Ginkgo (Ginkgo biloba L.) seeds were analyzed to determine the level of soluble sugars and insoluble starch during germination. Also the activities of the hydrolytic enzymes such as amylase, invertase and phosphatase were compared. As amylase activity was sharply increased, significant decline of starch was observed in the female gametophyte and increase of soluble sugars occurred concurrently. Invertase activity was gradually increased in cotyledon and radicle, while it was very low in dry seeds. In addition, phosphatase activity was variable only in radicle, and acid phosphatase showed higher activity than alkaline phosphatase.hatase.
저수준레에저요법에 대해서는 지난 10여년간 의학계 및 치과계에서 임상적으로 사용하여 좋은 결과가 있다고 많은 보고가 발표되고 있다. 특히 치근의 골결손에 관한 연구에서는 전기요법, 초음파요법, 전자장요법 등 뿐만아니라 저수준레이저를 사용하여 골절부내 Callus형성이 촉진되었음을 보고하고 새로운 치료법의 하나가 될 수 있음을 제안한 바도 있다. 본 연구에서는 칼륨비소를 다이오드로 사용한 저수준레이저조사가 골결손의 치유에 어떠한 영향을 미치는지 확인하고자 골모세포의 알칼리성 인산분해효소의 활성화와 석회화결절의 형성을 평가함으로 골모세포의 기능을 조사코저하였다. 실험은 첫째, 9개군으로 나누어 레이저 조사기간에 따른 알칼리성 인산분해효소의 활성화를 조사하였고, 둘째, 이를 근거로 9일간 계속 매일 1회 1.3 J/cm2의 레이저를 조사한 후 펄스의 종류별 차이를 비교하였으며, 세째,레이저펄스별 석회차 결절의 형성 정도를 광학현미경으로 관찰하여 비교분석하였다. 결과, 7일 계속 레이저를 조사한 경우 다른 군에 비해 서서히 ALP의 활성이 증가하였으나 유의한 차이는 없었으며. 따라서 9일동안 레이저를 계속 조사한 경우에는 전체 에너지량이 5.895 J/cm2 인 펄스13과 15가 뚜렷하게 유의한 증가를 보여주었다. 그러나 석회화결절의 형성은 전체 에너지량이 2.546 J/cm2 인 펄스11에서 가장 많았다. 결론적으로 골형성이나 알칼리성 인산분해효소의 활성을 촉진하는 데에는 적절한 레이저 조사조건이 필요하나, 알칼리성 인산분해효소의 활성을 촉진한 펄스와 석회화결절의 형성을 촉진하는 펄스가 서로 다르게 나타난 것은 골형성을 촉진하는 여러요인 들이 저수준레이저에 자극받았을 가능성이 높음을 보여준다 이러한 결과들로 보아 저수준레이저는 골모세포의 기능을 자극하여 골결손의 치유를 개선하는 데 도움될 것이라 사료된다.다. 각 백서의 양측 창상중 하나는 1,3,5,7일 마다 각 실험의 방법에 따라 레이저를 조사하고 실험동물의 다른 창상은 대조군으로서 사용하였다. 모든 창상의 면적은 실험 1,3,5,7 일째에 일정한 거리에서 사진촬영하여 면적계를 이용, 측정한 후 통계적인 의의를 조사하였다. 본 연구의 결과는 저수준레이저는 특정 조건하에서 S. aureus의 증식을 촉진하였다. 그러나 S. aureus에 감염된 창상을 저수준레이저로 조사시 치유가 촉진되었다. 중앙 조사법고 주변조사법에 의한 창상치유효과는 통계적인 의의가 보이지 않았다. 따라서 결론적으로 S. aureus 에 감염된 창상에 직접 또는 간접적이든 pulse의 종류에 관계없이 조사하는 경우 치유효과가 나타나는 것은 정사주위 조직의 LLLI 자극효과가 염증의 확산을 억제한다고 말할수 있다.4/1$0^{\circ}C$에서는 Shoa-Nan-Tsan과 Lenkwang이 가장 높았으며 백앙벼는 3 온도 조건 모두에서 활성이 낮았다. 발아소요일수와 amylase 활성과는 유의적인 정의 상관관계를 보였다., 다다조, 미국의 건답직파재배 품종 등이었으며 우리 나라 육성종들은 모두 지중에서 신장이 멈추어 제1본엽이 지중에서 추출하였으며, Scm파종심에서 불완전엽이 지면을 뚫고 나오는 품종은 Chinsura Boro뿐이었고 Nato, Labelle, Weld Pally, Italliconaverneco 등도 지면 가까이 까지 신장하였다. 6. 50% 출아일수는 제2절간장을 제외 한 모든 유아 형질의 신장도와 유의한 부의 상관을 보였는데 가장 높은 상관을 보인 것은 중배축장+제1절간장+불완전옆장이었으며, 다음이 불완전엽장이 었다. 7. 출아율은 중배축장+제1절간장+불완전엽장, 중배축장+초엽 장과 모든 파종심에서 높은 정의 상관을 보여 제1본엽의 추출 위치가 높을수록
Fluorescence change of coumarin labeled phosphate binding protein (PBP-MDCC) was monitored to measure the amount of released inorganic phosphate ($P_{i}$) during nucleoside triphosphate (NTP) hydrolysis reaction. After purification of PBP-MDCC, fluorescence emission spectra showed that fluorescence responded linearly to $P_{i}$ up to about 0.7 molar ratio of $P_{i}$ to protein. The correlation of fluorescence signal and $P_{i}$ standard was measured to obtain [$P_{i}$] - fluorescence intensity standard curve on the stopped-flow instrument. When T7 bacteriophage helicase, double-stranded DNA unwinding enzyme using dTTP hydrolysis as an energy source, reacted with dTTP, the change of fluorescence was able to be converted to the amount of released $P_{i}$ by the $P_{i}$ standard curve. $P_{i}$ release results showed that single-stranded Ml3 DNA stimulated dTTP hydrolysis reaction several folds by T7 helicase. Instead of end point assay in NTP hydrolysis reaction, real time $P_{i}$-release assay by PBP-MDCC was proven to be very easy and convenient to measure released $P_{i}$.
