The objective of this study was to identify and characterize fibrinolytic compound from Cornus officinalis. Cornus officinalis. Hot water extract was fractionated into hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol, and water fractions. Assays for fibrinolytic activity indicated that only the ethyl acetate fraction had significant efficacy at 1.36 plasmin units/mL. Isolation of fibrinolytic compound was carried out on Amberlite IRA-400, Sephadex LH-20 and active charcoal column chromatography. HPLC analysis of the purified fibrinolytic compound showed retention time (RT) same as authentic malic acid. LC / MS / MS in negative mode showed the same peak at m/z 133, confirming that the purified compound was malic acid with a molecular weight 134 Da. The compound showed fibrinolytic activity of 0.69 plasmin units/mL, 14.62% of thrombin inhibitory activity, 6.42% of antioxidative activity, and 17.28% of α-glucosidase inhibitory activity. The purified compound hydrolyzed γ subunits of human fibrinogen. In conclusion, malic acid isolated from Cornus officinalis might have potential to be developed as ingredient for biofunctional foods to prevent cardiovascular diseases.
Isoflavone (daidzein and genistein) contents, and antioxidative and fibrinolytic activities of seven commercial Korean cooking-with-rice soybeans, including Seonbikong, Chungtae, Gangnamkong, Whangtae, Geodoo, Seolitae, and Wooltalikong were investigated. Daidzein and genistein were not found in Selitae, nor was didzein in Gangnamkong and Geodoo. Total daidzein and genistein levels in Chungtae and Whangtae were 500 and 1550 mg per kg, respectively. Wooltalikong, Whangtae, and Gangnamkong had very high electron donation abilities, over 90%, but Seonbikong and Chungtae showed significantly lower activities. SOD-like activities were also the highest in Gangnamkong and Wooltalikong. Fibrinolytic activities in Seonbikong, Whangtae, and Gangnamkong were similarly strong. Fibrinolytic substances purified from protease inhibitors or activated under various pH or heat treatment conditions, were different among the soybean varieties. This study revealed that, although several cooking-with-rice soybeans were poor in isoflavones, Wooltalikong and Gangnamkong could be good sources for functional products due to their strong antioxidative activities, and heat- and acid-resistant proteolytic abilities.
Our study investigated the fibrinolytic, thrombin inhibitory, anti-oxidative and anti-inflammatory activities of the water extract and solvent fractions isolated from Pleurotus ferulea. Fibrinolytic activity was investigated using the fibrin plate method. Thrombin inhibitory activity was used to analyze thrombin inhibitor assay. The DPPH assay was used to estimate anti-oxidative activity. Inhibition of NO production was measured for anti-inflammatory activity in LPS-activated murine RAW 264.7 macrophage cells. An MTS assay was used to evaluate the effects of the water extract and solvent fractions isolated from Pleurotus ferulea on cell viability. Our results showed the fibrinolytic activity to be strong in the ethyl acetate fraction at 1.33 plasmin units. The ethyl acetate fraction also showed high thrombin inhibitory activity at 94.45%. The anti-oxidative activity of the water extract was 37.01% and the anti-inflammatory activity of the chloroform fraction was 98.13%. These findings suggest that Pleurotus ferulea's extract and fractions could be applicable in the development of functional foods for the treatment and prevention of cardiovascular diseases.
The aim of this study was to investigate the physiological functionalities of 60 wild mushroom methanol extracts. We determined their fibrinolytic and ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory activities. Among them, 11 mushrooms showed fibrinolytic activity. In particular, Armillaria sp. showed the greatest enzyme activity (4.2 plasmin units/ml) in a fibrin plate assay. The fibrinolytic activities of Amanita virosa. Gymnophilus sp. and Lepista nuda were 2.3, and the activities of Amanita citrina and Cortinarius alboviolaceus were 2.1 and 2.0 plasmin units, respectively. In a ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory activity test, Naematoloma fasciculare showed the greatest inhibitory activity at 98.5%. The ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory activities of Suillus luteus and Gomphidius maculatus were 66.6% and 61.5%, respectively. This study suggests that both Armillaria sp. and N. fasciculare can be used as candidates for the development of new medicine effective to cardiovascular diseases and biofunctional food.
The aim of present study is to investigated on the development of the functional doenjang possessing antioxidative and fibrinolytic activity. A strain, BH-23 showing antioxidative and fibrinolytic activity was isolated from traditionally doenjang, and then identified as Bacillus subtilis based on moophological, physiological, and biochemical characteristics, and named as Bacillus subtilis BH-23. The optimal pH level and temperature conditions were 5.0 and $40^{\circ}C$, NaCl concentration was grown well at 15% Antioxidative and fibrinolytic activity of Bacillus subtilis BH-23 was accoidance with growth conditions of the original state. By comparising with traditionally commercialized doenjang, it is prepared with Bacillus subtilis BH-23. The final results evaluated with positive elements rised above the surface such as color, taste and flavor without ammonia. Therefore, it is safe to assume, doenjang has strong market value in the food industry.
