Parkinson's disease is known to exhibit progressive degeneration of the dopaminergic neurons in the substantia nigra via inhibition of glutathione metabolism. It is well known that 6-Hydroxydopamine (6-OHDA) induces Parkinson's disease-like symptoms, while resveratrol (3,5,4'-trihydroxystilbene) has been shown to have anti-inflammatory and antioxidant effects. In the present study, we investigated the neuroprotective effects of resveratrol, a phytoalexin found in grapes and various plants, on 6-OHDA-induced cell damage to the SH-SY5Y human neuroblastoma cell line. Resveratrol (5 and 10 ${\mu}M$) inhibited 6-OHDA (60 ${\mu}M$)-induced cytotoxicity in SH-SY5Y cells and induced a reduction of the number of apoptotic nuclei caused by 6-OHDA treatment. Additionally, the total apoptotic rate of cells treated with both resveratrol (10 ${\mu}M$) and 6-OHDA (60 ${\mu}M$) was less than that of 6-OHDA treated cells. Resveratrol also dose-dependently (1, 5 and 10 ${\mu}M$) scavenged reactive oxygen species (ROS) induced by 6-OHDA in SH-SY5Y cells and prevented depletion of glutathione in response to the 6-OHDA-induced cytotoxicity in the glutathione assay. Overall, these results indicate that resveratrol exerts a neuroprotective effect against 6-OHDA-induced cytotoxicity of SH-SY5Y cells by scavenging ROS and preserving glutathione.
Lee, Jong Boon;Hwang, Kyoung Min;Yoo, Tae-Won;Bae, Chang-Hwan;Kwon, Sunoh;Kim, Seung-Tae
Korean Journal of Acupuncture
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v.30
no.1
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pp.73-80
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2013
Objectives : LI11 has been known to suppress epileptic seizure. Using an mouse epilepsy model, we investigated whether acupuncture stimulation at LI11 can suppress kainic acid(KA)-induced epileptic seizure and apoptosis in the mouse hippocampus. Methods : Eight-week-old male C57/BL6 mice(20~25 g) were given acupuncture at LI11 or ST36 once a day for 3 days. After the last acupuncture stimulations, KA(30 mg/kg) was injected intraperitoneally and the degree of seizure was observed for 90 minutes. Twenty-four hours after KA administration, mice were sacrificed and the neural cell death, astrocyte activation and caspase-3 expression in their hippocampi were investigated. Results : Acupuncture stimulation at LI11 suppressed KA-induced epileptic seizure, neuronal cell death, astrocyte activation and caspase-3 expression. Conclusions : Acupuncture stimulation at LI11 decreases the KA-induced epileptic seizure and protects hippocampal cell death via regulating astrocyte activation and caspase-3 expression.
The leaves of Perilla frutescens Britt. var. japonica Hara (Labiatae) are often used in gourmet food in several Asian countries. Two kinds of perilla cultivars, Namcheon (NC) and Bora (BR), have been respectively developed in Korea by the pure line of 'deulkkae' from the local variety and by the cross of 'deulkkae' and 'chajogi'. The present study evaluated and compared antioxidant and neuroprotective effects of the fractions prepared from the leaves of the two cultivars using cell-free bioassay systems and primary cultured rat cortical cells. We found that the spirit, chloroform, hexane and butanol fractions from NC and BR leaves inhibited lipid peroxidation initiated in rat brain homogenates by $Fe^{2+}$ and L-ascorbic acid. In contrast, only the spirit and butanol fractions from both cultivars exhibited 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical scavenging activity. Among the fractions tested, the butanol fractions from NC and BR leaves exhibited the most potent antioxidant properties, and the butanol fraction from BR was more potent than the NC fraction. In consistence with these findings, the butanol fractions from both cultivars protected primary cultured cortical cells from the oxidative damage induced by $H_2O_2$ or xanthine and xanthine oxidase, with the BR butanol fraction being more active. The butanol fractions from NC and BR did not produce cytotoxicity in our cultures treated for 24 h at the concentrations of up to $100\;{\mu}g/ml$. Taken together, these results indicate that the leaves of the two cultivars of Perilla frutescens exert antioxidant and neuroprotective effects, and that the butanol fraction from BR leaves exhibits the most potent antioxidative neuroprotection among the fractions tested in this study.
