Paraquat(1.1'-dimethyl-4,4'-bipyridinium ion, PQ)는 전세계적으로 가장 많이 사용되고 있는 농약으로 자살 또는 실수로 마시는 경우 예외없이 폐독성으로 사망하게 된다. 하지만 아직까지 임상에 사용되어지고 있는 효과적인 독성 경감제는 전무한 실정이다. 현재까지 밝혀진 paraquat의 주된 독성기전은 NADPH Cytochrome P$_{450}$ reductase에 의해 산화,환원 반응을 거치는 동안 free radical을 생성하여 세포막에 지질과산화를 일으켜서 세포막의 기능상실과 cell death를 일으킨다고 보고되고 있다. 따라서 본 연구에서는 항산화작용이 뛰어난 아미노산인 taurine(TA)의 radical scarvenging 효과에 의한 PQ 독성경감효과를 in vivo에서 검색하였고, in vitro에서 TA의 PQ 독성경감 mechanism을 밝히고자 하였다. in vivo에서 PQ의 간독성(s-GOT,s-GPT), 신장독성(BUN, Creatinine), 폐 및 전신독성(ALP, MDA, G-6-phosphatase)의 정도를 혈액 및 조직균질액 중에서 검색함으로써 TA의 독성억제효과를 측정하였다.
본 연구는 중금속에 의한 생체내 독성기전을 연구하고자 흰쥐간의 상층액에서 카드뮴과 잘 결합하는 HMWP들을 분리, 정재하고 나아가 생화학적 특성을 밝히고 이단백질이 카드뮴에 의해 생성되는 것인지 아니면 간의 기존 단백질인지를 밝히고자 함을 연구의 목적으로 하였다. CdCl %2 (3mg/kg body wt.)을 3일간 ip injection시킨 후 흰쥐의 간을 적출하고 균질화하여 원심분리한 crude extract를 직접 Sephacryl S-100에 흡착시켜 10mM phosphate buffer(pH 7.0)으로 용출시켰다. 용출된 fraction tube를 UV spectrometer로 흡광도를 측정하고 atomic absorption spectrophotometer로 카드뮴량을 측정하여 카드뮴량이 높은 분획을 모아서 ion exchange column chromatography(DEAE-Sepharose)에 흡착시켜 염농도 구배로 chromatography를 실시하고, 음이온 교환수지에서 흡착되지 않고 용출된 분획을 ultrafiltration으로 농축시킨 후 S-Sepharose에 흡착시켜 염농도 구배로 chromatography를 실시한 결과 두 종류의 카드뮴 결합 단백질(Cd-BP)를 분리, 정제하였다.
Plasma Electrolytic Oxidation(PEO)를 적용하여 두께 $120{\mu}m$의 알루미늄 판에 $Al_2O_3$ 산화피막을 형성하였다. 전해액의 주성분 KOH 와 $Na_2SiO_3$에 $Na_3P_2O_7$, $H_3PO_4$의 첨가제를 넣어 산화피막을 분석하였다. 첨가제 $Na_3P_2O_7$ 을 넣었을 때 치밀한 구조를 갖는 산화피막이 형성됨을 알 수 있었다. 특히 KOH, $Na_2SiO_3$, $Na_3P_2O_7$의 비율이 5:5:2 일때 가장 치밀하고 균질한 구조를 갖는 산화피막이 형성되었다.
Generally, to product multi-grade oil like engine oil, a sort of mineral base oil is mixed with a fundamental additive package liquid and a polymer liquid as viscosity index improver in order to improve the lubricating property of base oil. That is, engine oil is the mixture of more than two fluids. Specially, a polymeric type liquid cannot be seen as the linear viscosity like Newtonian fluids. In this research, by using the governing equation describing non-Newtonian hydrodynamic lubrication related with the mixture of incompressible fluids based on the principle of continuum mechanics, it will be compared the bearing performance between the mixture of each liquid to be blended and multi-grade engine oil as a single fluid in a high speed hydrodynamic journal bearing. Further, it is to be found the way estimating the performance of the blended multi-grade engine lubricant in a journal bearing in advance before blending by using the physical properties of mineral base oil, fundamental additive liquid and polymer liquid of viscosity index improver. So, it can be reduced the number of trial and error to get the wanted lubricant by selecting the proper volume fraction of each liquid to satisfy the expected performance and estimating in advance the performance of various multi-grade oils before blending. Therefore, it can be shorten the developing time and saved the developing cost.
