• Title/Summary/Keyword: 면역조직 화학법

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간장내 Superoxide Dismutase 측정법

  • 임동윤;고석태
    • Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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    • 1993.04a
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    • pp.149-149
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    • 1993
  • 목적:동식물세포에는 superoxide(0$_{-2}$)의 불균화 반응을 촉매하는 superoxide dismutase (SOD)가 존재한다. 이 효소의 생리적 의의는 지금까지도 명확하게 되어있지 않는면이 많지만, 그 의의를 명확하게 하기위해서도 측정법의 확립이 필요하다. 방법: SOD측정 방법으로는 1) Cytochrome C method 2) Nitroblue tetrazoliun method (NBT법) 3) 면역학적 방법 4) 화학발광법 등이 있다. 실험 재료는 흰쥐, mouse, 토끼의 간을 이용하였으며, 또한, 노화 및 암세포를 이용한 방법을 이용하였다. 결과: Cytochrome C 방법을 통해서 각 장기조직 (신장, 간장, 폐)에서 SOD를 측정하였으며 SOD 활성이 낮은 암조직이나 배양세포에서는 NBT 방법이 측정방법으로 적합한 것으로 나타났으며 ,간장세포내에서의 SOD의 존재부위를 확인하는 방법으로는 면역 황금 표지방법을 사용하므로 간장 mitochondria 내에 Cu, Zn-SOD가 존재함을 알 수 있었다.

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Expression and Clinical Significance of the N-myc Downstream Regulated Gene-1 in Hypopharyngeal Cancer (하인두암에서의 N-myc Downstream Regulated Gene-1 발현의 임상적 의의)

  • Sohn, In-Kyung;Han, Nam-Soo;Shin, Yoo-Seob;Kim, Jang-Hee;Kim, Chul-Ho
    • Korean Journal of Head & Neck Oncology
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    • v.27 no.1
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    • pp.22-26
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    • 2011
  • 목 적 : 두경부 암은 발생 순위에서 전체 6위에 해당하는 다빈도 암이나 최근 20여년 동안의 노력에도 불구하고 두경부 암의 독톡한 특성상 생존률에서 뚜렷한 향상을 보이지 못하고 있다. 특히, 하인두 암은 원발 부위의 점막하 침윤이 흔하며, 주변 림프절 전이와 원격 전이가 흔하고, 2차 원발 암종 발생이 흔하여 두경부 암 중에서도 가장 불량한 예후를 보이고 있는 악성 종양이다. 최근에 이러한 암을 치료하고 진단하기 위한 방법으로 분자생물학적 접근법들이 많이 시도 되고 있으며, 그 중 하나로 N-myc downstream regulated gene-1(Ndrg-1)이라는 유전자가 유방, 전립선, 방광 암 등의 타 악성 종양에서 종양의 전이 및 진행 양상과 관련되어 있다는 보고가 있었다. 이에 본 연구는 하인두 암에서의 Ndrg-1의 발현 양상을 살펴보고 이와 임상 양상과의 연관관계를 살펴보고자 하였다. 방 법 : 1996년부터 2003년까지 수술 받은 하인두 암 환자 56명을 대상으로 면역조직화학검사를 시행하여 Ndrg-1 발현을 확인하였고, 3명의 신선 조직을 대상으로 RT-PCR, Western blot을 시행하였다. 결 과 : Ndrg-1은 RT-PCR에서 정상 조직과 악성종양 조직 모두에서 비슷한 수준으로 발현되었다. 그러나 Western blot에서는 정상 조직에서 뚜렷한 증가 양상을 보여 타 연구와 동일한 결과를 보였고, 이는 불필요하며 비효율적인 mRNA수준에서의 발현이 있지만 최종적인 단백 산물 발현에서는 암종의 진행과 연계되어 악성 종양 진행군에서 발현이 억제되는 결과로 해석된다. 면역조직화학검사에서는 정상 상피조직에서 Ndrg-1 발현이 확인되었으며, 통계적으로 유의하지는 않으나 불량한 예후를 가진 그룹에서 대체로 발현이 억제되는 악성 종양과의 역 연관 관계를 확인할 수 있었고, 특히 림프절 전이를 보인 그룹과 그렇지 않은 그룹 사이에서는 통계적으로 유의미한 결과가 확인되었다. 결 론 : 즉, 림프절 전이가 없는 그룹에서 Ndrg-1이 종양의 전이에 관여할 것이라는 타 연구와 일관된 결과로 하인두 암에서도 그 역할이 있음을 나타내는 결과라 할 수 있다.

