펩타이드와 단백질은 전사, 번역, 후번역 단계에 걸친 모든 생물학적 반응을 조절한다. 그러나 분자수준에서 구조와 기능에 대한 우리의 이해는 초보적인 수준이다. 구조와 기능의 연관성에 대한 문제는 펩타이드와 단백질 자체에 대한 것과는 좀 다르다는 것을 명확히 할 필요가 있다. Multidomain을 갖는 단백질은 작고 통합적이며, 구조적으로 제한된 부분으로 쪼개는 것은 천연 단백질의 활성을 모방하여 저분자의 nonpeptide를 설계하는데 있어서 주요한 일이다. 결정적인 역할을 수행하는 domain을 모방하는 것은 특이성과 치료 효과에 있어서 자연적으로 얻어지는 단백질 물질과 비교하여 이로운 특성을 갖을 수 있고 분자 인지 분야에 관한 연구에 유용한 단서를 제공한다(Chen etal., 1992). 한편 펩타이드는 환경에 의해 구조가 심하게 영향을 받아 특성이 쉽게 변한다(Marshall et al., 1978). 수용액 내에서 이러한 구조적 유동성 때문에 그들이 결합할 수용체나 생리활성을 띄는 구조를 결정하는 것은 어렵고 복잡한 일이다(Fauchre,1987; Hruby, 1987). 구조를 한정하면 이러한 결정을 매우 쉽게 할 수 있다(Hrubyet al., 1987). 단백질 모방학은 분자지각 연구에 강력한 수단이며, 복잡한 단백질과 펩타이드의 구조-기능관계를 탐구하고 분석하는데 독특한 방법이다. 이 장에서는 매우넓고 빠르게 확장되고 있는 Peptidomimetic연구를 간략히 소개하고 있다. 단 본문은 기술 범위를 N-Methylated 아미노산과 스테로이드 등으로 제한하여 소개한다.
Proceedings of the Korean Society for Food Science of Animal Resources Conference
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2005.10a
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pp.210-213
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2005
감마선 조사된 실크 펩타이드의 전자공여능은 감마선 조사선량이 증가할수록 증가되었으며 IC50은 비조사구에 비해 50${\sim}$70%로 감소되었다. 또한, 실크 펩타이드가 첨가된 햄버거 패티를 감마선 조사하여 측정한 결과 감마선 조사선량이 증가함에 따라 지방 산패도가 증가하였지만 실크 펩타이드 첨가구가 무첨가구에 비해 지방산화가 적은 것으로 나타났다. 이상의 결과는 실크 펩타이드의 첨가가 가열 및 감마선 조사에 의해 발생될 수 있는 햄버거 패티의 지질 산패를 억제시켜 TBA값이 낮아짐을 보여준다.
세포 투과성 펩타이드(cell penetrating peptide; CPP)는 강력한 세포막 투과성을 보유하고 있어 난투과성 중거대분자 약물의 세포 내 전달체 개발에 있어 중요한 요소 기술로 부각되고 있다. 하지만 대부분의 세포 투과성 펩타이드는 타겟 세포에 대한 선택성 없이 투과하므로, 전신 투여시 심각한 부작용이 발생할 수 있다. 이 글에서는 선택적 세포 투과성 펩타이드를 개발하는 최근 연구 전략 중, 타겟 세포 표면에 존재하는 수용체에 결합하는 리간드를 이용한 전략과, 타겟 세포 주변의 물리, 화학, 생물학적 신호 변화를 이용하는 전략에 대해 소개한다. 특히, 최근 논문에 발표된, 어피버디(affibody)와 세포 투과성 펩타이드 결합체를 이용하여 HER2 수용체를 지닌 유방암 세포에 선택적 투과성을 부여하는 방법과, 암세포 주변의 작은 pH 변화를 감지하여 양전하성을 조절함으로써 수용체가 없는 유방암 세포에도 선택적으로 투과성을 보이는 방법에 대해 자세하게 소개한다.
The biologically active peptides in human blood can adjust the functions of many physiological systems. The peptides in human blood were separated on the five steps of linear gradient-elution mode by RP-HPLC with UV detection. The size of commercially available $C_{18}$ chromatographic column was 4.60$\times$150 mm with particle size of 5 $\mu\textrm{m}$ and pore size of 100 $\AA$. The mobile phases used were water in 0.75% trifluoroacetic acids (TFA) and organic modifier of acetonitrile. The isolation methods suggested in this work for peptides from the blood were composed of the formation of immiscible liquid layers and precipitation by centrifuge and chemicals of sodium citrate and trichloroacetic acid (TCA). The some peptides were identified based on the retention times previously constructed database.
