In order to verify the occurrence of an estrogenic compound in natural products, the estrogenic activity was measured using an in vitro detection system. For this system, human breast cancer cell line MCF7 was transfected using an estrogen responsive CAT reporter plasmid. Estrogenic activities of photosynthetic algae spirulina and sea lettuce were evaluated using this system. Estrogenic activities of a $500\mug/ml\; and\; 50 \mug/ml$ ethanol extracts of spirulina were as much as that of $10^{-8}$M standard solution (17$\beta$-estradiol) and activity of $5\mug/ml$ ethanol extract of spirulina was as much as that of $10^{-10}$ M standard solution. However, no significant estrogenic activity was observed using sea lettuce extract. Estrogenic activities of marine animals, such as star fish and shrimp, were also evaluated using this system, however, no significant estrogenic activity was observed in these extracts. In this result, it is confirmed that spirulina extract possesses estrogenic compound.
Journal of the Korean Society for Marine Environment & Energy
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v.10
no.2
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pp.86-92
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2007
In this study, we tried to quantitatively study the distribution of estrogenic activity in sediment from Gwangyang Bay by E-screen assay. Besides, we compared the estrogenic activity and the concentration of chemical pollutants. The highest estrogenic activity was recorded at the stations(GY6 and GY8) close to industrial complex and the river mouth of Seomjin. These results obtained from the E-screen assay similar to those of simultaneous analytical detection of 310 chemicals. In particular, GY6 and GY8 sites are confirmed as the full agonist sites because of their RPE values were over 90% having strong estrogenic effect. Also, their EEQ(Estradiol Equivalency Quantity) values are 35.6 ng/g and 14.6 ng/g, low than that of other sites, and these results suggests that have relatively high estrogenic efficiency in Gwangyang Bay. From these results, we can estimate that the stations close to industrial complex and the river mouth of Seomjin are major sources of endocrine disrupter in Gwangyang Bay. On the other hand, when we tried to compare the endocrine disrupter activity and $COD_{Mn}$ value, that is not correlated.
유기염소계 농약은 화학적으로 안정하고, 지용성이 크며 체내 대사에 대해 저항성을 가지고 있어서 인체 및 생태계의 생물체 중 축적성이 매우 크다. 또한 대부분 내분비계 장애물질로 분류되어 있어 관심의 대상이 되고 있다. 유기염소계 농약은 잔류성으로 인하여 사용이 금지되었음에도 불구하고 인체에서 검출되고 있으며 한국인의 지방조직을 분석한 결과 9종의 유기염소계 농약이 주로 축적되어 있음이 보고된 바 있다. 본 연구에서는 이들 유기염소계 농약의 에스트로겐 활성을 MCF-7 BUS cell을 이용한 E-screen assay competitive binding assay 및 pS$_2$ gene experession assay에 의해 조사하였다. o,p'-DDT,p, p'-DDT,p,p'-DDD,p,p'-DDE등 4종의 유기염소계 농약은 에스트로겐 수용체에 대한 ligand의존적인 작용기전에 의해 에스트로겐 활성을 가지며, $\alpha$-, $\beta$-, ${\gamma}$-, $\delta$-BHC, dieldrin등 5종의 유기염소계 농약은 lingand-비의존적 작용기전에 의해 에스트로겐 활성을 보였다. 또한 이들 유기염소계 농약을 혼합 투여하여 에스트로겐 활성을 관찰한 결과 DDT류의 경우에는 단독투여시 보다 그 대사체와 혼합 투여할 때 에스트로겐 활성에 상승적 효과가 나타났으며 o,p'-와 p,p'-DDT의 두 이성질체를 혼합 투여할 경우가 단독 투여시 보다 상승적 효과가 나타났다. 따라서 지방조직에서 검출되는 유기염소계농약은 상호작용에 의해 개별 물질이 나타내는 내분비계장애작용 보다 실제로는 강한 효과를 나타낼 것으로 추정되었다.
