본문에서는 현재 주로 사용되고 있는 혈청학적 방법을 주로 소개하고자 한다. HIV 감염의 특성상 헌혈 혈액 등과 같이 많은 시료를 신속하게 검사하여야 하고 또한 검사결과가 개인에게 매우 중요한 의미를 지니므로 HIV에 대한 혈청학적 검사는 일차적으로 민감도가 높은 검색용 검사를 우선 시행하고 이차적으로 특이도가 높은 확인용 검사를 실시하여 판정하는 것을 원칙으로 하고 있다.
뇌낭미충증환자 혈청 및 뇌척수액의 특이 IgG 항체가를 면역효소측정 법으로 측정하였을 때에 이 혈청학적 진단법이 환자진단에 얼마나 유용한지를 평가하였다. 1984년 1월부터 1986년 1월까지 주로 신경학적 중상을 나타낸 환자 355명에서 혈청 및 뇌척수액을 검사하였다. 면역효소측정법에 사용한 항원은 돼지에 자연감염된 유구낭미충의 낭액이며 단백질 농도 $2.5{\mu}g/ml$로 희석하여 사용하였고, 혈청은 1 : 100으로 희석하여, 뇌척수액은 희석하지 않고 반응시켰고 Perozidase-Conjugated Antihuman IgG goat serum(Cappel 회사제품)을 1 : 5,000으로 사용하여 혈청 및 뇌척수액내 유구낭미충 특이 IgG 항체가를 흡광도로 표시하였다. 흡광도 0.18 또는 그 이상을 양성으로 판정하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 대상자 355명중 신경외과 수술 및 병리학적 소견으로 확진된 뇌낭미충증 환자 26명, 피하결절 생검에서 낭미충증을 진단하였고 뇌전산화 단충촬영으로 확진한 환자 24명, 뇌전산화 단층환영으로 확진한 21명등 71명에서 면역효소측정법에 의한 특이 IgG항체가 양성자는 64명으로 민감도는 90.1%이었다. 그 중 혈청의 검사에 의한 민감도는 77.5%, 뇌척수액 검사에 의한 민감도는 83.1%로서 뇌척수액 검사가 더 민감한 소견이었다. 뇌낭미충증으로 확진된 환자중 위음성자는 특이 IgG 항체가가 대단히 낮은 예가 대부분이었다. 2. 대상자 355명중 뇌낭미충중 이외의 질환으로 확진된 환자는 52명으로서 그중 7례는 신경외과 수술 및 병리학적 소견에 근거하여 기타 질환으로 확진된 예이며 45례는 세균학적, 방사선학적 소견등을 근거로 기타 질환으로 확진된 예이었다. 이들 중 뇌낭미충 특이항체 검사에서 음성을 보인 예는 46례로서 이 검사의 특이도는 88.5%이었다. 혈청 및 뇌척수액검사에 의한 특이도는 카각 94.2%이었다. 위 양성반응을 보인 예 중에서 혈청 및 뇌척수액에서 모두 양성인 예는 없었다. 3. 혈청내 특이 IgG 항체 검사에 의한 기타 기생충감염자에서의 교차반응의 정도는 다음과 같았다. 무구조충증 18례중 2례, 스파르가눔증 20례중 2례, 폐흡충증 56례중 1례, 간흡충증 15례중 1례, 간질(간질)증 1례중 1례등이 교차반응을 나타내었다. 뇌척수액내 특이 IgG 함체 검사에 의한 교차반응을 뇌폐흡충증 환자 9례 중에는 없었으나 뇌스파르가눔중 환자 10례중 2례는 교차반응을 보였다. 뇌낭미충증으로 확진된 71례중 폐흡충항원에 대해 교차반응을 보인 예는 없었으나 스파르가눔 항원에 대해서는 혈청으로 검사했을 경우 6례, 뇌척수액의 경우 11례에서 교차반응을 나타내었다. 4. 뇌압상승이 있는 뇌낭미충증환자 예에서 뇌실조영술이나 뇌실복막강 단락술 도중 얻은 측뇌실 뇌척수액으로 낭미충 특이 IgG 항체가를 측정하면 측뇌실에 병변이 있지 않는 한 음성 또는 낮은 양성림위의 홉광도를 보이고 있었다. 5. 포도낭미충증 환자 4례중 혈청검사로는 4례중 3례가, 뇌척수액검사로는 검사한 3례 모두가 양성반응을 보였다. 이상의 결과는 혈청 및 뇌척수액내 특이 IgG 항체를 면역효소 측정 법으로 측정하는 혈청학적 진단법이 뇌낭미충증 환자의 감별진단에 매우 유용함을 보이고 있다.