Expression of Estrogen and Progesterone Receptors in Non-small-cell Lung Cancer Tissue Using Tissue Microarray Method (조직 미세배열법을 이용한 비소세포 폐암 조직에서 에스트로겐과 프로게스테론 수용체 발현)

  • Han, Hye-Seung;Kim, Min-Ji;Cho, Jae-Hwa;Yoon, Yong-Han;Kwak, Seung-Min;Lee, Hong-Lyeol;Kim, Kwang-Ho;Ryu, Jeong-Seon
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • v.58 no.1
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    • pp.54-58
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    • 2005
  • Background : To evaluate the role of estrogen and progesterone in the carcinogenesis of NSCLC, IHC studies for the expression of the receptors of estrogen and progesterone have been performed with inconsistent results. Recently the TMA method has been developed and has become recognized as a useful and rapid method for extensively analysing molecular markers at the gene and protein level. We have investigated their expressions in the tissue from NSCLC using the microarray method. Methods : The TMA construction was made with 70 formalinfixed, paraffin-embedded tissues of NSCLC. After heat-induced epitope retrieval, IHC staining on primary tissues of NSCLC was performed with the monoclonal antibodies, ER1D5 and PR1A6. Results : Our sample of 70 consisted of 74% men and 26% women. Of the patients, 49% were current smokers, 27% were non-smokers and 24% were former smokers. By histologic classification, 34 patients had squamous cell carcinoma, 24 had adenocarcinoma, 9 had adenosquamous cell carcinoma, and 3 had other carcinomas. No cancer cells were immunostained with these monoclonal antibodies in any primary tissues of NSCLC. Conclusions : No expression of neither of the two receptors was found in any of the lung cancer tissues. This suggests that adequate genetic variants for IHC staining need to be developed for NSCLC.

Experession of Vasoactive Intestinal Peptide in the Hypothalamus of Fasting and Anorexia Mutant Mice (anx/anx) (절식시킨 생쥐와 식욕부진 돌연변이 생쥐의 시상하부에서 Vasoactive Intestinal Peptide의 발현)

  • 김미자;김영옥;김혜경;정주호
    • Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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    • v.30 no.5
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    • pp.937-942
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    • 2001
  • The present study was conducted to identify the mechanism about the regulation of appetite by examining the expression patterns of vasoactive intestinal peptide in the hypothalamus of either fasted for 24 hours or anorexia mutant mouse. In order to investigate expression pattern of the vasoactive intestinal peptide, immunohisto-chemistry was employed along with reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and dot blotting. Immunohistochemistry has shown that level of expression of vasoactive intestinal peptide and appetite-suppessing neuropeptide, was lower in the suprachiasmatic nucleus (SCN) and higher in the paraventricular nucleus (PVN) of the anorexia mutant group than in the comparable regions in the control group. This pattern was repeated in the fasting group, which also showed lower and higher levels of vasoactive intestinal peptide expression in the SCN and PVN respectively, In contrast, the vasoactive intestinal peptide mRNA level in the entire hypothalamus via RT-PCR and dot blotting was similar in the fasting and control groups, while it was significantly increased in the anorexia mutant group.

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Immunohistochemical Detection of p53, erbB-2 and CEA Oncoprotein in Lung Cancer; Clinical Correlations (폐암 환자에서 면역조직화학 염색을 통한 p53, erbB-2, CEA 종양단백 발현과 임상적 의의)

