본 연구는 섬유소 분해효소 유전자 Cel D(Cellulase Digestion)가 도입된 형질전환 돼지 생산을 통하여 섬유소 함유 사료의 이용 효율을 증대시키고, 나아가 장기이식동물 및 고가의 의료용 단백질 생산가축을 개발하기 위한 원천기술 확보에 있다. 섬유소분해 유전자의 크로닝 및 조직 특이적 발현벡터를 개발하기 위하여, 우선 소의 위중 제4위 내의 미생물로부터 전체 유전자를 분리하였고, 이렇게 작성된 DNA library에서 섬유소분해 관련 유전자인 약 2.0 kb의 Cel D유전자를 크로닝하였으며, 췌장 특이적 발현 프로모터(rat elastase I: 약 200bp)를 크로닝한 후, 미세주입용 형질전환 재조합 벡터를 구축하기 위하여 rElastase I 프로모터 하류에 섬유소 분해 유전자(Cel D)를 연결하여 약 3.0 kb 크기의 재조합 벡터를 준비하였으며, 재조합 유전자를 1세포기 수정란 전핵내에 미세주입 하기 위해 Sal I과 BglII를 이용 유전자 단편을 만들었다. 구축된 유전자를 미세주입하기 위한 수정란을 회수하기위해 총68두의 돼지를 4-5두씩 분리사육하면서 발정동기화 및 과배란 유기를 위해 PG600, Altrenogest, FSH, hCG를 투여하였으며 hCG투여후 약54시간에 외과적 방법에 의해 총 1,359개의 수정란을 회수하였고, 이중 미세주입가능한 1세포기 수정란은 1,296개로 두당 평균 15.9개 였다. 1,296개의 1세포기 수정란 중에서 재조합 유전자(rE I-CelD)가 미세주입된 660개의 수정란을 32두의 수란돈에 외과적 방법에 의해 이식하였으며, 이식되어진 모돈 13두가 분만하여 40.6%의 임신율을 나타내었다. 이렇게 분만된 13두에서 총 65두(암:33두, 수:32두)의 자돈이 생산되었으며, 형질전환 여부를 판명하기 위해 자돈의 꼬리조직으로 부터 genomic DNA를 추출하고 PCR 검정을 실시하였다. PCR 검정 결과, 섬유소 분해 유전자가 도입된 자돈은 5두 이었으며, 그 결과를 Table에 나타내었다.(Table Omitted) Table 1 에서와 같이 섬유소 분해효소유전자가 형질전환된 자돈은 65마리 중 5마리로 7.69%의 형질전환율을 나타내었으며, 5마리의 자돈중 2두(암:1두, 수:1두)는 분만 후 즉시 폐사되었으며 2두(암:1두, 수:1두)는 86일령 그리고 14일령에 폐사하여 현재 1두(암)가 생존하여 섬유소 분해 사양 실험 중에 있다.
Specific affinity binding sites for atrial natriuretic peptide (ANP) were Investigated in the pig ovarian tissues by in vitro autoradiographic techniques. In the pig ovary, the highest binding sites for 12514abeiled rANP(l~28) were localized in the granulosa cell layer of the forncles. The binding sies on theca layer of the ovarian follicles were mainly localized in the external layer, but none was observed In the Internal layer. In the corpus luteum, the binding site was not observed. The specific bindings of 200 pM of l2Sl4abelled rANP(l~28) to granulosa and theca externa layers were reversed completely by excess concentration (1 ~4) of unlabelled rANP(l~28) but not by 10 ~ of unrelated peptides, human angiotensin II and arginine vasopressin. The binding was also displaced by 1 ~ of desiGIn18, Ser19, Gly2O, leu21, Gly22I ANP(4~2g) (C- ANF) as a spedfic ligand of the ANP clearance receptor. Therefore these results indicate ~hat the biological and the clearance ANP receptors exist in the theca externa and granulosa layer of the pig ovary, and suggest that the ANP receptors may be related with the regulatory lundion of the ovarian follicular development including oocyte maturation.
Kim, Jonghun;Park, Sungmin;Nam, Gyungmok;Yoon, Sang-Hee
Transactions of the Korean Society of Mechanical Engineers A
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v.40
no.10
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pp.851-856
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2016
Despite all the recent advances in biodegradable material-based microneedles, the bending and failure (especially buckling) of a biodegradable microneedle during skin tissue insertion remains a major technical hurdle for its large-scale commercialization. A reduction in skin tissue puncture force during microneedle insertion remains an essential issue in successfully developing a biodegradable microneedle. Here, we consider uniaxial and equibiaxial prestrains applied to a skin tissue as mechanophysical stimuli that can reduce the skin tissue puncture force, and investigate the effect of prestrain on the changes in skin tissue puncture force. For a porcine skin tissue similar to that of humans, the skin tissue puncture force of a flat-end microneedle is measured with a z-axis stage equipped with a load cell, which provides a force-time curve during microneedle insertion. The findings of this study lead to a quantitative characterization of the relationship between prestrain and the skin tissue puncture force.
