Nickel Chloride coated protein chip plates were developed by using a spin coating method after $H_2$ plasma treatment. The adsorption ability of histidine tagged protein was investigated at various times of plasma treatment. The properties of the nickel chloride and protein on the surface of the slides were assayed using particle size analysis and the extent of the protein adsorption was determined by using a bio imaging analyzer system. The results show that the ability of protein adsorption decreased as increasing the time of $H_2$ plasma treatment. The mechanism on the ability of protein adsorption at the plate surface is discussed on results and discussions. The results also suggest that the surface stabilization of protein chip plates treated by plasma technology may be applicable in biosensor markets.
Proceedings of the Korean Information Science Society Conference
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2006.10a
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pp.22-27
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2006
압타머칩은 혈청(serum) 내의 지정된 단백질의 상대적 양을 직접 측정할 수 있는 바이오칩으로서, 의학적 질병 진단에 유용하게 사용할 수 있는 툴이다. 압타머칩 데이터 분석에는 기존의 마이크로어레이 분석기법을 그대로 적용할 수 있다. 본 논문에서는 Potential SVM(PSVM)을 이용하여, 심혈관질환 샘플 기반의 압타머칩 데이터에서 바이오마커 후보 단백질을 선정한 결과를 정리한다. PSVM은 분류 알고리즘으로서 뿐만 아니라 자질 선택(feature selection)에서도 우수한 성능을 보이는 알고리즘으로 알려져 있다. 심혈관 질환의 단계에 따라 구분한 4개 클래스, 135개 샘플로 구성된 3K 압타머칩 데이터에 대해 PSVM을 적용하여 자질을 선택하고 분류성능을 측정한 결과, 마이크로어레이에서의 자질 선택에 많이 사용되는 Gain Ratio 기법과 비교하여 보다 적은 수의 단백질 정보로 보다 나은 분류 성능을 보임을 확인하였다. 더불어, PSVM을 이용해 선택한 단백질군을 심혈관 질환 진단을 위한 바이오마커 후보로 제시한다.
Polyhydroxyalkanoates (PHAs) are a family of microbial polyesters that can be produced by fermentation from renewable resources. PHAs can be used as completely biodegradable plastics or elastomers. In this paper, novel applications of PHAs in biosensor are described. A general platform technology was developed by using the substrate binding domain (SBD) of PHA depolymerase as a fusion partner to immobilize proteins of interest on PHA surface. It could be shown that the proteins fused to the SBD of PHA depolymerase could be specifically immobilized onto PHA film, PHA microbead, and microcontact printed PHA surface. We review the results obtained for monitoring the specific interaction between the SBO and PHA by using enhanced green fluorescent protein, red fluorescent protein, single chain antibody against hepatitis B virus preS2 surface protein and severe acute respiratory syndrome coronavirus surface antigen as model proteins. Thus, this system can be efficiently used for studying protein-protein and possibly protein-biomolecule interactions for various biotechnological applications.
Kim, Woo Jin;Lee, Hui Young;Lee, Seung-Joon;Jung, Se-Hui;Yuk, Jong Seol;Ha, Kwon-Soo;Jung, Ki-Suck
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.60
no.4
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pp.412-418
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2006
Background; The diagnosis of chlamydial infection is based on serology. The current gold standard of diagnosis is MIF(microimmunofluorescence), but this modality is subjective and time-consuming. Protein microarray with using a SPR(surface plasmon resonance) sensor has recently been suggested as a method for detecting infection. For developing a protein chip to diagnose chlamydial infection, EBs(elementary bodies) were immobilized on a gold chip and the interaction between an antibody for Chlamydophila pneumoniae and the EBs(elementary bodies) immobilized on the surface of the gold chip was measured by using an SPR sensor. Methods; For the surface antigen, the EBs of Chlamydophila pneumoniae LKK1 were purified. Charged arrays were prepared by using PDDA(polydiallyldimethylammonium chloride) which has a positive charge. After immobilization of the chlamydial EBs on the PDDA surface, the investigation of the surface was done with using atomic force microscopy. After the antibody for C. pneumoniae was applied on chip, we monitored the SPR wavelength-shift to detect any antigen-antibody interaction with using a self-assembled SPR sensor. Results; The chlamydial EBs on the positively charged PDDA were visible on the surface with using atomic force microscopy. The SPR wavelength increased after interaction of antibody for C. pneumoniae with the EBs immobilized on charged gold surface. The wavelength-shift was correlated with the concentration of antigens. Conclusion; The surface immobilization of EBs on the gold surface with the charged arrays was identified and the antigen-antibody interaction on the gold chip was detected via the SPR sensor. Further investigations are needed to apply this technique to the clinical field.