In order to have a handle on the availability of eukarvotic peptide hormone precursors, a cDNA encoding angler fish prepro-SRIF I was manipulated so that it can be produced in large quantity from heterologous E. coli cells. Using T7 overexpression system, fusion constructs between the T7 phage coat protein Sl0 and the prepro-SRIF were made and modified as desired. From the host E. coli strain, BL21 DE3, harboring these plasmid constructs, three different SRIF related polypeptides were expressed in large amount and characterized. The results confirm the exact construction and authenticity of the overexpressed proteins from E. coli cells. The importance of this heterologous overexpression in hard to get peptide hormone precursors as well as the suitability of the target peptide hormone SRIF for this approach are discussed.
In this study, a method of self-assembly of peptides based on irreversible covalent bonds was studied by mimicking a biological covalent bond, dityrosine bond. A tyrosine-rich short peptide monomer having the sequence of Tyr-Tyr-Leu-Tyr-Tyr (YYLYY) was selected to achieve a high-density of dityrosine bond. The peptide nanoparticles covalently self-assembled with dityrosine bonds were synthesized by one-step photo-crosslinking of a peptide using a ruthenium catalyst under visible light. The effect of the concentration of each component for the size of the peptide nanoparticle was studied using dynamic light scattering, UV-Vis spectroscopy, and transmission electron microscopy. As a result, the synthesis conditions for size of the peptide nanoparticles ranging from 130 nm to 350 nm were optimized.
Short peptides are potentially effective materials as cosmeceuticals, but their delivery across the skin can be problematic due to the ionic nature of peptides and the structure of the skin. For short peptide to be utilized as cosmeceuticals, its ability to penetrate the skin must be altered. In this study, we conjugated the widely used procollagen type I signal peptide, KTTKS, with oleic acid to improve the lipophilic properties of the peptide, and used the oleic acid-conjugated peptides to construct cosmeceutical nanosomes. Then we examined the penetration of cosmeceutical nanosomes prepared from isotope-labeled peptide into the skin after transdermal application using autoradiography. Because of its hydrophilic property of penta-peptide, the penta-peptide itself was not able to be penetrated through the stratum corneum of the skin. In contrast, nanosomes made from olecic acid conjugated penta-peptide were able to be penetrated through the stratum corneum effectively. Autoradiography showed the precise penetration points to dermal layer, demonstrating the appropriateness of this method for clarifying the mechanism of penetration of transdermal delivery systems.
Antifreeze proteins (AFPs) bind to ice crystals and inhibit their growth. AFPs are essential for the survival of organisms living in subzero environments. Type I AFP (AFP37) isolated from winter flounder is an ${\alpha}$-helical peptide of 37 residues long. In this study, we attempted to develop short AFP fragments with higher activity and solubility. We designed and synthesized N-terminal 15 and 21 residue-long AFPs, designated AFP15 and 21. Also dimerized AFP15 and 21, designated dAFP15N and dAFP21N, respectively, were generated through disulfide bonds between peptides containing CGG residues added to the N-terminus of AFP15 and AFP21 (designated AFP15N and 21N). Their helical contents and antifreeze activities were assessed using circular dichroism (CD) spectroscopy and a nanoliter osmometer, respectively. The helical content of AFP15 AFP21, AFP15N, AFP21N, dAFP15N and dAFP21N was 47, 48, 23.8, 28, 49.1, and 52%, respectively compared to that of wild type AFP37; the antifreeze activity was 8.4, 9.3, 0.05, 5.6, 12.1, 11.2% respectively, compared to that of wild type AFP37. Contrary to our anticipation, the dimerized peptides showed almost the same antifreeze activity as their monomeric counterparts. These results indicate that the dimerized peptides behave as monomeric peptides due to the high rotational freedom of disulfide bonds connecting two monomeric peptides. The star-shaped ice crystals generated by the peptides also demonstrated weak interaction between ice and peptides.
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.30
no.1
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pp.73-77
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2004
Selenium containing peptide was produced by culturing yeast with selenium, Selenium was broadly incorporated in the various size of proteins based on the GPC analysis of the total yeast protein. The ratio of selenium to protein increased with the concentration of added selenium in the culture medium. Antioxidant activity (glutathione peroxidase-like activity) was proportional to the concentration of selenium concentration in the peptide. Different size of proteins were obtained by hydrolyzing the total yeast protein by protease XIV. Average molecular weight of selenium peptide was analyzed by GPC. Glutathione peroxidase (GPx) activity of the selenium peptide increased as the size of peptide decreased. Sodium selenite had strong inhibition on the yeast growth than sodium selenate. The ratio of selenium to protein was higher with sodium selenate than with sodium selenite. These results showed the potentials of selenium peptide production by yeast cultivation.
Selenium-containing peptide (Selenium peptide) was produced by autolysis of Saccharomyces cerevisiae which was cultured in inorganic selenium-supplemented medium. Selenium peptide showed antioxidant activity and protective effects on UVB irradiated human fibroblast. Minimal toxicity of selenium peptide was observed whereas selenium nitrate exhibited cell toxicity as low as $10^{-9}\;M$. Selenium peptide also increased human fibroblast growth, procollagen type I and also decreased MMP-1 (matrix metalloprotease-1). This result showed the potential of selenium peptide as a nontoxic antioxidant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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