본 연구는 뉴런 세포와 슈반 세포의 공동 배양에 의한 수초화 발생 과정과 herpes simplex virus-1 감염에 의한 탈수초화 발생과정을 전자 현미경과 분자생물학적 분석에 의하여 확인하고자 하였다. 쥐의 배아로부터 후근신경절(dorsal root ganglion, DRG)을 분리하여 슈반(Schwann) 세포와 뉴런 세포(neuronal cell)를 in vitro에서 각각 배양하였다. 유사 분열 억제인자로 처리한 뉴런세포와 정제된 슈반세포를 함께 공동 배양을 하여 수초화를 발생시켰다. 이렇게 수초화된 공동 배양 세포에 herpes simplex virus-1를 감염시켜 탈수초화를 진행시켰다. 수초 형성의 존재를 의미하는 myelin protein zero(MPZ) 항체를 사용하고 전자 현미경을 이용하여 수초 발생 및 탈수초화 과정을 관찰하였다.
탈수초화를 위해 쥐의 배아(임신 16일)의 슈반세포와 뉴런 세포가 척수신경절로 부터 in vitro 시스템에서 배양되었다. 항 유사분열제로 첨가된 분리 정제된 척수신경절 세포와 분리 정제된 슈반세포가 공동배양 배양되었고 배양되었고 수초화 과정이 구축되었다. 이렇게 형성된 공동 배양에 M. leprae-specific phenolic glycolipid-1 (PGL-1)을 처리하고 myelin basic protein (MBP)의 항체를 이용하여 탈수초화가 형성되었음을 확인하였다.
본 연구는 뉴런 세포와 슈반 세포의 공동 배양에 의한 수초화 발생 과정과 herpes simplex virus-1 감염에 의한 탈수초화 발생과정을 전자 현미경과 분자생물학적 분석에 의하여 확인하고자 하였다. 쥐의 배아로부터 후근신경절(dorsal root ganglion, DRG)을 분리하여 슈반(Schwann) 세포와 뉴런 세포(neuronal cell)를 in vitro에서 각각 배양하였다. 유사 분열 억제인자로 처리한 뉴런세포와 정제된 슈반 세포를 함께 공동 배양을 하여 수초화를 발생시켰다. 이렇게 수초화된 공동 배양 세포에 herpes simplex virus-1를 감염시켜 탈수초화를 진행시켰다. 수초 형성의 존재를 의미하는 myelin protein zero(MPZ) 항체를 사용하고 전자 현미경을 이용하여 수초 발생 및 탈수초화 과정을 관찰하였다. 이 연구는 과학 기술부, ICT 및 미래 계획 (NRF-2016R1A2B4016552 및 2017R1A2B3005753)이 자금을 지원하는 국립 연구 재단 (NRF)을 통한 기초 연구 프로그램의 지원을 받았다.
우리는 이전까지 드물게 보고된 고혈당 관련 삼투압성 탈수초화 증후군의 연속 자기공명영상 소견을 보고하고자 한다. 당뇨병을 앓고 있는 61세 남자 환자가 전신쇠약과 심한갈증을 주소로 내원하였고 며칠 후 구음장애, 삼킴장애, 운동조절장애를 보였다. 혈액검사상 고혈당을 제외한 전해질 수치는 정상이었다. 뇌 자기공명영상에는 교뇌에서 대칭적이고 종괴 효과가 없으며 주변 부위를 침범하지 않는 T2 신호 이상이 보여 삼투압성 탈수초화 증후군에 합당한 소견이었다. 환자는 임상적인 증상의 호전을 보였으나 추후 촬영한 뇌 자기공명영상은 악화되는 소견을 보였다.
슈반세포와 뉴런 세포가 쥐의 배아의 척수신경절로 부터 각각 in vitro에서 분리되었다. 배양된 슈반세포와 뉴런 세포는 동일한 평판접시에서 공동배양 되었다. 이들 세포들은 때 수초화가 진행되었다. 이렇게 수초화된 공동 배양은 Semliki forest virus에 의해 감염되었고 그 때 탈수초화 과정을 유발시켰다. 우리는 수초화된 뉴런에 존재하는 peripheral myelin protein 22의 항체를 이용하여 수초화 과정과 탈수초화 과정을 확인하였다.
