다수의 잠재적인 내분비계장애물질이 환경에 방출됨으로써 새로운 환경문제로 세계적 관심이 모아지고 있다. 이러한 물질들을 측정하고 감시하기 위한 고감도이며 신뢰성 있는 분석방법의 개발이 필수적이다. 이 연구에서는 기체크 로마토그래피 질량분석법과 액체크로마토그래피 질량분석법이 내분비계장애물질들의 분석을 위해 이용되었으며 두 가지 분석방법들이 DEHP, BBP, PCP, BPA에 대해 비교 및 평가되었다 그 결과 액체크로마토그래피 질량분석법이 더 낮은 검출 한계를 나타내는 것으로 조사되었다. 또한 액체크로마토그래피 질량분석법은 대부분의 순수한 분자들로서 내분비계장애물질들을 측정 가능함이 판명되었다. 이 연구에서는 음용수에서 내분비계장애물질들을 제거하는 방법으로 유기막과 세라믹막을 제시하였으며 십자류 나노여과 방식이 내분비계장애물질들을 $100\%$ 제거하는 것으로 조사되었고 분획분자량 250 나노여과는 내분비계장애물질을 제거함에 있어 효과적인 것으로 판명되었다. 나노여과, 고속한외여과, 저속한외여과의 투과플럭스와 물질전달계수와의 비는 0.67, 3.4, 그리고 0.44였으며 나노여과와 저속한외여과는 확산이 주요한 조건에서 운전되며 고속한외여과는 대류가 주요한 조건에서 운전된다. 더욱이, 확산이 주요한 나노여과와 저속한외여과에서 내분비계장애물질의 제거율이 높은 것으로 측정되었다. 한외여과에 의한 제거는 내분비계장애물질들의 분자량에 의존하는 것으로 조사되었으며 내분비계장애물질들은 확산이 주요한 수리동역학적 조건에서 제거됨이 판명되었다.
Oxytetracycline과 tetracycline을 넙치, 조피볼락 그리고 참돔에 각각 약욕을 통하여 투여한 다음, 휴약기간 동안 근육조직 내 잔류와 분포를 조사하였다. 실험어는 해수 중에서 일정한 크기의 케이지에 일반 상업용 사료를 주어 사육하였고, 실험에 사용하기에 앞서 15일 동안 환경에 적응시켰다. 약제투여는, oxytetracycline 50 g을 물 1 톤에 투여하고 넙치, 조피볼락, 그리고 참돔을 각각 30분 동안 약욕하였고, tetracycline 18 g을 물 1톤에 투여하고 실험어들을 5시간 동안 약욕하였다. 혈액과 근육시료는 약제투약 전, 약제투약 후 1, 2, 3, 그리고 5일에 각각의 실험어를 대상으로 채취하였다. Oxytetracycline과 tetracycline의 잔류분석은 고형상추출을 한 후 고속액체크로마토그래피를 이용하여 분석하였다. Oxytetracycline의 회수율은 혈액에서는 71-77%이었고, 근육에서는 78-84%를 보였다. 또한, tetracycline의 회수율은 혈액에서 70-79%, 근육에서 73-78%를 보였다. 약욕 직후, 조피볼락의 근육 중 oxytetracycline과 tetracycline의 잔류농도가 넙치와 참돔의 근육 중 잔류농도에 비하여 통계적으로 유의성 있게 높았으며, 약욕 후 5일째에는, 모든 실험어의 근육 중 oxytetracycline과 tetracycline의 잔류농도가 고속액체크로마토그래피의 검출한계인 0.05 mg/kg 이하로 감소하였다. 이상의 결과로부터, oxytetracycline과 tetracycline의 약욕을 통한 투여는 넙치, 조피볼락 그리고 참돔의 근육 중에서 안전휴약기간 보다도 일찍 소실되는 것으로 관찰되었으며, 경구 또는 주사를 통한 투여보다도 체내 소실이 빨리 일어나는 것으로 추정된다.
다환방향족탄화수소는 환경오염이나 식품의 제조공정 과정 중에 생성될 수 있으며, 홍삼은 수증기로 찌고 건조하여 만들어진다. 시료를 핵산으로 추출한 후 물로 세척하고 후로리실 SPE 카트리지로 정제한 후 고속액체크로마토그래피/형광검출기로 분석하였다. 이동상으로는 아세토니트릴과 물의 혼합용액(8:2)을 사용하였으며 형광검출기의 여기파장은 294 nm이었고 형광파장은 404 nm이었다. 평균 회수율은 105%이었으며, 상대표준편차는 0.5이었다. 대상 식품인 홍삼음료 중 벤조피렌은 검출되지 않았다.
