Immature zygotic embryos from immature seeds of Wasabia japonica (cv Dalma) were isolated and cultured on modified MS medium supplemented with 2,4-D, IAA, and BA. Immature zygotic embryos were classified into torpedo shape and cotyledon stage. The highest rates of callus formation were obtained of 1.0mg/L IAA(torpedo stage, 90.0%)and 1.0mg/L 2,4D plus 0.1mg/L BA(cotyledany stage,84.3%). Somatic embryos after 60 days of culture. These numerous somatic embryo could be seperated and subcultured on the same media for further propagation. After 90 days of culture, most somatic embryos were developed well organized embryos which were able to produce into whole plants.
To define natural embryo growth and germination of the Korean ginseng (Panax ginseng C.A.Meyer) seed, freshly harvested and depulped seeds were seeded on nursery bed at Aug. 5 without stratification. At 100 days after seeding, embryo/endosperm length ratio of the seeds in nursery bed was higher than that of the seeds which were stratified with conventional method for 100 days. And also there was no significant difference between dehiscence ratio of the seeds in nursery bed and that from stratification with sand. The germination ratio of the ginseng seeds seeded without stratification at Aug. 5 was about 57% in average of 2 years and was not significantly lower than that of the seeds seeded after stratification at Nov. 15. And there were also no significant differencies of plant growth after germination between the ginseng seedlings from two seeding methods.
This study was conducted to establish mass propagation system from the tissue culture using immature embroys in Eleutherococus senticosus. Immature embroys from seeds were removed under the microscope and placed on modified SH and WPM medium containing several plant growth regulators. The calli were well formed on media containing 1mg/l of 2,4-D on modified SH medium and 1mg/l of 2,4-D and 3mg/l of TDZ on WPM medium. Shoot regeneration was better on modified SH or WPM medium with combination of high concentration of TDZ and low concentration of 2,4-D. Treatment of 2,4-D alone was better than treatment of TDZ alone in callus induction on modified SH medium but plant regeneration reversed. Treatment of 2.4-D and TDZ combination was better than treatment of 2,4-D alone in callus induction on WPM medium. The results of callus formation and shoot regeneration on WPM media differed to those of SH media. The rate of callus formation was nearly 83% when 2,4-D was added to SH medium on concentration of 1mg/l. The rate of callus formation was nearly 38% when combination treatment of 2,4-D 1mg/l and TDZ 3mg/l was added to WPM medium. Also, plant regeneration differed depending on the mature degree of immature embryo.
In order to investigate the effects of developmental stage of embryos and plant growth regulators on mass production of Zantedeschia spp. Southern Light, immature zygotic embryos of Zantedeschia spp. Southern Light were cultured on Murashige and Skoog(1962) basal media or containing 2,4-D, NAA and BA. Globular embryos did not grow on any of the 2,4-D, NAA and BA combinations. The most suitable stage of immature zygotic embryo culture on the induction callus and multiple shoot was at early cotyledonary embryo stage, and at this stage of embryos were germinated up to 87.5%. The whitish watery callus and yellowish compact nodular callus produced on all 2,4-D, NAA and BA media. The best combination for inducing embryogenic callus was 0.5 mgL NAA and 1.0 mg/L BA. Whitish watery calli have been subcultured for more than 8 months and have retained their producing ability, Plant regeneration was only obtained by direct shoot development and yellowish compact nodular calli. Abundant plantlets were regenerated from cotyledonary stage of embryo culture on MS medium supplemented with 0.5 mg/L NAA and 1.0 mg/L BA. Supplementation of the media with 10% coconut water showed as the best concentration for plant differentiation from direct developed of shoots. The number of regenerated plants from one embryo could be seperated 25-35s plantlets. All yellowish compact callus-derived plantlets were transferred to pots containing a mixture of vermiculite, perlite and sand(1:1;1 v/v) and 100% of divided plantlets were phenotypically normal.
For the germination and differentiation of immature embryos obtained by artificial crossing between tetraploid grape 'Fujiminori' (Vitis vinifera ${\times}$ V. labruscana) and triploid 'Summer Black' (V. labruscana ${\times}$ V. vinifera), were incubated in vitro using MS medium supplemented with $GA_3$ or coconut water (CW) at various concentrations. The percentage of embryo formation of 'Fujiminori' ${\times}$ 'Summer Black' was 64.3%. Embryo germination percentage was higher than 95% in all the $GA_3$ treatments at the concentrations of 0.01, 0.05, 0.25, and $1.25mg{\cdot}L^{-1}$. However, only 15.8-31.6% of the germinated embryos successfully developed into normal plantlets. At higher concentration of $GA_3$, the plantlets developed infirm hypocotyls with over elongated and less enlarged structure. Among the treatments of CW at the concentrations of 5, 10, 15, and 20% (v/v), 10% and 15% were more effective and plantlet achievement percentage were 68.4 and 66.7%, respectively. The addition of 10% CW was most effective to obtain plantlets with optimal shoot length, node and root numbers. 15% CW was suitable to obtain plantlets with longer roots. Accordingly, the embryo culture using the MS medium supplemented with 10-15% CW was observed to be more efficient for germinating and growing the immature embryos produced from artificial crossing between tetraploid grape 'Fujiminori' and triploid 'Summer Black'.