자궁내 반응에 대한 용량 의존적인 효과를 검색하기 위해 에스트로겐 agonist 및 antagonist를 사용하여 미성숙 랫드에서 uterotrophic assay를 실시하였다. 김(2000) 등은 이미 난소절제랫드를 이용한 3-day uterotrophic assay에서 에스트로겐성 물질에 대한 검색 시험을 실시한 바 있다. 양성대조물질인 17-ethinyl estradiol (EE)을 미성숙랫드에 매일 3일간 피하 투여하였으며, EE의 에스트로겐 활성을 차단하기 위한 항에스트로겐성 물질인 ZM189.154은 EE와 병행 투여하였다. 본 시험 결과 EE 1.0$\mu\textrm{g}$/kg 이상 투여군에서는 자공 비대와 fluid 저류등이 대조군에 비해 육안적으로 뚜렷하게 나타났다. 자궁무게(wet 및 blotted)는 용량 의존적으로 증가하였으며, 특히, EE 1.0$\mu\textrm{g}$/kg 이상에서는 유의성있는 증가를 나타내었다. 또한 질무게 증가도 자궁무게 증가와 일치 하였다. EE 0.3$\mu\textrm{g}$/kg을 투여한 후 ZM189, 154 0.1 mg/kg 및 1.0 mg/kg 투여와 비교할 때 EE에 의해 유도된 에스트로겐 활성이 용량 의존적으로 감소되었으나 유의성 있는 결과는 ZM189, 154 1.0 mg/kg군에서만 나타났다. 본 연구결과 EE는 uterotrophic assay에서 자궁 무게 (wet와 blotted)를 용량 의존적으로 증가시켰으며, ZM189, 154 1.0mg/kg은 EE의 에스트로겐 활성을 유의하게 감소시켰다. 따라서 미성숙 랫드를 이용한 3-day uterotrophic assay는 내분비계 장애물질 검색 시험법으로 우수하다는 것을 알 수 있었다.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.28
no.7
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pp.697-703
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2006
Endocrine disruptors were measured with GC/MS in effluents discharged from sewage treatment processes in pilot scale for the purpose of water reuse. From that analysis, we compared the removal rate of them by treatment processes. Nonylphenol was mainly detected in effluents and high concentration from 0.36 to 0.94 ${\mu}g/L$. $17{\beta}$-estradiol(E2) and $17{\alpha}$-ethynylestradiol(EE2) were detected as below the limit of detection in effluent. Endocrine disruptors were removed effectively in the range from 50 to 100% by treatment process. EC50 value($9.0{\times}10^{-3}$ M) of $17{\beta}$-estradiol(E2) by dose response curve of E-screen assay has higher than that of bisphenol A($2.736{\times}10^{-5}M$) and p-octylphenol($9.760{\times}10^{-6}$ M). These results showed that alkylphenols have lower relative estrogen potency than other estrogens such as $17{\beta}$-estradiol(E2). Calculated estrogenic activity(ng-EEQ/L) was 2 times higher than measured total estrogenic activity which estimated by E-screen assay. Moreover estrogenic activity of effluent by treatment process showed very low as below 1 ng-EEQ/L.
Kim, Min Young;Jang, Gwi Yeong;Ji, Yeong Mi;Kim, Kyung Mi;Kim, Hongsik;Lee, Junsoo;Jeong, Heon Sang
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.45
no.10
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pp.1430-1437
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2016
This study was performed to investigate the changes in isoflavone composition, estrogenic activity and antiestrogenic activity of soybean cultivars of different isoflavone content (Aga 8, Uram, Cheongja 3, and Dawon) with germination. Total isoflavone contents of Aga 8, Dawon and Cheongja 3 was increased from 2,671.74, 261.08 and 2,240.08 to 2,977.50, 966.13 and $2,354.11{\mu}g/g$, respectively after germination except for Uram cultivars, and highest contents of total isoflavone showed $2,977.50{\mu}g/g$ and $2,354.11{\mu}g/g$, respectively in Aga 8 and Cheongja 3 after germination. MTT cell proliferation assay using MCF-7 cells revealed that germinated soybean of Aga 8 and Cheonja 3 obtained not only contained a high content of isoflavone but also had estrogenic activity. Estrogenic activity of Aga 8 and Cheongja 3 soybean extracts increased from 116.21% and 101.60% to 135.34% and 121.05% after germination. These results suggest that germinated soybean of Aga 8 and Cheongja 3 might have a potential preventive effect on estrogen-deficient diseases.