Purpose: The aim of this study was to develop a bioinformatics software and to test it in serum samples of papillary thyroid cancer using mass spectrometry (SELDI-TOF-MS). Materials and Methods: Development of 'Protein analysis' software performing decision tree analysis was done by customizing C4.5. Sixty-one serum samples from 27 papillary thyroid cancer, 17 autoimmune thyroiditis, 17 controls were applied to 2 types of protein chips, CM10 (weak cation exchange) and IMAC3 (metal binding - Cu). Mass spectrometry was performed to reveal the protein expression profiles. Decision trees were generated using 'Protein analysis' software, and automatically detected biomarker candidates. Validation analysis was performed for CM10 chip by random sampling. Results: Decision tree software, which can perform training and validation from profiling data, was developed. For CM10 and IMAC3 chips, 23 of 113 and 8 of 41 protein peaks were significantly different among 3 groups (p<0.05), respectively. Decision tree correctly classified 3 groups with an error rate of 3.3% for CM10 and 2.0% for IMAC3, and 4 and 7 biomarker candidates were detected respectively. In 2 group comparisons, all cancer samples were correctly discriminated from non-cancer samples (error rate = 0%) for CM10 by single node and for IMAC3 by multiple nodes. Validation results from 5 test sets revealed SELDI-TOF-MS and decision tree correctly differentiated cancers from non-cancers (54/55, 98%), while predictability was moderate in 3 group classification (36/55, 65%). Conclusion: Our in-house software was able to successfully build decision trees and detect biomarker candidates, therefore it could be useful for biomarker discovery and clinical follow up of papillary thyroid cancer.
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2010.02a
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pp.399-399
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2010
Polyethylene glycol(PEG)은 강력한 단백질 및 세포흡착 억제력을 가지고 있어 다양한 생물학적 연구에 사용되고 있으나, 기판과의 결합력이 무척 약해 기판 위에 박막을 형성하기가 매우 어렵다는 문제점이 있다. 이번 연구에서는 capacitively-coupled plasma chemical vapor deposition(CCP-CVD)를 이용하여 PEG를 유리 기판 위에 플라즈마 중합하여 plasma-polymerized PEG(PP-PEG) 기판을 만들었다. PP-PEG 박막은 FT-IR, XPS, ToF-SIMS 분석을 통하여 PEG와 매우 유사한 화학적 조성을 가지고 있음을 확인할 수 있었다. 또한 PP-PEG 기판은 photolithography 방법을 이용하여 표면에 photoresist를 패턴한 뒤 아민작용기를 가지는 plasma-polymerized ethylenediamine (PPEDA)를 증착하여 표면이 amine/PEG로 패턴화된 박막 기판을 만들었다. 패턴된 기판에 단백질 및 세포를 고정화하였을 때, 아민 작용기가 노출된 부분에만 고정화가 나타나고 PP-PEG 영역에는 단백질 및 세포의 흡착이 효율적으로 억제되는 것을 형광측정 및 ToF-SIMS chemical imaging 방법을 이용하여 확인하였다. 이러한 바이오칩 제작기술은 단백질 및 세포 칩을 포함한 여러 분야에서 폭넓게 응용될 수 있을 것으로 기대된다.
In the protein macro array image, it is important to find out the feature of the each protein chip. A decision error by the personal sense of sight occurred from long time observation while making an experiment in many protein chip image. So the feature extraction is needed by a simulator. In the case of feature analysis for macro array scan image the efficiency is maximized. In the fluorescence scan image, the response for each cell have been depend on R, G, B distribution of color image. But it is difficult to be classified as one color feature in the case of mixed color image. In this paper, the response color of a protein chip is classified according to the fuzzy integral value with respect to fuzzy measure as the user desired color. The result of the experiment for the macro array fluorescence image with the Scan Array 5000 shows that the proposed method using the fuzzy integral is important fact to be make decision for the ambiguous color.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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