From the lysates of the 7 selected strains of Pseulomonas utilizing 2-methyl-4-chlorophenoxyactate as a sole source of carbon and energy, several MCPA plasmids, which encodes genes for the degradation of 2-methyl-4-chlorophenoxyacetate, were isolated, and measured their molecular weight as well as genetic characters such as resistance to antibiotics and degradative ability of other chlorinated herbicides. Transmissibility of the MCPA plasmids, pKU1, pKU15, and pKU17 was tested by conjugation or transformation and the restriction pattern of pKU15 for Pvu II, Hind III, EcoR I, Xho I, Bgl II, and Ava II was analyzed.
세계적으로 구리약제에 대해서 저항성을 나타내는 균주들이 발견되있으며, 이들은 구리약제의 방제효과를 감소시켰다. 국내에서도, 구리 저항성 균주 Xanthomonas campestris. pv. vesicatoria HN94-2, -3, -4, -5, -6 들이 천안지역의 고추재배지에서 처음으로 분리되었으며, 이들 균주들의 nutrient agar에서 황산구리(CuSo\ulcorner)에 대한 최소억제농도(minimum inhibitory concentration, MIC)는 1.4~1.6 mM이었다. 이들은 모두 황산아연(ZnSO\ulcorner)에 대해서는 감수성을 보여, 구리저항성 균주에 대한 방제약제로서 아연 함유 약제를 사용할 수 있을 것이다. 분리된 균주중 HN94-2와 HN94-6을 이용하여 접합(conjugation)을 통해 구리저항성의 전파를 실험한 결과, 이들 두 균주 모두 구리감수성 균주에게 4.3$\times$10\ulcorner에서 1.0$\times$10\ulcorner(transconjugant/donor)의 정도로 구리 저항성이 전이되었다. 이들 HN94-2와 HN94-6 균주의 구리정항성 유전자들은 약 200 kb 정도의 커다란 플라스미드(plasmid)에 존재하며, 이들은 각각 pXVK9402와 pXVK9406이라 명명되었다.
박테리오신의 일종인 leucocin A를 생산하는 효모의 제작을 위하여 117 bp 길이의 개시코돈과 종지코돈을 포함하는 leucocin A 유전자를 합성하여 효모운반체인 pAUR123에 클로닝하였다. 형질전환된 효모는 부패균의 일종인 고초균(Bacillus subtilis)에 대해 항균활성을 나타냈다. 형질전환 효모로부터 분리한 플라스미드를 주형으로 하고 leucocin A에 특이적인 primer들을 이용하여 PCR 반응을 행한 결과, 효모에 도입된 leucocin A 유전자를 확인할 수 있었다. 이 연구의 결과로 부패하기 쉬운 식품들의 보존성을 향상시키거나, 내성이 생긴 병원균의 생육을 저해하기 위한 항생제로 사용할 수 있는 박테리오신을 산업적으로 생산할 수 있는 효모세포를 제작하였다.
The clinical isolate Staphylococcus aureus SA8 was resistant to tetracycline(Tc) and harboured a plasmid pKH1(24.82 kb). pKH1 was shown by curing and by transformation to specify resistance to Tc. The cleavage map of a pKH1 was determined by restricction enzyme mapping techniques. Cleavage map is given for BglII, EcoRI, HpaII, PvuII and SalI. Restriction endonuclease BamHI, BglI, BstEII, HpaI, PstI, and XhoI have no sites on this plasmid. HaeIII, XbaI, and HindIII have 5, 6, 14 sites, respectively.
폐암을 일으키는 것으로 알려진 JSRV는 NIH3T3 세포를 transformation 시키는 성질이 있다는 것으로 알려져 있다. 이 바이러스 중 Envelope 단백질이 NIH3T3를 transformation시키는 것으로 알려져서 이것이 세포내에서 어떤 전사인자를 활성화시키는지를 luciferase 리포터 플라스미드를 이용한 transient transfection 방법으로 조사하였다. 그 결과 Envelope 단백질은 NF-kB와 AP-1의 활성을 높이는 것으로 밝혀졌다.
The clirical isolate Staphylococcus aureus SA2 had four kinds of plasmids and was resistant to ampicillin, chloroamphenicol, clindamycin. erythromycin, gentamicin, kanamycin, methicillin, streptomycin, tetracycline and tobramycin. Transformation experiment demonstrated that 4.14kb plasmid(pKH7) encoded resistance to chloramphenicol. The cleavage map of pKH7 was determined by restriction enzyme mapping techniques. The cleavage map is given for BstEll, Hindlll, Hpall, and Xbal. The above restriction endonucleases have a single site, but nucleases BamHl, Bgll, BglII, EcoRl, EcoRV, HaeIII, Hpal, Kpnl, Pstl, PvnII, Sall, Smal, and XhoI have no site on this plasmid.
The complete nucleotide sequence of pKH6, a tetracycline-resistance (Tc$^{r}$) plasmid isolated from multi-drug resistant Staphylococcus aureus SA2, has been determined and compared with that of the staphylococcal Tc$^{r}$ plasmid pTl8l. The nucleotide sequences of the two plasmids are in agreement except for 7 nucleotides. All differences are caused by base pair substitutions. Among 6 substitutions, 3 occurred in coding regions. However, only two base substitutions in coding regions resulted in changes of amino acid sequences in two different ORFs of repC and Pre proteins.
The clinical isolate Staphylococcus aureus SA2 was resistant to ampicillin, Chloramphenicol, clindamycin, erythromycin, gentamicin, kanamycin, methicillin, streptomycin, and tobramycin and harboured more than two kinds of plasmids. Transformation experiment demonstrated that 40.98-kb plasmid(pKH2) encoded resistance to ampicillin, clindamycin, erythromycin, kanamycin, and streptomycin. The cleavage map of a pKH2 was determined by restriction enzyme mapping techniques. Cleavage map is given for BamHI, BglI, BstEII, SalI and XhoI.
Previously, we reported on the antibiotic resistance patterns of 50 strains of Staphylococcus aureus which were isolated from a hospital in Busan, Korea from July 2005 to December 2006. We have isolated small plasmids and classified plasmid types by agarose gel electrophoresis. We have selected 5 plasmids and determined complete nucleotide sequences of those plasmids. The aim of this paper is to report on the characteristics of cadmium, erythromycin, lincomycin resistance plasmids and a cryptic plasmid based on the sequence analysis obtained by using the BLAST program.
The nucleotide sequence of Xbal-Mbol fragment of pKH7, a chloramphenicol-resistant($Cm^{r}$) plasmid isolated from multidrug-resistant S. aureus SA2, has been determined. Xbal-Mbol fragment of pKH7 was found to contain two ORFs. One ORF encoded Rap and the other encoded CAT protein. The deduced amino acid sequences of Rep and CAT of pKH7 were compared to those of pUB112 and pC221. Comparisons revealed that there was one amino acid difference in CAT between pKH7 and pUB112. CAT of pKH7 exhibited 98.6% amino acid identity to that of pC221. In case of Rep proteins, a slightly lower homology of 96.4% and 86.7% in amino acid sequences was observed between pKH7 and pUB112 and between pKH7 and pC221, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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