최근 원전주변지역을 중심으로 한 기형가축이 발생함에 따라 이의 원인을 규명하기 위하여 우선 역학적 조사와 혈청학적 검사 및 기형송아지 , 유산·사산 태아 등의 수집가 검물을 중심으로 하여 병리학적 검사를 실시하였다. 원전주변 기형우 발생농가의 역학적 조사와 모우의 임상적 소견에서는 하동의 이상을 관찰할 수 없었다 . 수집된 가검물 (울진원전주변지역 : 3두, 월성원전주변지역 : 3두, 고리원전주변지역 : 3두, 기타지역 2두) 총 11개 농가 11두에 대한 병리학적 검사와 모우 및 자우의 혈청학적 검사에서 9두가 Akabane 병으로 진단되었고, 나머지 2 두는 곰팡이감염증 1두 그리고 간경화 l 두로 판정되었다. Akabane virus에 감염된 9두는 기형송아지, 유·사산태아로서 사지기형, 척추만곡 및 중추신경계이상(대뇌결손, 뇌수두증)등이 관찰되었다. (중략)
뇌낭미충증의 면역혈청학적 진단에 있어서 간접 형광항체 법의 유용성을 평가하기 위하여 효소연결성 면역홉착 검사와 비교 검토하였다. 검사대상자는 확진된 뇌낭미충증 환자의 혈청 163예, 다른 뇌신경 증상 환자, 조층 및 흡충류 감염자 101예 및 건강인 대조군 100예로서 모두 364예이었다. 간점 형광항체 반응에는 인체 유구낭미충의 낭벽 항원을, 효소연결성 면역흡착 검사에는 낭액 항원을 사용하여 혈청내 특이 IgG 항체를 조사한 결과 두 방법간의 민감도 및 특이도에 큰 차이가 없었으며, 양성 및 음성의 동일한 힐청을 검사하였을 때 낭미충증 혈청의 90.8%가 서로 합치되어 밀접한 연관성을 나타내었다. 또한 장내 조충 감염증의 경우 두 방법 모두에서 높은 교차반응을 나타내었으나 간접 형광항체반응의 특이성이 더 좋았으며 특히 간접 형광항체 반응은 흡충류 감염자 혈청에서 교차반응을 나타내지 않았다. 이와 같은 결과는 혈청만을 사용하였을 경우 간접 형광항체반응의 민감도나 특이도가 효소연결성 면역홉착 검사와 차이가 없으며 뇌낭미충증의 진단에 매우 유용함을 나타내고 있었다.
현재 유구낭미충증을 혈청학적으로 진단하는 데에는 낭액항원을 이용한 특이항체검사법으로 micro-ELISA를 널리 이용하고 있다. 이 실험은 효소부착 이차항체를 사용하는 micro-ELISA방법 대신 민감도가 뛰어난 것으로 알려진 ABC-ELISA나 Protein-ELISA로 바꾸어 사용하면 검사의 민감도를 보다 개선할 수 있는지를 알기 위하여 실시하였다. ABC-ELISA에 의한 항체검사는 낭액항원 단백질 $2.5{\;}\mu\textrm{g}/ml$, 혈청 희석 1:10,000, biotinylated no-hmn IgG 1:100,000 회석, peroxidase conjugated streptavidin 1:40,000 희석 및 2,2-azino-di(3-ethylbenztlllazoline) sulfnnlc acid발색제를 사용하는 조건으로 실시하였고 415 nm에서 흡광도를 측정하였다. Protein A-ELISA는 항원단백질 $2.5{\;}\mu\textrm{g}/ml$, 혈청은 1:200 회석, HRP-Protein A 1:20,000 희석 및 ABTS 발색제를 사용하는 조건으로 실시하고 415 nm에서 흡광도를 측정하였다. 유구낭미충증 환자 115 명의 혈청을 검사한 바 민감도는 micro-ELISA 81.7%, Protein A-ELISA 82.6%, ABC-ELISA 86. 1%이었다. 다른 기생충성 질환자, 비기생충성 질환자 및 대조군 등 165명 혈청에서 특이도는 각각 88.5%, 93.3%, 93.8%이었다 세 가지 ELISA방법에 의한 항체가 사이에는 상관계수 0.84~0.86의 높은 상관관계가 성립하였다. 이상의 결과 ABC-ELISA는 micro-ELISA에 비하여 민감한 혈청학적 방법이고 실제 유구낭미충 특이항체 검사상의 특이도에서도 차이가 있다는 것을 알 수 있었다. 따라서 ABC-ELISA는 유구낭미충증의 혈청학적 진단에서 혈청 및 뇌척수액 등 검체를 적게 사용할 수 있다는 장점이 있다는 것을 알 수 있었다.