The aim of this study is to evaluate the estrogenic activity of Cucurbita pepo seed extract which includes ${\beta}-sitosterol$ and other phytosterols. Sample was extracted from Cucurbita pepo seed by supercritical carbondioxide method and resuspended with ethanol. Estrogenic activity was measured by recombinant yeast assay which detects estrogenic activity using recombinant yeast with high level of estrogenic receptor. However, estrogenic activity of pumpkin seed extract was not found in this study. Based on this data, pumpkin seed extract will not cause estrogenic disturbance.
This study evaluates the effect of dissolved effluent organic matter (SE-dEfOM) from sewage wastewater treatment plants on the adsorption and estrogenic activity of bisphenol A (BPA). Specific ultraviolet absorbance and fluorescence index analyses indicated that SE-dEfOM was mainly microbially derived non-humic substances differed from Suwannee River natural organic matter (SR-NOM) as reference. Both Langmuir and Freundlich models successfully explained the adsorption of BPA onto both SE-dEfOM and SR-NOM. Additionally, the SE-dEfOM showed higher binding capacities and affinities for BPA than those of SR-NOM, resulting in better reduction of the estrogenic activity of BPA. These findings suggest that the binding and toxicity of BPA are largely dependent on the source of organic matters.
In order to evaluate estrogenic compounds in brown algae, an in vitro test system for the verification of estrogenic activity was applied. Fractions from ethanol extracts of each brown alga were prepared by a systematic fractionation procedure with solvents such as $H_2O$, hexane, butanol and methanol. Aqueous fractions of brown algae showed the highest estrogenic activities. Estrogenic activities of $500\;{\mu}g/ml$ aqueous fractions of Undaria pinnatifida and Laminaria japonica showed almost the same strength as that of $10^{-7}\;M$ standard solution ($17{\beta}$-estradiol). Furthermore, estrogenic activities of $500\;{\mu}g/ml$ aqueous fractions of Ecklonia stolonifera and Porphyra suborbiculate represented higher activities than that of $10^{-8}\;M$$17{\beta}$-estradiol. These observations suggest that aqueous fractions of all these brown algae are expected to possess estrogenic compounds and could be developed as estrogenic agents for postmenopausal disorder.
This study investigates the effect of effluent organic matter (EfOM) from sewage wastewater treatment plants on estrogenic activity reduction of bisphenol A (BPA) by UV photolysis. The EfOM and Suwannee River natural organic matter (SR-NOM) as reference were isolated into hydrophobic (HPO), transphilic (TPI) and hydrophilic (HPI) fractions depending on polarity. The specific ultraviolet absorbance (SUVA) analysis indicated that EfOM showed similar properties to microbially derived organic matters with low hydrophobicity, which is different from SR-NOM having high hydrophobicity. UV irradiation upto 3 hr significantly reduced SUVA values of both EfOM and SR-NOM (p<0.0001), depending on the polarity of organic matters. In the absence of organic matters, the relative estrogenic activity (REA) of BPA ($5.0{\times}10^{-5}M$) was decreased from 86% to 63% by UV photolysis (2 hr). However, the decrease of mean REA was from 68% to 37% in the presence of organic matters, which was significantly independent on the type (EfOM or SR-NOM) and polarity (HPO, TPI or HPI) of organic matters (p>0.05). As a result, the reduced REA by UV photolysis of BPA with and without organic matters was 31% and 23%, respectively, suggesting that both EfOM and SR-NOM accelerated the photolytic reduction of BPA estrogenic activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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