쥐의 배아의 척수신경절로 부터 슈반세포와 뉴런 세포가 각각 배양되었다. in vitro 시스템에서 배양되었다. 항 유사분열제로 처리한 정제 뉴런 세포와 정제 슈반세포들이 공동배양 되었고 그 때 수초화 과정이 진행되었다. 수초화된 공동 배양에 Semliki forest virus를 감염시켜 탈수초화를 진행 시켰다. 우리는 수초화의 형성을 의미하는 neuropeptide Y의 항체를 이용하여 수초화와 탈수초화를 확인하였다.
쥐의 배아의 척수신경절로 부터 슈반세포와 뉴런 세포가 각각 분리되어 배양되었다. in vitro 시스템에서 배양되었다. 정제된 뉴런 세포는 항 유사분열제로 처리하였고 정제한 슈반세포들과 함께 공동배양 하였다. 이 때 수초화 과정이 진행되었다. 이렇게 수초화된 공동 배양에 Herpes simplex virus-1을 감염시켜 탈수초화를 진행 시켰다. 우리는 수초화의 존재를 의미하는 neuropeptide Y의 항체를 이용하여 수초화와 탈수초화를 확인하였다.
쥐의 배아(배아 16일)의 척수신경절에서 슈반세포와 뉴런 세포가 실험실 상에서 분리되었고 정제되었다. 정제된 척수신경절 세포는 유사분열 억제제를 첨가하여 배양되었고 분리 정제된 슈반세포와 공동배양 배양시켰다. 이 결과로 마침내 수초화 과정이 구축되었다. 이 수초화는 M. leprae-specific phenolic glycolipid-1 (PGL-1) 성분으로 처리하였고 그 결과 neurofilament의 단클론 항체를 이용하여 수초화와 탈수초화를 비교 및 분석하였다.
척수신경절의 신경 세포와 슈반세포의 공동 배양으로 수초화 형성 세포 집단이 제조되었다. 슈반세포와 뉴런 세포가 쥐의 배아의 척수신경절로 부터 각각 in vitro에서 분리되었다. 배양된 슈반세포와 뉴런 세포는 동일한 평판접시에서 공동배양 되었다. 본 실험과정은 다음과 같은 4 단계로 구성되어 있다 : 첫 번째 단계는 배아의 척수 신경절 세포의 현탁 과정, 두 번째 단계는 안티 mitotic cocktail의 추가 과정, 세 번째 단계는 척수신경절 세포의 정제 과정, 및 네 번째 단계는 척추 신경절 세포에 슈반 세포의 추가 과정이다. 이들 세포들은 때 수초화가 진행되었다. 이렇게 수초화된 공동 배양은 Semliki forest virus에 의해 감염되었고 그 때 탈수초화 과정을 유발시켰다. 우리는 수초화된 뉴런에 존재하는 peripheral myelin protein 22의 항체를 이용하여 수초화 과정과 탈수초화 과정을 확인하였다.
The proton magnetic resonance spectroscopy ($^1H-MRS$) is a tool used to detect concentrations of brain metabolites such as N-acetyl aspartate, choline, creatine, glutamate, and gamma-amino butyric acid (GABA). It has been widely used because it does not require additional devices other than the conventional magnetic resonance scanner and coils. Demyelination, or the neuronal damage due to loss of myelin sheath, is one of the common pathologic processes in many diseases including multiple sclerosis, leukodystrophy, encephalomyelitis, and other forms of autoimmune diseases. Rodent models mimicking human demyelinating diseases have been induced by using virus (e.g., Theiler's murine encephalomyelitis virus) or toxins (e.g., cuprizon or lysophosphatidyl choline). This review is an overview of the MRS findings on brain metabolites in demyelination with a specific focus on rodent models.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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