  • Jeong, Seong-Su;Kang, Dong-Won;Lee, Gyu-Seung;Ko, Dong-Seok;Suh, Jae-Chul;Kim, Geun-Hwa;Shin, Kyoung-Sang;Kim, Ju-Ock;Song, Gyu-Sang;Kim, Sun-Young
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • v.45 no.4
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    • pp.766-775
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    • 1998
  • Background : The prognosis of patients with lung cancer is still poor. Lung cancer exhibits a variable clinical outcome, even in those patients with same stage. Numerous reports suggest that oncogene expression might playa role in explaining the variability of response and survival But many of these reports are still under debate. So we studied the clinical relevance of oncogene expression in Korean lung cancer patients. Immunohistochemistry of p53, erbB-2, CEA expression was performed. Method: From March, 1992 until March, 1997, 120 patients with lung cancer were reviewed. p53, erbB-2, and CEA expression were detected on paraffin-embedded tumor blocks with the use of monoclonal antibodies. The survival and response has correlated with the expressibility of p53, erbB-2, and CEA oncoprotein Results: Overall, the expression rates of p53, erbB-2, and CEA were 33.7%, 59.3%, and 32.6% respectively. Expression rates were not correlated to cell type or stage. Compared with response to chemotherapy, no correlation was found. The expression of p53, erbB-2, or CEA was not correlated with 2-year survival. With simultaneous applications of p53, erbB-2, and CEA, patients with 2 or more expressions also did not show poor response to chemotherapy. Conclusion: We conclude the p53, erbB-2, and CEA expression are clinically less useful in predicting response to chemotherapy or survival.

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The Significance of p53 Expression in Serum and Tissue from Patients with Lung Cancer (원발성 폐암환자의 혈청 및 조직에서의 p53단백 표현)

  • Chang, Jung-Hyun;Sung, Sun-Hee
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • v.45 no.2
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    • pp.333-340
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    • 1998
  • Background: Lung cancer is the leading cause of cancer over the world. P53 alteration is by far the most common genetic defect in lung cancer. The mutation of p53 protein involves the loss of inhibitory function of p53 related tumor suppressor gene and resultant oncogenesis. The analysis of p53 alterations consists of immunohistochemical stain, PCR based assay, or serologic ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). Methods : Serum levels of p53 mutant protein were measured in 69 cases of lung cancer (adenocarcinoma n=29, epidermoid n=16, small cell n=13, large cell n=1, undifferentiated n=1, undetermined n=9) and 42 controls of respiratory disorders using ELISA. Immunohistochemical stain in tissue was performed using monoclonal antibody of p53 in lung cancer subjects. Results: Both serum p53s in nonsmall cell cancer ($0.28{\pm}0.44ng/ml$) and in small cell cancer ($0.20{\pm}0.14ng/ml$) were not different from controls ($0.34{\pm}0.20ng/ml$). Also there was no significant difference in serum p53 according to tumor stages. P53 immunohistochemical stain showed 50% positivity overall in lung cancer. There were no close correlation between serologic level and positivity of immunohistochemical stain. Conclusion: The serologic determination of p53 mutant protein is thought to have no diagnostic role in lung cancer. Immunohistochemical stain in lung cancer specimen shows 50% positivity.

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Dose-dependent Effects of Bee Venom Acupuncture on MPTP-induced Mouse Model of Parkinson's Disease (MPTP로 유발된 파킨슨병 Mouse 모델에 대한 봉약침의 농도의존적 효과)

  • Jun, Hyung-Joon;Kim, Yong-Suk
    • Journal of Acupuncture Research
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    • v.27 no.5
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    • pp.59-68
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    • 2010
  • 목적 : 최근 한의학에서 널리 사용되며, 신경계 질환에도 응용되고 있는 봉약침의 농도의존적 효과를 알아보기 위하여, 대표적인 신경 퇴행성 질환인 파킨슨병의 동물모델을 통해 세포보호효과와 세포사멸 및 신경염증 기전을 관찰하였다. 방법 : C57BL/6 mice에 신경독소인 1-methyl-4-phenyl-1, 2, 3, 6-tetrahydropyridine(MPTP)를 4번 복강내 주입하여 중뇌의 흑질 도파민 신경세포를 파괴하여 Parkinson 질병동물 모델을 만든 후, 2개의 군에는 마지막 MPTP 투여 2시간 후에 1차, 그 후로 48시간이 지날 때마다 양측 신수에 각각 0.06mg/kg 농도와 0.6mg/kg 농도의 봉약침을 시행하여 총 4회 시술한 후, 도파민 세포를 측정하는 TH 면역조직 화학법을 통해 세포의 보존 정도를 관찰하고, 세포사멸과 관련된 양상을 확인하기 위하여 Caspase 3, 신경염증과 관련된 양상을 확인하기 위하여 iNOS의 발현여부를 면역 조직화학법을 이용하여 관찰하였다. 결과 : 관찰결과 MPTP 투여 후 MPTP 투여군의 흑질의 도파민 세포 수는 감소하였으나 0.6mg/kg 봉약침을 투여한 경우에는 유의성 있게 세포 수가 유지되었다. Caspase-3와 iNOS 발현억제 실험에서 0.6mg/kg 봉약침군은 MPTP 투여군과 0.06mg/kg의 봉약침군과 비교하여 Caspase-3, iNOS 발현을 유의하게 억제하였다. 결론 : 봉약침은 MPTP 투여로 인한 신경세포 손상에 대하여 농도에 따라 세포사멸 기전과 신경염증 기전을 억제함으로 신경세포를 보호하는 것으로 추정되며, 추후 적절한 경혈점 및 최적의 봉약침 농도를 찾는데 지속적인 연구가 필요할 것이다.

