This study was carried out to evaluate the suitability of microsatellite markers for varietal identification and genetic relationship of 170 commercial pepper cultivars. The relationship between marker genotypes and 11 pepper cultivars with different morphological traits was also analyzed. Of the 302 pairs of microsatellite primers screened against 11 pepper cultivars, 24 pairs were highly polymorphic in terms of number of alleles. These markers were applied for the construction of DNA profile data base for 170 commercial pepper cultivars. A total of 164 polymorphic amplified fragments were obtained from 24 microsatellite primers. The average polymorphism information content was 0.673 ranging from 0.324 to 0.824. One hundred and sixty four microsatellite alleles were used to calculate Jaccard's distance coefficients using unweighted pair group method. A clustering group of varieties, based on the results of microsatellite analysis, were categorized into 3 major groups corresponding to morphological traits. The phenogram discriminated all varieties by markers genotypes. These microsatellite markers will be useful as a tool for protection of plant breeders' intellectual property rights through variety identification in distinctness, uniformity and stability test.
The present study investigated identification of cultivars through phylogenetic analysis of 108 Citrus varieties and related cultivars using simple sequence repeat (SSR) markers. Two hundred three SSR primer pairs were used to detect polymorphic markers among 8 Citrus cultivars consisting of 4 mandarins, 1 orange, 1 tangor, 1 tangelo, and 1 pumelo. Eighteen SSR primer pairs were reproducible and showed highly polymorphic alleles. These markers were applied to assess genetic variations of the 108 varieties. Each marker detected 5-14 alleles, with an average of 9.28. The polymorphism information content varied from 0.417 to 0.791 with an average of 0.706. Cluster analysis with SSR markers resulted in 13 major groups reflecting cultivar types and pedigree information. Twelve orange cultivars in the $I-1^{st}$ sub-cluster and 23 mandarin cultivars in the $II-1^{st}$ sub-cluster, respectively, were not discriminated using the SSR markers. This could be due to narrow genetic backgrounds originated through bud mutation or nucellars seedlings. The SSR profile database of Citrus cultivars will be useful as a tool for protection of plant breeders' intellectual property rights in addition to assessing genetic diversity in Citrus cultivars and germplasms.
Sin, Seong-Cheol;Jeong, Hwa-Cheol;Kim, Hui-Seon;Jeon, Sang-Hui;Gwon, Su-Yeon;Kim, Bo-Hyeon;Jeong, Gu-Yong;Jeong, Eui-Ryong
Proceedings of the Korean Society for Food Science of Animal Resources Conference
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2006.05a
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pp.112-116
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2006
본 연구는 인간과 동물의 식욕조절, 에너지 대사, 체지방 축적 및 지방 대사에 핵심적인 역할을 담당하는 비만 유전자 leptin의 SNP를 검색하고, 이들 SNP 마커와 한우의 도체 및 육질형질들과의 연관성을 구명하여 고급육 생산 한우 조기 선발 및 육질 진단을 위한 분자 표지 마커로 활용하기 위하여 수행하였다. 한우 leptin 유전자의 exon 2 및 3번 영역을 포함한 염기서열 분석결과 총 3개의 SNP를 검출하였고, PCR-RFLP및 SSCP기법을 이용하여 SNP유전자형을 분석한 결과 exon 2 영역 내 C1180T SNP부위가 한우의 근내 지방도 및 등지방 두께와 유의적인 연관성(p<0.05)이 있는 것으로 나타났다. 따라서, 본 연구를 통해 개발된 한우 leptin 유전자의 특정한 SNP marker는 근내 지방도가 우수한 고급육을 생산하는 한우의 조기식별 및 마블링 등 육질진단에 매우 유용한 DNA 표지인자로 활용할 수 있을 기대된다.
Sin, Seong-Cheol;Sin, Gi-Hyeon;Park, Jong-Geun;Lee, Jun-Je;Baek, Myeong-Gi;Heo, Yeon-Beom;Chae, Ji-Seon;Jeong, Gu-Yong;Jeong, Ui-Ryong
Proceedings of the Korean Society for Food Science of Animal Resources Conference
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2005.10a
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pp.119-122
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2005
본 연구는 한우 근내 지방 축적 기작을 구명하고 고급육과 저급육에서 차등 발현되는 유전자를 발굴 동정하여 한우 육질 진단을 위한 분자 표지 마커로 활용하기 위해 GeneFishing PCR 기법을 이용하여 한우 육질등급에 따른 등심조직에서 차등적으로 발현되는 유전자를 분석하였다. 한우 육질 등급($1^+$ 등급 vs 3 등급)간에 총 10개의 차등 발현 유전자가 확인되었고 이 가운데 고급육 한우 등심에서 발현량이 높은 유전자가 4개 그리고 저급육 등심에서 발현량이 높은 유전자 6개가 각각 검출되었다. 발현량 차이 유전자를 cloning하여 염기서열을 분석하고 상동성 검색을 실시한 결과 고급육에서 발현량이 높은 DEG는 주로 EST(expressed sequence tag) 유전자들로 밝혀졌고 저급육에서 발현량이 높은 DEG는 malate dehydrogenase 2(MDH2), myosin heavy chain 2a, triosephosphate isomerase 1(TPI 1), actin, alpha 1, skeletal muscle(ACTA1 ) 유전자들로 동정 되었다. 본 연구를 통해 한우 육질간 차등 발현되는 유전자들은 한우 육질 및 등급판정을 위한 표지인자(marker)로 활용할 수 있어 유전자 마커를 이용한 고급육 생산 한우의 육질 조기진단이 가능할 것이다.