Dried leaves from Cedrela sinensis A. Juss. (CS), have been observed to possess various pharmacological activity and contain various antioxidant constituents. The protective effect of ethanol extract of CS on hydrogen peroxide $(H_2O_2)-induced$ neurotoxicity was examined using primary cultured rat cortical neurons in the present study. Exposure of cultured neurons to 100 ${\mu}M\;H_2O_2$ caused a significant neuronal death as assessed by a 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide (MTT) assay and Hoechst 33342 staining. The addition of CS, over a concentration range of 10 to $50{\mu}g/m{\ell}$, concentration-dependently prevented the $H_2O_2-induced$ neuronal apoptotic death. CS $(50{\mu}g/m{\ell})$ significantly inhibited $H_2O_2-induced$ elevation of the cytosolic $Ca^{2+}$ concentration $([Ca^{2+}]_c)$, which was measured by a fluorescent dye, Fluo-4 AM. CS (30 and $50{\mu}g/m{\ell})$ inhibited glutamate release and generation of reactive oxygen species (ROS) induced by $100{\mu}M\;H_2O_2$. These results suggest that CS may mitigate the $H_2O_2-induced$ neurotoxiciy by interfering with the increase of $[Ca^{2+}]_c$, and then inhibiting glutamate release and generation of ROS in cultured neurons.
Lee, Ah Young;Choi, Ji Myung;Lee, Sullim;Kim, Hyun Young;Lee, Sanghyun;Cho, Eun Ju
Korean Journal of Pharmacognosy
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v.44
no.3
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pp.263-268
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2013
The protective role against oxidative stress under cellular system using C6 glioma cells was studied using the ethyl acetate (EtOAc) fraction, luteolin (1), and luteolin-7-glucoside (2) of Taraxacum coreanum. C6 glioma cells showed low cell viability and high generation of reactive oxygen species (ROS) by the treatment with generator of hydrogen peroxide ($H_2O_2$) and amyloid beta ($A{\beta}_{25-35}$). However, the treatment of the EtOAc fraction attenuated the cellular oxidative stress, resulting in significant elevation of cell viability. In addition, the production of ROS formation was also decreased by the treatment of the EtOAc fraction. Compounds 1 and 2 were isolated from the EtOAc fraction, and the protective effect was evaluated. Compounds 1 and 2 led to the increase of cell viability and decrease of production of ROS against oxidative stress by $H_2O_2$ and $A{\beta}_{25-35}$. The present study indicated that the EtOAc fraction, compounds 1 and 2 from T. coreanum demonstrated protective effects against oxidative stress, suggesting the preventive role against neurodegenerative diseases.
Objectives To evaluate the neuroprotective effects of Hyangsayangwi-tang (HY), a Korean traditional medicinal prescription in a Parkinson's disease mouse model. Methods Four groups(each of 10 mouse per group) were used in this study. The neuroprotective effect of HY was examined in a Parkinson's disease mouse model. C57BL/6 mouse treated with 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP, 30mg/kg/day), intraperitoneal (i.p.) for 5 days. Slow behavioral responses and memory disorder is the major clinical symptoms of PD. In order to investigate the effect of HY on recovery of behavioral deficits and memory, we examined the motor function and memory by using Morris water maze and Forced swimming test. Ischemic mouse brain stained with TTC(2,3,5 triphenyl tetrazolium chloride) in the MPTP-induced Parkinson's disease to find out ischemia and tissue damage in mouse. The convenient, simple, and accurate high-performance liquid chromatography (HPLC) method was established for simultaneous determination of neurotransmitters in MPTP-HY group. To measure the amount of dopamine in mice brain, striatum-substantia nigra, was examined by Bradford assay. Immunohistochemistry was examined in the MPTP-induced Parkinson's disease (PD) mouse to evaluate the neuroprotective effects of Hyangsayangwi-tang on hippocampal lesion, ST and SNpc. Results and Conclusions Hyangsayangwi-tang (HY) prevents MPTP-induced loss of serotonin, hippocampus and TH-ir cell.
Park, Eun-kuk;Han, Kyung-Hoon;Lee, Seung-Hee;Kim, Nam-Ki;Bae, Mun-Hyoung;Seo, Young-Ha;Yong, Yoon-joong;Jeong, Seon-Yong;Choi, Chun-Whan
The Korean Journal of Food And Nutrition
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v.31
no.6
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pp.865-872
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2018
In neuronal cell deaths, oxidative stress is normally implicated with a most of these deaths occurring in neurodegenerative disorders such as the Alzheimer's and Parkinson's diseases. In this study, the neuroprotective effects of Schisandra chinensis (SC) and Ribes fasciculatum (RF) extracts on hydrogen peroxide ($H_2O_2$)-induced oxidative stress in neuroblastic cell line were investigated. For an hour, hydrogen peroxide of $100{\mu}M$ concentration, was induced on neuroblastic cells, causing apoptic cell death. For the neuroprotection, a sample of neuroblastic cells had been pre-treated with SC and RF extracts for 24 hours before application of the hydrogen peroxide. No neurotoxic effects were observed in the cells that had been treated by SC and RF. This prove that the treatment of SC and RF extract prevented apoptotic cell death of neuroblastic cell line exposed to oxidative injury. In addition, applying both SC and RF extracts at a 7:3 ratio increased the neuronal cell survival rate, compared to individual treatments of SC and RF extract. This study suggests that SC and RF extracts may be potential therapeutic agents for the prevention of neuronal cell death.