For human organ transplantations, histidine-tryptophan-ketoglutarate solution (HTKS) and University of Wisconsin solution (UWS) have been shown to engender similar outcomes as gold standard cold preservation solutions ($4^{\circ}C$). To select the effective preservation solution for cold storage of kidney xenografts in miniature pig, which could be a potential source animal of bio-organs, this study compared early histopathological outcomes of cold preservation injury using HTKS and UWS. Twelve miniature pigs weighing 25.6 to 34.7 kg were divided into two groups (n = 6 per group), UWS group and HTKS group. The kidneys in each group were harvested, cold flushed, and preserved for 0, 24, 48, and 72 hrs at $4^{\circ}C$ with UWS or HTKS, respectively. Histolopathological examinations were assessed on kidney biopsy specimens, taken after each cold storage. The degree of renal injury was scored using 5 different criteria (pyknotic nuclei, disruption of cytoplasm, detachment of epithelium, loss of microvilli, tubular necrosis and loss of glomerular tufts) of the cellular components of the tissue. The degree of kidney damage was increased with prolonged cold ischemia time. UWS and HTKS have at least similar efficacy in kidney preservation within 24 hrs cold preservation time. However, in HTKS group cold-induced injury started to be observed more than in UWS group after 48 hrs of cold storage. In conclusion, UWS and HTKS were equally effective for cold preservation of miniature pig kidney in early preservation times; however, UWS may be more effective at longer preservation times as compared to HTKS.
Chung, Hak Jae;Sa, Soo Jin;Baek, Sun Young;Cho, Eun Suek;Kim, Young Shin;Hong, Jun Ki;Cho, Kyu Ho;Kim, Ji Youn;Park, Mi Ryung;Kim, Kyung Woon
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.20
no.9
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pp.306-314
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2019
As dipeptidyl peptidase-4(DPP-4) inhibitors are used widely as a secondary treatment for type 2 diabetes because they tend to be well tolerated with minimal side effects, the human DPP-4(hDPP-4) gene was injected into a pig zygote through micro-injection, and 1-cell stage fertilized embryos were then transplanted surgically into the oviduct. Three pigs were fertilized with hDPP-4 genes and produced sixteen piglets, in which one male piglet was identified to be transgenic. Finally, transgenic pigs showing hDPP-4 gene expression in the tail were produced. Western blot and RT-PCR analysis confirmed that the hDPP-4 is expressed strongly in the membrane cells of the transgenic pig, and that the hDPP-4 gene appears in various tissues and tails. This suggests that the expression vector is normally expressed in transgenic pigs. These results are anticipated to be a model animal to check the endocrine function for insulin resistance that occurs in a hDPP-4 transgenic pig and to increase its value for use as a material in newly developed medicines.
Journal of the Institute of Convergence Signal Processing
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v.9
no.1
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pp.31-38
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2008
Ad-Hoc network is a network architecture which has no backbone network and is deployed temporarily and rapidly in emergency or war without fixed mobile infrastructures. All communications between network entities are carried in ad-hoc networks over the wireless medium. Due to the radio communications being extremely vulnerable to propagation impairments, connectivity between network nodes is not guaranteed. Therefore, many new algorithms have been studied recently. This study proposes the secondary header approach to the cluster based routing protocol (CBRP). The primary header becomes abnormal status so that the primary header can not participate in the communications between network entities, the secondary header immediately replaces the primary header without selecting process of the new primary header. This improves the routing interruption problem that occurs when a header is moving out from a cluster or in the abnormal status. The performances of proposed algorithm ACBRP(Advanced Cluster Based Routing Protocol) are compared with CBRP. The cost of the primary header reelection of ACBRP is simulated. And results are presented in order to show the effectiveness of the algorithm.
Hypoglycemic and hypolipidemic effects of Jerusalem artichoke composites (JAP) with extracts of G. procumbens (12.5%), M. charantia (12.5%), and C. longa (12.5%) to H. tuberosus concentrate (JA, 50%) were evaluated in streptozotocin (STZ) induced diabetic rats. Rats were divided into seven groups: normal (Normal), diabetic control (Diabetic), group fed G. procumbens extract (0.5 g/kg bw, D-GPE), group fed JAP (0.5 g/kg bw, D-JAP1; 1.5 g/kg bw, D-JAP2), group fed JA (0.5 g/kg bw, D-JA), and group fed Metformin (0.2 g/kg bw, D-MET) as a positive control. The blood glucose levels over 4 weeks were significantly decreased in the D-JAP2 and D-MET groups compared to the other groups after 3 weeks. The serum insulin level was not significant among the groups fed an experimental diet, but the HOMA-IR value was significantly decreased compared to the diabetic control group. AST and ALT activities in the serum were lowest in D-JAP1. Total lipid and triglyceride contents in the serum decreased in the groups fed an experimental diet, and the HDL-C contents of D-GPE, D-JAP1, and D-JAP2 were significantly increased compared to the diabetic control group. Triglyceride contents in the liver tissue were significantly lower in the D-GPE, D-JAP1, and D-JAP2 groups, and hepatic TBARS content was significantly decreased in the D-JAP1 and D-JAP2 groups compared to the diabetic control group. Hepatic antioxidative enzyme levels, such as SOD, catalase, and GSH-Px, were significantly elevated in groups fed an experimental diet compared to the diabetic control group. Therefore, JAP may be more effective than JA in the human body due to its hypoglycemic and hypolipidemic activities.