1984년 1월부터 1986년 6월까지 30개월간, 확진된 뇌 유구낭미충증 환자 69명에 대하여 혈청학적 추적검사를 실시하였다. 환자는 모두 치료전에 뇌전산화 단층 촬영을 실시하였고 효소면역측정법에 의하여 혈청 및 뇌척수액의 특이 IgG 항체가를 측정하였다. 프라지콴텔에 의한 약물 치료는 $3{\times}25mg/kg$의 용량으로 $4{\sim}14$일간 실시하였다. 추적기간 및 회수는 환자마다 달랐으며 최대 추적기간은 22개월이었다. 추적검사용 혈청 및 뇌척수액은 $-40^{\circ}C$에 보관한 후 낭액항원, 낭벽항원 및 두절항원에 대한 IgG 항체가를 일시에 측정하였다. 프라지콴텔 투여후 $1{\sim}4$개월 사이에 환자의 대부분에서 혈청 및 뇌척수내 특이 IgG 항체가는 일시적으로 상승하였다. 치료 직후부터 항체가가 저하하는 환자가 있었으나 소수이었다. 프라지콴델 투여시의 부작용을 줄이기 위해 덱사메타손을 투여하면 항체가 상승은 억제되었다. 프라지콴텔 치료후 혈청내 항체가 평균치의 변동이 뇌척수액내 항체가 평균치의 변동보다 심하였고, 항체가의 변화율은 낭벽항원이나 두절항원에 대한 항체에서 낭액항원에 대한 항체에서 보다 컸으나 항체가 변동폭은 낭액항원에 대한 항체가 더 컸다. 대상 환자 69명중 혈청학적으로 음성이었던 6명중 1명은 치료후 뇌척수액내 낭액항원에 대한 항체가가 양성범위로 전환하였다. 프라지콴텔 투여후 항체가의 상승은 뇌 유구낭미충증의 혈청학적 진단에서 보조적으로 이용할 수 있다고 생각하였으며 추적기간으로는 투여후 1개월이 적합하다고 생각하였다. 치료후 6개월내지 22개월까지 추적검사한 환자 15명중 혈청과 뇌척수액에서 모두 음성으로 전환한 예는 1례뿐이었고 혈청이나 뇌척수액 어느 하나에서라도 음성으로 전환한 예도 3례에 불과하였다. 만성 경과를 취한 심한 뇌 유구낭미충증 환자에서의 혈청학적 음성전환은 관찰 기간중 없었다. 추적 검사증 급성 뇌염증상이 나타난 만성환자에서는 일시적으로 두절항원에 대한 항체가가 상승하고 있었다. 이상의 결과에서 뇌 유구낭미충증 환자를 프란지콴텔로 치료한 다음 면역효소측정 법으로 혈청학적 추적검사를 실시할 경우 투약후 매 1년에 한번씩 실시하면 완치된 환자를 감별할 수 있을 것으로 생각하였다.
원충성 질병인 Neospora caninum은 소와 개를 비롯한 여러 동물에서 유ㆍ사산 및 신경증상을 유발하는 질병으로 전 세계적으로 그 피해가 증가하고 있으며, 최근국내에서도 젖소농가를 중심으로 발생보고가 있으나, 한우에 대해서는 거의 역학적조사가 되어있지 않은 바, 본 연구에서는 도축되는 한우, 유ㆍ사산 및 기형송아지를 중심으로 간접형광 항체검사법(IFAT)을 이용한 혈청학적 조사 및 면역조직화학적 방법에 의한 Neospora caninum의 동정을 실시하였다. (중략)
전라남도 진도군 내에서 사육되는 진돗개에서 발생한 유산의 일부가 Brucell canis 에 의하여 유발된 것임을 확인하였다. 이 연구에서는 먼저 1997년 7월에서 1998년 6월 사이에 발생한 진돗개의 유산을 설문조사로 확인하였던 바 발생률이 18.5%에 달했다. 이어서 설문조사에 포함된 지역에서 사육되는 진돗개를 대상으로 신시한 혈청학적 조사에서는 25%가 양성을 보였으며, 수캐의 양성률은 암캐의 거의 두 배에 달했다. 다음으로 균 분리와 치료시험을 실시하기 위하여 유산 병력을 기치고 있으면서 혈청검사에서 양성을 나타낸 암캐 다섯 마리를 현지에서 구입하였다. 그 중 세 마리는 안락사 시킨 후 부검하여 자궁을 검사하고 균 분리를 시도한 바 세 미리 모두에서 B. canis가 분리되었다. 그러나 육안적 및 조직학적 변화 는 현저하지 않았다. 나머지 두 마리는 minocycline과 streptolmycin으로 치료하였는데, 치료를 끝낸 후 8주에 실시한 혈청검사에서 음성을 보였다. 이 연구의 결과는 개 부루셀라병이 진돗개를 사육하는 농가에 경제적 손실을 초래하고 있음을 나타내준다. 아울러 대부분의 진돗개가 방사되고 있으며, 그렇게 사육된 개들이 전국적으로 팔려나가고 있기 때문에 진돗개가 개 부루셀리병의 전파원으로 작용할 가능성을 지니고 있음을 나타내준다 천연기념물인 진돗개의 보 호와 농가의 소득 그리고 공중위생학적인 면에서 진품개의 부루셀라병에 관한 연구는 지속적으로 수행되어야 할 것으로 사료된다.