Aquaporin (AQP) family protein은 일종의 수분 전달 통로 역할을 하는 단백질로 AQP를 통한 수분의 조절은 삼투압을 통한 물의 이동과 함께 조직내 정상적인 수분의 상성 유지에 필수적이다. 현재까지 11종의 AQP이 신장·뇌·정소·안구 등에서 발현이 확인되었다. AQP9은 물 뿐 아니라 carbamide, polyol, purine, pyrimidine, urea, glycerol 등의 이동에 관여한다. 본 연구에서는 생쥐에서 출생 후 성체에 이르는 동안 정소 내 AQP9의 발현, Leydig cell의 분화에 따른 AQP9의 발현을 조사하였다. 1, 2, 4, 8주령의 정소로부터 semiquantitative RT-PCR 및 real time PCR 법으로 AQP9의 발현을 분석한 결과 1주령에서는 발현되지 않았고 2주령에서는 미량이 발현되기 시작하였고, 4주령에서는 성체의 1/2수준으로 발현량이 급격히 증가하였고 성체에서는 다량으로 발현됨이 확인되었다. Semiquantitative RT-PCR 법과 real time PCR법을 비교할 때 주령별 발현 양상은 유사하였으나 4주령과 성체에서는 두 시험법 사이에 양적인 차이가 있었다. 면역조직화학염색 결과 주로 Leydig cell에서 AQP9의 발현이 확인되었다. 성체의 정소 균질액의 Western blot 상에서 분자량 80, 55, 35 및 23 kDa의 항원이 검출되어 dimer, trimer 형태로 존재할 가능성과 당쇄 결합에 의한 단백질의 변형이 있는 것으로 추정된다. 미성숙 개체의 정소에서는 23 form이 확인되는 반면 성체에서는 35 kDa form이 주로 발현되므로 정소에서 발현되는 AQP9의 경우 Post-translation 수준에서 AQP9의 변형이 수반되는 것으로 사료되며 AQP9의 기능과의 연관성은 추후 연구되어야 할 것이다. Leydig cell은 fetal 및 adult type 2종의 세포가 정소발달 과정에 출현, 사멸, 분화하며 이들은 각기 정소발달, 성숙과 정자형성에 필요한 steroidogenesis에 관여한다. 정소 내 AQP9의 발현은 17beta HSD의 발현 양상과 같게 나타나므로 성적 성숙에 따른 정소 내 AQP9의 발현의 증가는 adult type Leydig cell의 분화와 관련된 것으로 추측된다. 성체의 정소로부터 분리한 Leydig cell-enriched culture에 hCG를 처리한 결과 배양체의 AQP9의 발현이 증가하므로 AQP9은 LH 수용체 하위 신호전달과정을 통해 Leydig cell의 steroidogenesis 또는 생성된 steroids의 분비에 요구되는 수분 및 중성용질의 이동에 관여하는 것으로 사료된다.
충청남도 보령시 인근연안에서 어획된 문치가자미, Pleuronectes yokohamae 10개체 중에서 6개체가 피부에 육아종이 형성되었다. 기생충과 병원균으로 의심되는 세균은 증식하지 않았으며, 환부의 균질액을 CHSE-214 세포에 접종하였으나 CPE가 관찰되지 않았다. 환부를 광학현미경으로 관찰하였을 때 상피 세포의 증식으로 상피층은 정상개체와 비교하였을 때 유의적인 차이를 보이며 두꺼워졌고, 육아종 주름이 형성되었다. 비대되어진 상피세포는 핵융해 및 뚜렷하게 관찰되는 인이 특징이었으며, 세포질은 혼탁하였다. 이들 상피층에는 원형의 작은 핵과, 뚜렷한 인이 관찰되는 X-cell이 존재하였다. 진피층에는 다수의 신생 혈관들이 존재하고 있었다. 점액세포의 크기는 정상개체와 비교하였을때 유의적인 차이를 보이며 증가하였다. 본 연구에서는 병원체가 확인되지 않았지만 추가적인 실험을 통해서 원인체를 확인해야 할 것으로 생각된다.
