SODI, II, III, IV, V) which can be separated by DEAE-Sepharose chromatography, and SOD III was finally purified in this study by ammonium sulfate precipitation, DEAE-Sepharose chromatography, Superose 12 gel filtration and Uno-Q1 ion exchange chromatography. The molecular weight of SOD III was 23 kDa as determined by SDS-PAGE and the apparent molecular weight of the native enzyme was estimated to be approximately 71 kDa by Superose-12 gel filtration chromatography. These data suggest that the purified SOD consists of at least two subunits. The specific activity of the SOD III was higher than Mn type or Fe type SOD of Escherichia coli by 5 fold. To determine the type of SOD III, inhibitory effects of $NaN_{3},\;H_{2}O_{2},\;KCN$ were examined. 10 mM $NaN_{3}$ was able to inhibit 56% of the SOD III activity, which indicates that this SOD is Mn type. The optimum pH of the SOD III was 7.0 and the optimum temperature was $20^{\circ}C$. N-terminal amino acid sequence of purified SOD III was most similar to those of Psudomonase ovalis and Vibrio cholerae among bacteria.
Boruah, Hari P. Deka;Chauhan, Puneet S.;Yim, Woo-Jong;Han, Gwang-Hyun;Sa, Tong-Min
Korean Journal of Soil Science and Fertilizer
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v.43
no.1
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pp.96-104
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2010
A comparative study was performed in gnotobiotic and greenhouse conditions to evaluate the effect of exogenous application of indole-3-acetic acid (IAA) and inoculation of Methylobacterium spp. possessing 1-aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase (ACCD) and IAA activity on red pepperand tomato seedling growth and development. Application of 1.0 ${\mu}g\;mL^{-1}$ IAA positively influenced root growth while high concentrations (>10.0 ${\mu}g\;mL^{-1}$) suppressed root growth of red pepper and tomato under gnotobiotic condition. On the other hand, inoculation of Methylobacterium strains with ACCD activity and IAA or without IAA enhanced root growth in both plants. Similarly, under greenhouse condition the inoculation of Methylobacterium sp. with ACCD activity and IAA enhanced plant fitness recorded as average nodal length and specific leaf weight (SLW) but the effect is comparable with the application of low concentrations of IAA. Seedling length was significantly increased by Methylobacterium strains while total biomass was enhanced by Methylobacterium spp. and exogenous applications of < 10.0 ${\mu}g\;mL^{-1}$ IAA. High concentrations of IAA retard biomass accumulation in red pepper and tomato. These results confirm that bacterial strains with plant growth promoting characters such as IAA and ACCD have characteristic effects on different aspects of growth of red pepper and tomato seedlings which is comparable or better than exogenous applications of synthetic IAA.
To investigate bacteria with algal Iytic activities against Anabaena cylindrica when water blooming occurs and to study enzyme profiles of alga-Iytic bacteria, various bacterial strains were isolated from surface waters and sediments in eutrophic lakes or reservoirs in Korea. Abacterial strain AK-07 was characterized and identified as Acinetobacter johnsonii based on its16S rDNA base sequence. When AK-07 was co-cultivated with A. cylindrica, bacterial cells propagated to $8\;{\times}\;10^8$ cfu $ml^{-1}$ and Iyses algal cells. However, culture filtrates of AK-07 did not exhibit algal Iytic activities. That suggesting the enzymes on the surfaces of the bacterium might be effective algal Iytic agents to cause Iyses of cells. Acinetobacter johnsonii AK-07 exhibited high degradation activities against A. cylindrica, and formed alginase, caseinase, lipase, fucodian hydrolase, and laminarinase. Moreover, glycosidases for example ${\beta}$-galatosidase, ${\beta}$-glucosidase, ${\beta}$-glucosaminidase, and ${\beta}$-xylosidase, which hydrolyzed ${\beta}$-0-glycosidic bonds, were found in cell-free extracts of A. johnsonii AK-07. Other glycosidase such as ${\alpha}$-galctosidases, ${\alpha}$-N-Ac-galctosidases, ${\alpha}$-mannosidases, and ${\alpha}$- L-fuco-sidases, which cleavage ${\alpha}$-0-glycosidic bondsare not detected. In the results, enzyme systemsof A. johnsonii AK-07 were very complex to do-grade cell walls of cyanobacteria. The polysaccharides or peptidoglycans of A. cylindrica maybe hydrolyzed and metabolized to a range of easily utilizable monosaccharides or other low molecular weight organic substances by strain AK-07 of A. johnsonii.
Hwangryunhaedok-tang (HT) is prescribed in oriental medicine to treat inflammation-related diseases. This study examined the anti-bacterial effect to select the index components of Traditional Chinese Medicine (TCM) HT. The disc diffusion method and minimum inhibition concentrations (MIC) tests were conducted to measure the antibacterial activity of HT. The strains were Staphylococcus aureus ATCC 25923 and Escherichia coli 23724. Berberine and geniposide were selected as the index components of HT and were analyzed quantitatively by high-performance liquid chromatography (HPLC). As a result, the inhibition ring was formed at $11.7{\pm}1.3mm$ and $8.7{\pm}0.7mm$ at HT 20 mg and 10 mg on S.aureus ATCC 25923, respectively; and $8.0{\pm}0.0mm$ at HT 20 mg on E.coli ATCC 23724. The MIC were 31.25 mg/mL in S.aureus ATCC 25923 and 125.0 mg/mL in E.coli ATCC 23724. In quantitative analysis for standardization, HT contained 16.55 mg/g of berberine and 81.85 mg/g of geniposide. Overall, when antibiotics are developed using natural products, they may reduce the side effects and inhibit resistant bacteria. If research on HT continuously proceeds, positive developments are expected to be made in oriental medicine as well as in various other industries.