To enhance functional properties of 4 different hoki frame protein hydrolysates (30K, 10K, 5K and 1K hydrolysate) fractionated through a series of 30, 10, 5 and 1 kDa molecular weight cut-off membranes in order to decrease pore size, all hydrolysates were phosphorylated with sodium trimetaphosphate and altered phosphorylated 30K, 10K, 5K and 1K (P-30K, P-10K, P-5K and P-1K), respectively. The covalent attachment of anionic phosphate groups to polypeptide chains improved the functional properties, such as solubility, emulsifying properties and foaming properties, of hoki frame protein hydrolysates. Especially, P-30K hydrolysate with the highest molecular weight fraction possessed the most excellent functional properties among 4 different phosphorylated hydrolysates.
Human prostatic acid phosphatase (PAP), with comprehensive homology to glandular kallikrein, are representative serum biomarkers of prostate cancer. Dendritic cell (DC), which is the potent antigen-presenting cells(APC) in the immune system, can induce strong T cell responses against viruses, microbial pathogens, and tumors. Therefore, the immunization using DC loaded with tumor-associated antigens is a powerful method for inducing anti-tumor immunity. The CTP (Cytoplasmic Transduction Peptide) technology developed by Creagene which can transport attached bio-polymers like nucleic acids or proteins into the cell with high permeation efficiency. As the active forms of PAP can mediate apoptotic processing, we used multimer forms of PAP as an inactive form for antigen pulsing of DCs. In this study, multimeric forms of CTP-rhPAP was obtained according to the advanced purification process and subsequently confirmed by gel filtration chromatography, western blot and Dynamic Light Scattering. Therefore, CTP-conjugated PA multimers transduced into the cytoplasm were efficiently presented on the cell surface without any harm effect on cells via MHC class I molecules and result in induction of a large number of effector cell.
Hyaluronic acid (HA)는 중요한 glycosaminoglycan 중 하나로서 단백질과 화학적 결합을 하지 않기 때문에 분리가 쉽고 결합조직의 세포간 기질의 주요 성분이다. 우리는 점탄성 고분자 hyaluronic acid를 실험실상에서 사람 태아 골모세포의 골 형성 과정에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 우리는 여러 농도의 HA에 대한 사람 태아 골모세포에서의 세포증식, 염기성 인산분해효소 활성, 석회화 결절 형성능, 교원질 합성능 그리고 bone sialoprotein (BSP)의 발현 정도를 검사하였다. 세포증식에서 각 농도의 HA 처리군과 대조군 간에 2일과 4일간의 결과에서 유의한 차이를 보이지 않았다. 염기성 인산분해효소 활성에서는 0.063% HA 처리군에서 음성 대조군에 비해 가장 유의한 염기성 인산분해효소 활성을 보였다 (p<0.05). 0.063% HA 처리군은 교원질 합성능에서도 가장 높은 수준을 보였다 (p<0.05). 석회화 결절 형성능에서는 0.063% HA 처리군에서 대조군에 비해 많은 염색된 석회화 결절을 보였다. BSP의 발현 정도를 분석한 Western blot에서는 대조군에 비해 0.063% HA 처리군에서 증가된 단백질 발현을 나타났다. 본 연구 결과 고분자 HA가 실험실상에서 사람 태아 골모세포의 분화를 통해 새로운 골 형성을 유도할 수 있는 능력이 있음을 시사하였다.
The aims of the present study were to evaluate the effects of culture conditions on the biosynthesis of extra-cellular alkaline protease in Streptomyces sp. The formation of aerial mycelia and spores were compared with the protease production in order to know the relations between the alkaline protease and the cell differentiation. As results, it was found that substrate concentration was very critical to regulate the formation of the protease, aerial mycelia, and spores, which were resulted from the changes of culture pH to acid. When the culture pH was adjusted with phosphate buffer from pH 6 to pH 9, the alkaline protease production was increased as the culture pH increased whereas aerial mycelia and spore formation were reversely related to the culture pH. Therefore, it was thought that the culture pH was an important factor to regulate the alkaline protease synthesis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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