This study was performed to search for potential microorganism that has rapid fermenting and physiological function from anchovy sauce. We isolated three bacterial strains, JM-1, JM-2, and JM-3 with proteolytic and fibrinolytic activity from anchovy sauce. Among the 3 bacterial strains, JM-3 showed the strongest proteolytic and fibrinolytic activity. Bacterial strain JM-3 was gram-positive rod, motile and formed endospore. The 16S rRNA of bacterial strain JM-3 was amplified by PCR and then its sequence was determined by ABI 310 genetic analyzer. The 16S rRNA sequence of bacterial strain JM-3 was compared to BLAST DNA database and identified to Bacillus subtilis with 99% of homology. The optimum temperature, pH and NaCl concentration for growth of B. subtilis JM-3 were $40^{\circ}C$, 5.0 and 0%, respectively. The optimum temperature, pH and NaCl concentration for proteolytic and fibrinolytic enzyme production of B. subtilis JM-3 were same as optimum conditions for growth. At 20% of NaCl concentration which is common NaCl concentration of fish sauce, B. subtilis JM-3 showed about 60% of proteolytic and fibrinolytic activity of 0% NaCl concentration. From above results, we found that B. subtilis JM-3 will be able to used for starter of functional fish sauce.
A bacterial strain showing the fibrinolytic activity was screened from korean traditional soybean products. For the identification, the strain was investigated morphology and biochemical characteristics and it was classified to Bacillus subtilis. The strain had high fibrinolytic activity in Chungkukjang. The optimum fermentation condition of temperature and time were 37$^{\circ}C$ and 24hour. The pH in Chungkukjang was gradually alkalized during fermentation. The fibrinolytic enzyme in Chungkukjang stable at heft treatment; After heating at 6$0^{\circ}C$ and 8$0^{\circ}C$ for 30 min, the fibrinolytic activity remained 75% and 40%, respectively.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.7
no.3
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pp.476-482
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2006
The aim of this work was to perform the screening and identification of the bacterium, MK-15 having the activity of fibrinolytic enzyme for the commercial use. Initially, strain MK-15 was enriched and isolated from naturally fermented soybean. Morphological and various physiological characteristics of the strain MK-15 was examined. The activity of fibrinolytic enzyme derived from supernatants of test culture MK-15 was performed by fibrin plate method for solid fibrinolytic activity. As the result, the fibrinolytic activity of MK-15 grown on the soybean media was about 2.7 times greater than that of plasmin used as stardard. 16S rRNA analyses revealed that strain MK-15 was 99.9% similar to Bacillus subtilis species cluster, and the bacterium was designated as Bacillus sp. MK-15. Strain MK-15 was registered in GenBank as [DQ163021].
Samples (10 mg/mL) of wild Grifola frondosa aqueous extract and solvent fractions were examined for fibrinolytic, thrombin inhibitory, acetylcholinesterase inhibitory, and antioxidative activities to determine the biological activities. The fibrinolytic activity of the aqueous extract and solvent fractions was 0.93 and 0.73 plasmin units/mL, respectively. The thrombin inhibitory activity of the butanol extract was 79.60%. The chloroform fraction had high acetylcholinesterase inhibitory activity (85.88%). The aqueous extract had low antioxidative activity (39.81%). The aqueous fraction hydrolyzed Bβ subunits of human fibrinogen but did not show any reactivity for the γ form of the human fibrinogen. The findings indicate the potential of wild Grifola frondosa for the development of drugs and bio-functional foods to prevent cardiovascular diseases.
This study was conducted to investigate the isoflavone (daidzein and genistein) contents, and the antioxidative and fibrinolytic activities of red and mung beans. Daidzein was not found in either the red or mung beans. The genistein contents of the red and mung beans were 40.7 and 27.8 mg/kg, respectively. Both samples had very high electron donating abilities and SOD-like activities. Fibrinolytic activities were not detected in the crude mung bean extract, but fibrinolytic substances were purified or activated under various pH conditions and with heat treatments. With heat treatment at 100 $^{\circ}C$ for 10 min, the specific activity was increased 4.61 fold. This study revealed that, although red and mung beans were poor in isoflavone, they could be good sources for functional products due to their strong antioxidative activities and heat- and acid-resistant proteolytic abilities.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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