This study was investigated to observe the effect of Treponema denticola cell sonicates(TDC) and Treponema lecithinolyticum cell sonicates(TLC) on cytokine secretion and matix metalloproteinase-2(MMP-2) activation of cultured human gingival fibroblast. Several experiments were performed including $IL-1{\beta}$, IL-6 ELISA for the effect on the $IL-1{\beta}$, IL-6 secretion of human gingival fibroblast. Also gelatinase zymography and gelatin dissolubility test for the activation of MMP-2 secreted by gingival fibroblast. The results were as follows. 1. The effect of TDC and TLC on IL-6 secretion of human gingival fibroblast showed statistically significant increase of IL-6 secretion in the TDC and TLC treated group compared to no treatment group(p<0.05) . 2. The amount of $IL-1{\beta}$ secretion was below the lower limit and there was no difference in the $IL-1{\beta}$ secretion of gingival fibroblast between TDC, TLC treated group and no treatment group. 3. The active form of pro MMP-2 with 72 kDa molecular weight was activated in both TDC and TLC treated group and clear band was appeared at 62kDa site on the zymography. 4. Gelatin dissolubility of MMP-2 secreted by gingival fibroblast was higher in TDC and TLC treated group compared to no treatment group(p<0.05). 5. In the TDC treated group, serine protease of T. denticola affect gelatin dissolubility. But in the TLC treated group gelatin was degraded by only MMP secreted by gingival fibroblast. Regarding to the above results, TDC and TLC have an effect on the IL-6 secretion increase of human gingival fibroblast and appears to activate pro MMP-2 which degrades collagen.
Sun Nyoung Yu;Ho-Yeon Jeon;Bu Kyung Kim;Ae-Li Kim;Kyung Il Jung;Gye Rok Jeon;Soon Cheol Ahn
Journal of Life Science
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v.34
no.7
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pp.500-508
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2024
Recently, there has been increasing interest in enhancing the indoor air quality, particularly in response to the growing utilization of public facilities. The focus of this study was on assessing the efficacy and safety of an air sterilizer equipped with electrolytic salt catalysts. To that end, we evaluated the antimicrobial activity of the vapor spraying from the air sterilizer and its cytotoxicity in condensed form on human cell lines (HaCaT, BEAS-2B, and THP-1). Against the test organisms, which comprised five bacterial strains (Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium) and one fungal strain (Candida albicans), the air sterilizer exhibited relatively high antimicrobial activities ranging from 10.89 to 73.98% following 1 and 3 hr of vapor spraying, which were notably time-dependent. Importantly, cytotoxicity assessments on human cells indicated no significant harmful effect even at a 1.0% concentration. Comprehensive safety evaluations included morphological observations, gene expression (Bcl-2, Bax) tests, and FACS analysis of intracellular ROS levels. Consistent with previous cytotoxicity findings, these estimates demonstrated no significant changes, highlighting the air sterilizer's safety and antimicrobial activities. In a simulated 20-hr operation within an indoor environment, the air sterilizer not only showed an 89.4% removal of total bacteria but also a 100.0% removal of Escherichia sp. and fungi. This research outlines the potential of the developed electrolytic salt catalyst air sterilizer to effectively remove indoor microbial pollutants without compromising human safety, underscoring the solution that it offers for improving indoor air quality.
Bacterial stain 3Y was isolated from a site that was contaminated with diesel for more than 15 years. The strain could grow on various petroleum using hydrocarbons as the sole carbon source. The strain grew not only on aliphatic hydrocarbons but also on aromatic hydrocarbons. 3Y grew on aliphatic petroleum hydrocarbons hexane or hexadecane, and aromatic petroleum hydrocarbons BTEX, phenol, biphenyl, or phenanthrene. The strain showed aromatic ring dioxygenase and meta-cleavage dioxygenase activities as determined by tests using indole and catechol. Aromatic ring dioxygenase is involved in the initial step of biodegradation of aromatic hydrocarbons while meta-cleavage dioxygenase catalyzes the cleavage of the benzene ring. Based on a nucleotide sequence analysis of its 16S rRNA gene, 3Y belongs to the genus Sphingomonas. A phylogenetic tress was constructed based on the nucleotide sequences of closest relatives of 3Y and petroleum hydrocarbon degrading sphingomonads. 3Y was in a cluster that was different from the cluster that contained well-known sphingomonads. The results of this study suggest that 3Y has the potential to cleanup oil-contaminated sites. Further investigation is warranted to optimize conditions to degrade petroleum hydrocarbons by the strain to develop a better bioremediation strategy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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