• 제목/요약/키워드: 고속액체크로마토그래피

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고속액체크로마토그래피를 이용한 유당분해효소의 활성도 측정 (Assay of $\beta$-Galactosidase Using High Performance Liquid Chromatography)

  • 신명곤;장판식;민봉기;김선창
    • 분석과학
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    • 제5권4호
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    • pp.465-469
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    • 1992
  • 유당분해효소의 활성도를 정량하기 위하여 고속액체크로마토그래피(HPLC)를 사용하는 방법을 확립하였다. Aminex HPX-87C 컬럼 및 RI 검출기를 사용하여 유당, 글루코스 및 갈락토스를 12분 이내에 정량적으로 분석할 수 있었다. 컬럼 온도는 $85^{\circ}C$로 고정하였으며 이동상으로는 탈이온화된 증류수를 사용하였다. ONPG(ortho-nitrophenol-${\beta}$-D-galactopyranoside)를 이용하는 발색법의 결과와 비교하여, 고속액체크로마토그래피에 의한 유당분해효소 활성도 측정법의 타당성을 고찰하였으며, 그 결과 ONPG 방법과 고속액체크로마토그래피 방법에 의한 효소활성도 측정의 실험결과에는 큰 차이가 없었으며, 고속액체크로마토그래피를 사용하는 경우에는 420 nm에 대한 방해 작용이 있는 기질에서도 유당분해효소의 활성도를 측정할 수 있는 장점을 가짐을 확인하였다.

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화학발광고속액체크로마토그래피법에 대한 표준물질인 포스파티딜콜린 하이드로퍼옥사이드의 조제 (Preparation of Standard Phosphatidylcholine Hydroperoxide for Chemiluminescence-HPLC Assay)

  • 송진향;최홍엽;박동기
    • 분석과학
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    • 제11권6호
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    • pp.474-477
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    • 1998
  • 화학발광고속액체크로마토그래피(chemiluminescence-HPLC, CL-HPLC)법을 이용하여 생체지질과산화물의 측정에 있어서 표준물질인 포스파티딜콜린 하이드로퍼옥사이드(phosphatidylcholine hydroperoxide, PCOOH)의 조제법을 개발하였다. 미산화의 포스파티딜콜린(PC)에 로즈벤갈(rose bengal)을 첨가하여 형광분광광도계에서 1시간 조사시킴으로써 광 산화 시켰다. 얻어진 PCOOH의 농도는 FOX(ferrous oxidation-xylenol orange)법으로 측정하여 계산한 후, 일정 농도로 희석하여 CL-HPLC계에서 분석하였다.

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고속 액체크로마토그래피에 의한 고추중의 신미성분 분석 (Analysis of Pungent Principles of Capsicum Fruit by HPLC)

  • 이충영;우상규;이윤수;권익부
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제4권3호
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    • pp.191-198
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    • 1989
  • 고속 액체크로마토그래피를 이용하여 고추 중의 주요 신미성분인 Capsaicin 및 Dihydrocapsaicin을 분석하기 위한 최적 조건을 검토하고 고추의 품종, 재배지역 및 건조 방법에 따른 함량의 차이를 비교 검토하였다. 시료중의 Capsaicin 및 Dihydrocapsaicin을 70% ethanol, $60^{\circ}C$에서 1시간 동안 처리함으로써 효과적으로 추출할 수 있었으며 재현성 및 회수율시험 결과 분석데이타의 해석은 피이크의 면적을 기준으로 하는 것이 바람직함을 알수 있었다. 고추의 품종, 재배지역 및 건조 방법에 따라 함량의 차이가 큰 것으로 나타났으며 특히 건조방법에 의한 차이가 더욱 현저하여 태양건조의 경우가 기계건조의 경우에 비하여 capsaicin의 경우는 최고 80%, dihydrocapsaicin의 경우는 최고 60% 정도 높게 나타났다.

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고속액체크로마토그래피 텐덤질량분석기법을 이용한 사람 혈장 내 소라페닙 농도분석법의 개발 및 검정 (Development and Validation of the Determination of Sorafenib in Human Plasma using Tandem Mass Spectrometry Coupled with Liquid Chromatography)