Immunohistochemical Staining of Insulin-like Growth Factor-1 in Human Lung Cancer Cells (폐암의 조직학적 형태에 따른 인슐린양 성장인자-1의 면역조직학적 염색의 비교)

  • Park, Ji-Hyun;Kang, Myoung-Jae;Lee, Heung-Bum;Lee, Yong-Chul;Rhee, Yang-Kuen
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • v.48 no.3
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    • pp.324-330
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    • 2000
  • Objective : Lung cancer arises after a series of morphological changes, which take several years to progress from normal epithelium to invasive cancer. Multiple molecular changes and growth factor production have been documented in lung cancers, both small cell and non-small cell types. Insulin-like growth factors(IGFs) are important mitogenic and anabolic peptides, both in vivo and in vitro, and are thought to be significant autocrine-paracrine factors involved in normal and malignant cell proliferation. In this study, the degree of expression of IGF-1 on the immunohistochemical staining in human non-small cell lung cancer(NSCLC) cells and small cell lung cancer (SCLC) cells were investigated. Methods : Immunohistochemical staining for IGF-1 was performed in 15 cases of small cell carcinoma, 15 cases of squamous cell carcinoma, 15 cases of adenocarcinoma, and 12 cases of bronchoalveolar carcinoma. Results : The expression of IGF-1 on the immunohistochemical staining significantly increased in NSCLC cells than in SCLC cells. Conclusion : These results suggest the expression of IGF-1 in human lung cancer cells. The immunohistochemical staining of IGF-1 in lung cancer cell lines may assist in the differentiation of NSCLC and SCLC.

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Effects of Ginseng radix on Alcohol-induced Decrease in New Cell Formation and Nitric Oxide Synthase Expression in Dentate Gyrus of Rats (인삼이 흰쥐의 치상회에서 알코올에 의한 새로운 신경세포 생성 및 nitric oxide synthase 발현에 미치는 영향)

  • Min-Chul, Shin;Ee-Hwa, Kim;Youn-Hee, Kim
    • The Journal of Korean Medicine
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    • v.23 no.3
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    • pp.26-32
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    • 2002
  • 목적 : 본 연구에서는 알코올 독성에 대하여 흰쥐의 치상회에서 새로운 신경세포의 생성 및 nitric oxide synthase (NOS) 발현에 인삼이 미치는 영향을 5-bromo-2-deoxyuridine (BrdU) 면역 조직 화학법 및 nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-diaphorase (NADPH-d) 조직화학법을 통해서 관찰하고자 한다. 방법 : 실험동물을 정상군, 인삼처치군, 알코올처치군 및 알코올-인삼 처치군으로 분류하여 각각의 실험군에 3일간 BrdU (50mg/kg)를 복강주사하였다. 인삼처치군은 30mg/kg 용량의 인삼 전탕액을 중완혈에 약침주사하였고, 알코올 처치군은 2 g/kg 용량의 알코올을 투여하였으며. 알코올-인삼 처치군은 2 g/kg 용량의 알코올 및 30mg/kg 용량의 인삼 전탕액을 투여한 후 각각의 BrdU 양성 세포수와 NADPH-d 양성세포수를 관찰하였다. 결과 : 알코올 투여군은 BrdU 양성세포 및 NADPH-d 양성세포 발현이 감소하였으나, 인삼 및 알코올 인삼처치군에서는 알코올 투여군에 비해서 모두 증가하였다. 결론 : 인삼은 알코올에 의해서 유발된 새로운 신경세포 생성의 감소에 대하여 보호효과가 있으며, 알코올에 의해서 부가적으로 영향 받는 산화질소는 세포생성 조절에 중요한 역할을 하는 것으로 사려된다.

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