배 경 편평상피암은 두경부의 악성종양 중 가장 흔하며, 임상적인 경과가 불량하다. 따라서 나쁜 예후를 가지는 환자군을 조기에 선별하여 더 적극적인 치료의 시행을 결정짓는 표지자의 필요성이 대두된다. 우리는 일련의 두경부 편평세포암 검체에서 몇몇 분자 표지자의 예후적 유용성을 평가하고자 하였다. 방 법 23예의 두경부 편평세포암 검체를 대상으로 VEGF, p53, Apaf-1, caspase-9의 발현과 몇몇 임상병리학적 지표들간의 연관성을 면역조직화학염색을 통해 조사하였다. 결 과 환자군은 남성이 더 많았으며 평균연령은 63.7세였다. 1기가 5예, 2기가 2예, 3기가 8예, 4기가 8예였다. 평균생존기간은 37.3개월이었다. VEGF단백 발현은 종양의 크기와 통계적으로 유의한 연관성을 보였다. 이와 더불어 VEGF단백 발현은 병기, 그리고 림프관 침습과 연관적인 경향성을 보였다. 그러나 VEGF단백 발현과 생존기간과는 관련성이 없었다. 또한, Apaf-1과 caspase-9의 단백발현은 다른 임상지표, 환자의 생존기간과는 관련이 없었다. 결 론 VEGF단백 발현은 두경부 편평세포암 환자에서 나쁜 임상경과를 예측할 수 있게 하는 표지자로서의 역할을 할 수 있다. 또한 본 연구는 두경부 편평세포암에서 별로 연구되지 않은 Apaf-1과 caspase-9의 발현상태를 밝힌 점에서 의의가 있다.
This study presents fabrication of bi-compartmental particles labeled by multiple fluorescence. To compartmentalize fluorescent expression at the particle, two fluorescent dyes with less overlap of the excitation and emission spectra are selected. To ensure the fluorescence stability, the fluorescent dyes contain acrylate functional groups in the molecules so that they can be cross-linked together with monomers constituting the particle. Strong fluorescent expression and compartmentalization were observed at the particle fabricated using the selected fluorescent dyes through confocal microscopy. Furthermore, long-term fluorescence stability was verified by measuring fluorescent expression and intensity for 4 weeks. We anticipate that the bi-compartmental particles labeled by multiple fluorescence can be widely used for multi-target drug delivery system, analysis of 3 dimensional Brownian motion, and investigation of 3 dimensional complex self-assembled morphologies.
Purpose: Marrow stromal cells (MSCs) have been known for their potential to trans-differentiate into neural and glial cells in vitro and in vivo. To investigate the influence of the developing host environment on the survival and morphological and molecular differentiation, murine MSCs transplanted into the eye of Brazilian opossum (Monodelphis domestica). Methods: Enhanced green fluorescent protein (GFP) - expressing MSCs were transplanted into developing Brazilian opossums. Animals were allowed to survive for up to 4 weeks after transplantation, at which time the eyes were prepared for immunohistochemical analysis. Results: Some transplanted MSCs survived and showed morphological differentiation into neural cells with some processes within the host vitreous chamber. Some transplanted cells expressed class III ${\beta}$-tubulin (TuJ1, a marker for neuronal cells) or glial fibrillary acid protein (GFAP, a marker for glial cells) or Nestin (a marker for neural stem cells). In addition, some transplanted cells were located in ganglion cell layer but did not show morphological and molecular differentiation. Conclusions: Our result show that the most effective stage of development for transplantation into the retina was postnatal day 16, which retinas developmentally corresponded to postnatal day 4-5 days mouse retina based on cell differentiation and lamination patterns. The present findings suggest that the age of the host appears to play a key role in determining cell fate in vivo.