A reverse-phase system of HPLC using a linear gradient of acetonitrile and deionized water was developed for the quantification lignans, eleutherosides B and E, in Acanthopanax senticosus. The HPLC system consisted of linear gradient of acetonitrile and deionized water, and UV/VIS detection was set at 210 nm. Both eleutherosides B and E contents in different parts of A. senticosus were determined. As a result, the contents of eleutherosides B and E were measured in the leaves (trace amounts and 0.029 mg/g, respectively), stems (0.107 and 1.015 mg/g, respectively), roots (0.026 and 0.390 mg/g, respectively), and fruits (0.022 and 0.043 mg/g, respectively). Moreover, eleutherosides B and E in the water extract were found 0.011 and 0.171 mg/g, respectively.
담자균효모 Leucosporidium scottii, Leucosporidium fellii, Leucosporidium lari-marini, Rhodosporidium fluviale의 ubiuqinone계를 고속액체크로마토그래피에 의해 결정하였다. Leucosporidium scottii 균주는 교배형 또는 self-sporulating 형에 관계없이 Q-9 또는 Q-10계를 가지고 있었다. 특히 동일 균주에서도 ubiquinone계의 변이가 관찰되었다. 이는 분류지표로서 중요시 되는 ubiquinone계의 재평가를 시사하는 새로운 사실로 간주된다. Leucosporidium fellii는 Q-9, Leucosporidium lari-marini는 Q-8, Rhodosporidium fuviale는 Q-10을 함유하고 있었다. L. lari-marini의 분류학적 위치는 다각적 연구에 기초하여 해명되어야 한다.
An HPLC procedure with UV detection has been developed for the quantitation of flurbiprofen released into isopropyl myristate used as the receptor phase in an in vitro membraneless drug diffusion cell. The drug and the internal standard (oxaprozin) were extracted from isopropyl myristate with a mixture of dimethylsulfoxide:methanol:water (2:1:1) and quantitated using a reverse phase $C_{18}$ column. The chromatograms were completely free from interfering peaks, and the relative retention times of flurbiprofen and the internal standard were 4.9 and 6.8 min, respectively. Calibration plots were linear over the concentration range of $1-200\;{\mu}g/ml$ of flurbiprofen with correlation coefficients, all higher than 0.99. The mean intra-day precision and accuracy among three replicate sets of the assay in a day were 4.26 and 4.52%, respectively, whereas the mean inter-day precision and accuracy were 3.35 and 3.64%, respectively. The mean recovery of the drug was 92.5% over the calibration range. The method was simple, reliable and accurate for the quantitation of flurbiprofen in unpurified isopropyl myristate.
고속액체크로마토그래피 방법을 사용하여 동시에 arbutin, 메탄올에 녹인 methyl, ethyl, prpyl, butyl parben과 glablidien(유용성감초추출물)을 파장 254와 276 nm에서 Gradient methanol로 octdecyl culumn을 사용하여측정하였다. arbutin와 glablidien 농도 0.5-1.0 ug/ml 파라벤류는 0.1-2.0 ug/ml에서 검량선이 직선으로 작성되었다. 검량이 직선으로 나타나 정량분석을 할 수 있다는 것을 알 수 있었다. 샘플 전처리가 크로마토그래피로 측정하기에 좋은 방법이란 것을 판정하기 위하여 일반로션을 사용하여 판정하였다. 이 방법의 정확도는 모든 측정물질(arbutin, methylparaben, ethylparaben, propylparaben, butylparaben, glablidine)의 회수율 상대표준편차(RSD)가 (0.28-2.55%) 나타나 신뢰성 있는 결과를 보였다.A high-performance liquid chromatographic method for the simultaneous determination of arbutine, a mixture of methyl, ethyl, propyl, butyl parabens dissolved in methoanol and Glrablidine(Oil Soluble Licorice), was studied by using a ODS C18 column and a methanol gradient at 254 and 276 nm. Calibration curves were found to be linear in the 0.5-1.0 ug/ml range(compounds arbutine, glrablidin) and 0.1-20 ug/ml (compounds methylpaaben, ethylparaben, propylparaben, butylparaben). Linear regression analysis of the data demonstrates the efficacy of the method in terms of precision and accuracy. An extraction method is developed and validated in order to apply this chromatographic method to a cosmetic lotion. The presision of this method, calculated as the relativ standard deviation(RSD) of the recoveries(0.28-2.55%) was excellent for all compounds.