The purpose of this study was (i) to determine whether protease inhibition by medium chain fatty acids such as sodium caprate, sodium caprylate and sodium laurate led to suppression of insulin proteolysis over a range of insulin concentrations and (ii) elucidate preventing effect of the enhancers on molecular self-association of insulin in pH 7.4 phosphate buffer isotonic solution. To this end, the rate of insulin proteolysis in nasal tissue supernatants of the albino rabbits was determined in the presence of $0.1{\sim}2%$ sodium caprylate, sodium caprate and sodium laurate at insulin concentrations ranging from $5\;to\;100\;{\mu}M$. At fatty acid salts concentration lower than 0.5%, insulin proteolysis was accelerated but the enhancers of high concentration (>1%) reduced the rate of insulin proteolysis. These effects were dependent upon insulin concentration and chain length of fatty acid salts. Circular dichroism spectra of insulin solutions were then determined. Monomer fraction of insulin was increased with increasing sodium caprate. Therefore, half-life decrease of insulin at low concentrations of the enhancers was attributed to deaggregation of insulin by the enhancers, increasing the proportion of monomers available for nasal proteolysis. And the increase of half-life at high concentration of the enhancers was attributed to inhibitory effect on protease rather than the effect of monomer fraction.
본 연구에서는 한방에서 약용으로 사용하고 있는 미나리과에 속하는 천궁을 에탄올 추출을 사용하여 고지방식 이에 의해 유발된 고지혈 및 비만 흰쥐에서의 항산화 활성과 간 보호 효과에 미치는 영향을 관찰하였다. 고지방 식이에 의해 유도된 고지혈 및 비만 흰쥐에 있어서의 간 손상에 대한 천궁 추출물의 보호효과를 연구한 결과 고지방 식이를 먹인 흰쥐의 혈청 aspartate aminotransferase (AST)와 alanine aminotransferase (ALT)는 증가 되었고, 간조직의 균질액에서 과산화지질의 최종 산물인 MDA도 높게 나타났다. 이와 반대로 천궁 추출물을 처치한 군에서는 간 기능 지표효소의 증가를 억제시켰다. 간조직의 항산화 효소인 SOD, catalase와 GPx의 활성은 고지방식이 의해 감소되었고, 천궁 추출물의 투여로 인해 효소 활성도 가증가됨을 볼 수 있었다. 본 연구를 통해 천연물을 이용한 기반연구로서 향후 천궁의 지질개선 효과와 항산화 효과에 대한 분자생물학적 조직병리학적 후속연구가 필요하다고 사료되며 이 연구의 결과를 바탕으로 천궁의 항산화 식품이나 지질개선 기능성 식품소재로의 활용이 기대되어진다.
본 연구에서는 효율적으로 표고 액체종균을 생산하기 위하여, 액체배지에 폭기방법으로 산소를 공급하고, 대두박을 첨가하여 표고균사체 생장량과 잔존 배양액의 유리당함량을 조사하였다. 그 결과 폭기방법은 균질화된 표고균사가 생장하면서 서로 뭉치지 않고 균질하게 증식하고, 대두박 첨가는 대수기 이후에도 지효성 질소영양원이 공급되도록 하는 효과가 있었다. 배양 중 침전 균사체의 중량은 13일째에 가장 많았으며, 배양용기의 배출구에서 이산화탄소 농도는 13일째에 가장 높았다. 상층 수용액에서 환원당은 폭기 12일째에 거의 소비되었다. 그리고 배양균사체에서 총질소(T-N)량은 폭기 배양 13일째에 최고 수준이며, 키틴함량과 5종의 유리당 중에서 수크로즈함량은 폭기 배양 18일째에 가장 높았으나, 에르고스테롤 함량은 폭기 배양 22일째에 가장 높았다. 이와 같은 결과를 종합적으로 판단할 경우 표고액체 종균으로서 사용 적기는 균사활력이 가장 왕성하고 균체량이 많은 배양 18일째로 판단되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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