Objectives : This study was conducted to evaluate the Intraocular pressure (IOP) and retina neuroprotective effect of Acer palmatum thumb. extract in glaucoma of DBA2/J mice vivo model. Methods : The amount of change in intraocular pressure(IOP) was measured every two weeks for 30 weeks in the DBA2/J glaucoma animal model. The increased IOP were regrouping into drug treatment groups. EW and EE (1, 2 mg/㎖)extract was eye drop administered twice per day for 8 weeks. After administration of the extract, IOP was measured every 1 week at a fixed time for 8 weeks, and protein expression levels and serological changes related to retinal function were investigated. Results : The DBA2/J mice were IOP increased as time dependent, resulting in damage to the retinal function protein related in glaucoma animal model. However, administration of extracts from Leaves of Acer palmatum thumb. prevented an increase IOP, increased for Brn3α, PKCα, and OPN1SW. Additionally, the experssion of Aterocyte maker, GFAP was decreased in DBA2/J mice. Conclusions : These results demonstrate that both IOP and age can be considered in studies using DBA2/J mice and suggest that the extracts from Leaves of Acer palmatum thumb. regulating of IOP and expression of proteins related to retinal function.
Objectives : The purpose of this study is to investigate neuroprotective effects and molecular mechanisms of luteolin against ${\beta}$-amyloid ($A{\beta}_{25-35}$)-induced oxidative cell death in BV-2 cells. Methods : The protective effects of luteolin against $A{\beta}_{25-35}$-induced cytotoxicity and apoptotic cell death were determined by MTT dye reduction assay and TUNEL staining, respectively. The apoptotic cell death was further analyzed by measuring mitochondrial transmembrane potential and expression of pro- and/or anti-apoptotic proteins. To elucidate the molecular mechanisms underlying the protective effects of luteolin, intracellular accumulation of reactive oxygen species, oxidative damages, and expression of antioxidant enzymes were examined. Results : Luteolin pretreatment effectively attenuated $A{\beta}_{25-35}$-induced apoptotic cell death indices such as DNA fragmentation, dissipation of mitochondrial transmembrane potential, increased Bax/Bcl-2 ratio, and activation of c-Jun N-terminal kinase and caspase-3 in BV-2 cells. Furthermore, $A{\beta}_{25-35}$-induced intracellular formation of reactive oxygen species and subsequent oxidative damages such as lipid peroxidation and depletion of endogenous antioxidant glutathione were suppressed by luteolin treatment. The neuroprotective effects of luteolin might be mediated by up-regulation of cellular antioxidant defense system via up-regulation of ${\gamma}$-glutamylcysteine ligase, a rate-limiting enzyme in the glutathione biosynthesis and superoxide dismutase, an enzyme involved in dismutation of superoxide anion into oxygen and hydrogen peroxide. Conclusions : These findings suggest that luteolin has a potential to protect against $A{\beta}_{25-35}$-induced neuronal cell death and damages thereby exhibiting therapeutic utilization for the prevention and/or treatment of Alzheimer's disease.
Ju, In Gyoung;Lee, Seungmin;Choi, Jin Gyu;Oh, Myung Sook
The Korea Journal of Herbology
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v.34
no.5
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pp.29-37
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2019
Objectives : Bang-poong (Saposhnikovia divaricata; SD) was traditionally used to treat inflammatory disorders. In this study, we aimed to investigate whether Bang-poong and related species including SD, Glehnia littoralis (GL), and Peucedanum japonicum (PJ) possess neuroprotective effects and acetylcholinesterase (AChE) inhibitory activities. Methods : Roots of SD, GL and PJ were extracted with distilled water (DW) or 70% ethanol (EtOH). We assessed 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) free radical scavenging activities of the extracts. To examine neuroprotective effects, we measured cell viability in PC12 or HT22 cells after treatment of the extracts with $H_2O_2$ or amyloid-beta ($A{\beta}$). To assess anti-neuroinflammatory effects, we measured the nitric oxide (NO) levels after treatment with the extracts and lipopolysaccharide (LPS) in BV2 microglial cells. In addition, we performed AChE inhibition assay to explore effects of the extracts on the cholinergic system. Results : DW and EtOH extracts of SD, GL and PJ showed mild DPPH free radical scavenging activities. Also, DW extracts of GL and PJ showed protective effects against $H_2O_2$-induced toxicity in PC12 cells. In LPS-activated BV2 cells, EtOH extracts of SD, GL and PJ exerted inhibitory effects on NO production. Meanwhile, DW extracts of SD, GL and PJ inhibited the $A{\beta}$-induced cell death in HT22 cells. In addition, DW and EtOH extracts of GL exhibited remarkable inhibitory activities on AChE. Conclusions : We demonstrated that SD, GL and PJ exert anti-oxidative, anti-neuroinflammatory and AChE inhibitory activities. These results indicate that SD, GL and PJ could be potential candidates for neurological disorders.
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