[목적] B형 간염바이러스(hepatitis B virus, HBV)감염은 전세계적으로 중요한 공중 보건 문제이며 만성간염, 간 경변, 간암의 주요 원인으로 알려져 있으며, 이러한 질환의 진단 및 치료에 B형 간염바이러스의 혈청학적 검사는 필수적이다. 항 바이러스 치료중인 B형 간염 환자를 대상으로 면역방사계수 측정법(IRMA; Immunoradiometric assay)과 화학발광 미세입자 면역분석법(CMIA; Chemiluminescent Micropartical Immunoassay)을 이용하여 HBe-Ag 검사를 시행하였고, 실시간 중합효소 연쇄반응(RT-PCR; Realtime-Polymerase Chain Reaction)법을 이용하여 혈청 내 HBV DNA 검출율 을 비교 분석 하였다. [대상 및 방법] 항 바이러스 치료가 시행중인 B형 간염 환자 270명을 대상으로 HBeAg 혈청 검사와 HBV DNA 정량 검사를 실시하였다. HBeAg 혈청 검사는 검출 원리가 다른 두 가지 혈청학적 검사법(IRMA, CMIA)을 적용 하였고, 혈청 내 HBV DNA는 Abbott m2000 System을 사용하여 실시간 중합효소 연쇄반응(RT-PCR; Realtime-Polymerase Chain Reaction)법으로 정량 측정 하였다. [결과] HBeAg 검출율은 면역방사계수법(IRMA)의 경우 24.1% (65/205), 화학발광 미세입자 면역 분석법(CMIA)에서는 82.2% (222/48)의 결과를 보였다. 혈청학적 검사방법(IRMA, CMIA)에 따른 HBeAg 검사결과의 일치율은 33% (89/270)이다. 실시간 중합효소 연쇄반응(RT-PCR)을 이용한 혈청 내 HBV DNA의 검출율은 29.3% (79/191)를 보였고, 혈청 내 HBV-DNA 농도는 $16IU/mL{\times}1.0{\times}10^9IU/mL$ 이며 검출한계는 <15IU/mL 이다. 면역방사계수법(IRMA)으로 HBeAg 검출결과가 양성일때 55.4%, 그리고 음성일때 20.9%의 HBV DNA 검출율과 $1.1{\times}10^8IU/mL$, $5.7{\times}10^5IU/mL$의 혈청내 HBV DNA농도를 나타냈다. 이에 반해 화학발광 미세입자 면역 분석법(CMIA)의 경우 HBeAg 검출결과가 양성일때 HBV DNA 검출율은 28.4%, 음성일때 33.3%의 결과를 나타냈으며 혈청 내 HBV DNA농도는 $6.0{\times}10^7IU/mL$, $2.4{\times}10^5IU/mL$ 이었다. 면역방사계수법과 화학발광 미세입자 면역 분석법에서 동일하게 HBeAg 검출 결과가 양성인 경우 HBV DNA 검출율은 62.3%의 결과를 보였으며, 혈청 내 HBV DNA 농도는 $1.1{\times}10^8IU/mL$ 이다. [결론] 혈청학적 검사법에 따른 HeAg 검출율은 많은 차이를 보였다. 이러한 차이는 검사kit에 사용된 Ab의 특성과 epitope, HBV의 genotype등 여러 가지 원인으로 생각된다. 혈청학적 검사 결과로 분류 된 그룹별 HBV DNA의 검출율과 농도를 비교한 결과, Group II(IRMA 양성, CMIA 양성, N=53)에서 높은 검출율과 농도를 확인할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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