Objective: Environmental chemicals alter reproduction, growth, and survival by changing the normal function of the endocrine system. Bisphenol A (BPA), one of the endocrine disruptors, is known to be an estrogen receptor agonist. Therefore, we hypothesized that BPA may affect male reproduction including spermatogenesis in the mouse testis. Methods: We used 7-week-old ICR mice. The first experiment group received BPA in sesame oil (vehicle, 1 mg/kg, 10 mg/kg, and 100 mg/kg) by i.p. injection and mice were sacrificed 24 hr later. The second experiment group received BPA (vehicle, 10 ${\mu}g/kg$, 1 mg/kg, and 100 mg/kg) daily for 14 days by subcutaneous injection. Expression of cell type-specific marker genes in the testis was evaluated by RT-PCR. Histological analysis, immunofluorescence staining, and TUNEL staining were also performed. Results: RT-PCR analyses showed that expression of luteinizing hormone receptor (LHR), a marker gene for the Leydig cell, was notably decreased in the testes of high dose-exposed mice. No obvious difference in the histology of testes was noted among treatment groups. Immunostaining of LHR in the first experiment group did not show noticeable difference in LHR protein expression in Leydig cells. Immunohistochemistry also revealed heightened expression of the immunoreactive Bax in the treatment group, and this was accompanied by positive TUNEL staining in the interstitial area within testis where Leydig cells reside. Conclusions: Our result suggests that BPA affects Leydig cell functions by altering gene expression and by increasing apoptosis in the mouse testis.
Kim, Woo-Jae;Baek, Man-Kee;Park, Hyeon-Su;Lee, Geon-Mi;Lee, Chang-Min;Kim, Seok-Man;Cho, Young-Chan;Seo, Jeong-Phil;Jeong, O-Young
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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v.65
no.4
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pp.314-326
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2020
This study was carried out to develop a resistant variety against the K3a race of bacterial blight, Xanthomonas oryzae pv. oryzae, through expansion and pyramiding of resistance genes. To develop an elite bacterial blight-resistant cultivar, the breeding process and bacterial blight resistance reactions in advanced backcross lines (ABLs) were analyzed. ABLs21 which contain Xa3 and Xa21, were developed by double backcrossing japonica cultivar Hwanggeumnuri, which has bacterial blight resistant Xa3 gene, and indica variety IRBB21, which havs Xa21 gene, followed by disease resistance bioassay and marker-assisted selection. The resistance genes of ABLs21 were amplified by PCR with the molecular markers 9643.T4 (Xa3) and U1/I1 (Xa21). Hwanggeumnuri and IRBB3 showed resistance reactions against K1, K2, and K3 races, and a susceptible reaction against K3a, K4, and K5 races. IRBB21 showed resistance reactions against K2, K3, K3a, K4 and K5 races, and a susceptible reaction against K1 race. Hwanggeumnuri showed susceptible reactions at the seedling, tillering and adult stages (all stages), whereas ABL21-1 showed moderate resistance at the tillering stage. ABL21-1 showed stable resistance against 18 isolates of K3a race, and the lesion length was shorter than that of the donor parents. In cluster analysis, the HB4032 isolate showed the highest pathogenicity among the 18 isolates. The molecular marker polymorphisms and average substituted chromosome segment lengths of ABLs21 were 63.2 % and 86.1 cM, respectively. Insertion of the donor chromosomal segments occurred in the predicted region of the Xa21 gene of ABLs21.
Purpose: Small size of recombinant scFv antibody has many advantages such as rapid blood clearances and improved targeting antibodies to tumor region. On the other hand owing to small size, number of amino group is insufficient in conjugation with chelator and fluorescence labeling. This study is to introduce poly lysine tag to the C-terminal end of scFv lym-1 sequence for fluorescence chelator conjugation. Materials and Methods: Poly lysine scFv lym-1 gene, cloned into pET-22b (+) vector, was expressed in E. coli BL21 (DE3) strain. Antibody purification was performed with Ni-NTA column and then size exclusion column chromatography. Expression and purification levels of poly lysine tagged scFv lym-1 antibody were confirmed by western blot analysis. I-124, I-125, I-131 and Tc-99m were used for radiolabeling of purified poly lysine scFv lym-1. Flow cytometry analysis of FIT( conjugated poly lysine scFv lym-1 was performed for confirmation of immunoreactivity of human Burkitt's lymphoma cells. Results: Poly lysine scFv lym-1 antibody was purified through two steps and identified as molecular weight of 48 KDa. Radiolabeling yields of I-124, I-125, I-131 and Tc-99m into poly lysine scFv lym-1 were >99%, >99%, >95% and >99%, respectively. Flow cytometry analysis of poly lysine scFv and scFv lym-1 was showed similar immunoreactivity to human Burkitt's lymphoma cells. Conclusion: Poly lysine tag was useful for the sufficient number of amino groups to scFv lym-1 antibody for chelator conjugation with minimizing loss of immunoreactivity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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