Simple and precise high-performance liquid chromatographic (HPLC) assay was developed and validated for the determination of a HMG-CoA reductase inhibitor, $lovastatin^{TM}$ and its active metabolite (mevinolinic acid) in human plasma. The method involved solid phase extraction of mevinolinic acid and internal standard using Sep-Pak Cartridge. Samples were analyzed by reversed-phase HPLC using $Capcell-Pak\;C_{18}$ column with ultraviolet detection at 238 nm. The quantitation limit of mevinolinic acid was 2 ng/ml and the calibration curve was linear over the range of 2-50 ng/ml $(r^2>0.999)$ with human plasma. The analyses of quality control samples indicated that the normal values could be predicted with an accuracy >97%. The intra- and inter-day coefficients of variation for the analyses were <10%. The average recoveries were similar (79%) for mevinolinic acid and methylmevinolinic acid. The method described has been successfully applied to the quantification of mevinolinic acid in about 1,000 human plasma samples over six-month period.
마자인(麻子仁)은 뽕나무과에 속하는 대마(Cannabis sativa L.)의 종자로써, 治血虛津虧, 腸燥便秘하며, 中風汗出, 逐水, 利小便, 破積血, 復血脈, 乳婦産後餘疾, 長髮 등에 사용한다고 기록되어 있다. 마자인 종자의 외피에는 환각성분인 Tetrahydrocannabinol (THC) 및 뇌전증과 다발성경화증 등 희귀, 난치성 질환의 치료제로 사용되는 Cannabidiol (CBD) 성분이 함유되어 있다. 따라서 외피를 제거한 마자인은 햄프씨드(Hemp Seed)로써 식품으로 이용되지만, 외피를 제거하지 않은 마자인은 의약품으로써 사용이 되고 있다. 마자인은 윤조탕, 자윤환, 마자인환 등 다양한 한의학 처방에 사용되지만, 외피에 함유되어있는 THC 및 CBD의 함유량 및 안전성에 대한 연구는 밝혀지지 않았다. 이에 마자인 함유처방의 안전성을 입증하는 실험방법을 설계하였다. 우선 의약품으로 유통되는 마자인의 외피에 THC 및 CBD 성분이 있는지를 확인하기 위해 마자인을 다양한 용매별 (물, 헥산 등)로 추출한 후 LC/MS를 이용해 성분 유무를 확인한다. 또한, 마자인 함유 처방 (마자인환, 자윤환, 윤조탕 등)을 복용하였을 경우 혈중에 THC 및 CBD 성분이 있는지를 확인하는 방법으로 실험동물에 마자인 함유 /처방을 투여한 후 혈액을 채취한다. 마찬가지로 성분 유무를 측정하는 방법은 LC/MS를 이용해 확인한다.
최근 내분비계장애물질로 알려진 PAHs 화합물 중 하나인 벤조피렌은 대표적인 PAHs 화합물로 음식을 조리, 가공할 때 식품의 주성분인 탄수화물, 단백질, 지방 등이 분해되어 생성되는 열분해 산물이며 토양, 공기, 물, 식품 등 전 환경매체에서 검출되고 있다. 본 연구에서는 PAHs[benzo(a)anthracene, chrysene, benzo(b)fluoranthene, benzo(k)fluoranthene, benzo(a)pyrene, dibenzo(a,h)anthracene, benzo(g,h,i)perylene, indeno(1,2,3-c,d)pyrene]에 대하여 어류 중 지방의 알칼리 분해시간에 따른 분해효율, 추출 용매에 따른 추출효율, 정제컬럼의 용출량에 따른 정제효율 등을 비교 실험하여 알칼리분해를 이용한 어류 중 PAHs의 전처리방법을 확립하고자 하였다. 균질화된 시료를 알칼리 분해하여 n-hexane으로 추출하고 증류수로 세척한 후 Sep-Pak florisil cartridge로 정제하여 HPLC/FLD(고속액체크로마토그래피/형광검출기) 로 동시 정량 분석하였으며 각각의 PAHs에 대한 회수율은 약 90~106% 수준이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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