Kang, Geunho;Ham, Hyoung-Joo;Seong, Pil-Nam;Cho, Soohyun;Moon, Sungsil;Park, Kyoungmi;Kang, Sun Mun;Park, Beom-Young
Korean Journal of Poultry Science
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v.41
no.2
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pp.77-85
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2014
This study was conducted to investigate the effect of duck and pork meat mixing ratio on quality characteristics of emulsion type sausage at $4^{\circ}C$ during 5 weeks. Treatments on the basis of the meat content were subjected to 100% duck meat (T1), 100% pork meat (T2), 50% duck meat + 50% pork meat (T3), 40% duck meat + 60% pork meat (T4), and 30% duck meat + 70% pork meat (T5). The moisture content was significantly (p<0.05) higher in TI sample but significantly (p<0.05) lower in T2 sample than those in comparison to the other treatments. Crude protein and fat content were significantly (p<0.05) higher in T2 sample compared to the other treatments. CIE $L^*$value was significantly (p<0.05) lower in T1 sample than those of other treatments until 5 weeks of cold storage. CIE $a^*$value was significantly (p<0.05) higher in T1 sample but significantly (p<0.05) lower in T2 sample than those in comparison to the other treatments until 5 weeks of cold storage. Hardness was significantly (p<0.05) higher in T4 sample compared to the other treatments during all cold storage. Cohesiveness was significantly (p<0.05) higher in T5 sample compared to the other treatments until 2 weeks of cold storage. The results of sensory evaluation showed that the meat flavor, taste and texture were significantly (p<0.05) lower in T5 sample compared to the other treatments whereas no difference among treatments except T5 sample. Overall acceptability was significantly (p<0.05) lower in T5 sample compared to the other treatments. Therefore, these results suggested that the ratio of 40% duck meat and 60% pork meat is appropriate levels for hardness and palatability when manufacturing emulsion type sausage with duck meat.
Our previous studies demonstrated that relaxin in concert with estrogen promotes development of the mammary parenchyma during the last third of gestation in gilts, and the specific relaxin-binding sites were present in the mammary gland. This study was conducted to determine if relaxin-binding sites in the mammary gland were functional relaxin receptors. Three cycling cross-bred gilts were bilaterally ovariectomized on day 0 of the experiment. Beginning on day 15 and continuing through day 29 post-surgery, the gilt received an im. injection of estradiol benzoate at 12-hr intervals. Beginning on day 22 post-surgery, highly purified porcine relaxin was administered(lug/hr) into the left fourth mammary gland from the anterior end via miniature osmotic pump. Physiological saline was administered to the right fourth mammary gland. The gilt was sacrificed on day 29 post-surgery and histological characteristics of the mammary parenchyma were examined. The mammary glands treated locally with saline showed little, if any, lobulo-alveolar development, whereas the mammary glands treated with relaxin showed not only marked lobulo-alveolar development but also prominent secretions in the alveoli. The saline-treated glands were characterized by relatively dense and highly organized collagen fiber bundles. Whereas, in the relaxin-treated mammary glands, collagen fiber bundles were dispersed and loosely organized. In conclusion, relaxin-binding sites in the mammary gland are functional relaxin receptors and relaxin acts directly on the pig mammary gland to promote development of the alveoli and remodeling of the extracellular matrix.
Despite the many advantages of magnetic resonance imaging in orthopedic prosthetic body image distortion to the differences in the magnetic susceptibility occurs. Attached to the phantom and pork produced by the same $65{\times}15{\times}2mm$ stainless steel and titanium specimen examined the relationship between magnetic resonance imaging and phantom images, the signal intensity changes of the subcutaneous tissue, fat-suppressed quantitative assessment of the degree through the length of image distortion and pig bones. Stainless steel to titanium to 2.8 times 4.4 times in the longitudinal direction than in the direction of the height of large image distortion, signal strength is relatively low 58.5%. Normal 56.2% compared to the subcutaneous tissue, fat-suppressed, were stainless steel 16.04%, 54.53% titanium. Experimental results than the diagnostic value of magnetic resonance imaging (MRI) images of stainless steel with a titanium metal if better could see.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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