Immature zygotic embryos of five Korean soybean cultivars cultured on Murashige and Skoog's (MS) medium supplemented with various concentrations of 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) produced somatic embryos without forming an intervening callus. The highest frequency (up to 90%) of somatic embryo formation was obtained when zygotic embryos were cultlued on medium containing 1 to 2 mga 2, 0-D in four cultivars. However the frequency was highly variable to the cultivars. Transversely sliced primary somatic embryo halves were also capable of forming secondary embryos at frequencies of up to 70% when cultured on medium containing 0.1 to 1 mg/L 2,4-D. Somatic embryos formed on zygotic embryos cultured on medium containing 0.1 to 0.2 mg/L 2,4-D had two cotyledons more frequently than one horn-type cotyledon and those on medium containing 0.5 to 4mg/L 2,4-LD had a horm-type cotyledon at a prominently higher freequency. However somatic embryos on medium containing 10mg/L or higher concentrations of 2,4-D were usually shunted at the globular stage even after transfer to medium containing lower concentrations of 2,4-D or other growth regulators. non somatic embryos with one or two cotyledons or a hem-type cotyledon were transferred to medium containing $GA_3$, those with two cotyledons converted to plantlets at a higher frequency (25%) than the others.
In relation to shortening generation by using embryo culture of barley immature seed, it is important to find out profitable embryo age for embryo culture and to understand the relationship among embryo and other characters. Two varieties(Olbori and Dusan #12) were cultivated under two growth conditions(15/10 and 25/15$^{\circ}C$). The embryos were aseptically excised when immature seeds were collected 9, 13, 17, 21, 25 and 29 days after heading and cultured on $B_5$ medium. On the 21st day after heading, the length of embryos from top or middle part of spike was longer than that from bottom part. Embryos from bottom part under low temperature condition had the shortest length. Shoot length, root length and root number after embryo culture were little difference among three parts of spike under high temperature condition. Under low temperature, seedlings from bottom part of spike were inferior to those from top or middle part. Length of 29-day-old embryos under low temperature condition was similar to that of 17-day-old ones under high. Under high temperature condition, the length of 17-day-old embryo had positive correlation with kernel width, shoot length, root length and root number, but that of 21-day-old one didn't have. Seventeen-day-old embryos obtained from 25/15$^{\circ}C$ growth condition seem to be efficient to shortening generation by using embryo culture.
Park, Yong-Chu;Yu, Chang-Yeon;Cho, Dong-Ha;Chang, Byong-Ho;Chung, Il-Min;Ahn, Sang-Deuk
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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v.39
no.6
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pp.571-576
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1994
This study was conducted to determine the effects of embryo age, growth regulators, low temperature treatment on regeneration, plant growth, and heading in immature embryo culture of Barley. Shoot and root development was more in older than in younger excised embryos, and more in a medium without kinetin than in one with kinetin. The rate of survival was higher on medium without growth regulators and lower on medium with kinetin 5 mg/L because of retarded plant growth. Embryo age and media did not completely replace low temperature treatment. Twenty- and 14 day-old embryos responded by flowering after 4 weeks of vernalization. Embryo culture at 14- and 20 days after anthesis coupled with 4-week cold treatment shortens generation time of barley. When 20 day immature embryos of barley (cv. Olbori) was treated low temperature treatment for 4 weeks, the rate of heading was better than the other treatment.
This study was undertaken to study the effect of interspecific pollination of L. longiflorum and L. ${\times}$formolongi as the female parent with Oriental, Martagon and Trumpet group as the male parent by cut-style pollination. In the interspecific pollination of L. longiflorum cv. Gelria and Lorina with Oriental group as the male parent, the corresponding fruits obtained immature embryo were 1, 8, and the mean number of embryo per fruit were 11.0, 3.0, respectively. In the interspecific pollination of L. ${\times}$formolongi cv. Raizan, the corresponding fruits obtained immature embryo were 17, and the mean number of embryo per fruit were 4.0. On the other hand, in the interspecific pollination between L. longiflorum and L. ${\times}$formolongi as the female parent and Martagon and Trumpet group as the male parent, the pollination of L. ${\times}$formolongi as the female parent and L. henryi of Trumpet group as the male parent were obtained only 2 fruits, however no embryo.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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