  • 박대진;이성곤;김우미
    • 생명과학회지
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    • 제22권11호
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    • pp.1456-1462
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    • 2012
  • 소라페닙은 멀티카이네즈 억제제로서 신세포암, 전이성 간세포암 환자의 치료에 효과가 입증된 경구용 항암제이다. 이 연구의 목적은 고속액체크로마토그래피 텐덤질량분석기법(LC/MS/MS)을 이용하여 사람 혈장 내 소라페닙의 농도를 측정하는 효율적인 방법을 개발하고 한국식품의약품안전청(KFDA) 기준에 따라 분석법을 검정하는 것이다. 혈장시료($100{\mu}l$)에 내부표준물질인 chlorantraniliprole을 첨가한 후 이소프로필알콜과 에틸아세테이트로 구성(1:4, v/v)된 0.1% 포름산 함유 추출용액을 혼합하였다. 원심분리 후 상층액을 취하여 원심감압농축하였다. 잔사를 이동상에 재용해하고 Waters사의 역상 XTerra$^{TM}$ C18 칼럼(입자크기 $3.5{\mu}m$)을 장착한 고속액체크로마토그래피 장치에 주입하였다. 액체크로마토그래피는 0.1% 포름산과 10 mM 암모늄 포메이트를 함유한 버퍼용액과 메탄올, 아세토나이트릴을 각각 1:6:3으로 혼합한 용액을 이동상으로 사용하였으며 5분 내에 측정을 완료하였다. 분석대상 물질들은 텐덤질량분석기에서 electrospray 양이온 이온화($ES^+$) 검출방식으로 확인하였으며 소라페닙은 'm/z 465.2 ${\rightarrow}$ 252.5', chlorantraniliprole은 'm/z 484.4 ${\rightarrow}$ 286.2'으로 구성한 multiple reaction monitoring 방법을 사용하였다. 검정 결과, 2-5,000 ng/ml의 농도 구간에서 양호한 직선성($r^2$ > 0.99)과 정확도(90.7-103.9%), 정밀도(10% 이하)를 나타내었다. 새롭게 개발된 LC/MS/MS을 이용한 사람 혈장 내 소라페닙의 농도 측정법은 KFDA 기준을 만족하였으며, 기존의 방법에 비해 민감도가 높은 방법이었다.

역상 고속 액체크로마토그래피를 이용한 인삼 사포닌의 분석 (Determination of Ginseng Saponins by Reversed-Phase High Performance Liquid Chromatography)

  • 정승일;김천석;이노운;최강주;이용구;김일광
    • 분석과학
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    • 제11권6호
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    • pp.436-439
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    • 1998
  • 인삼 사포닌을 역상 고속 액체크로마토그래피 방법을 이용하여 여러 종류의 컬럼으로 분석하였다. 최적 조건은 Novapak $C_{18}$ ODS 역상 칼럼($3.9mm{\times}150mm$, $5{\mu}m$), $CH_3CN/H_2O$ 이성분 이동상 용액과 기울기 제어장치, 그리고 1.5 mL/min의 용매 흐름속도였으며, UV 검출기(203 nm)를 사용하였다. 인삼의 주성분인 ginsenoside $Rb_1$, $Rb_2$, Rc, Rd, Re, Rf 그리고 $Rg_1$ 7종을 50분 안에 양호하게 분리하였다. 각 성분에 대한 검량선은 직선성이 좋았으며, 회귀계수는 0.98~0.99이었다.

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고속액체크로마토그래피에 의한 알로에 제제 중의 알로에신의 정량 (Determination of Aloesin in Aloe Preparations by HPLC)

  • 김경호;김현주;박정일;신영근
    • 약학회지
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    • 제40권2호
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    • pp.177-182
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    • 1996
  • The contents of aloesin in aloe preparations were determined by HPLC. Aloesin was extracted 3 times with ethanol for 30 minutes. The ethanol extract was concentrated and suspend ed in saturated NaCl aqueous solution and successively partitioned with dichloromethane, n-butanol. Prepared samples were analyzed by HPLC on a reverse column(Inertsil ODS-2). In assay, internal standard was a puerarin and regression of calibration curve was 0.998. Recoveries of aloesin added to aloe preparation were 98~123(%).

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한국산 식물식용유지의 성분에 관한 연구 -제 7 보-고속액체크로마토그래피에 의한 흰깨 검은개 들깨중의 아미노산 조성 (Studies on the Constituents of Korean Edible Oils and Fats -Part 7- Amino Acid Composition of white Sesame, Black Sesame and Perilla Seed by High Performance Liquid Chromatography)

  • 김혜자
    • Journal of Nutrition and Health
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    • 제19권3호
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    • pp.190-198
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    • 1986
  • The result of the analytical experimental by HPLC on amino acid which is contained in such samples as white-raw-sesame, white-roast -seasame, black -raw -sesame, black-roast-sesame, raw-perilla seed and roast-perilla seed is as follows ; In the six smaples, the amino acid contents in raw seeds were all higher than those in roasted seeds, and the contents of alutamic acid and lysine were more reduced in roasted seeds than in raw seeds. All the amino acid contents except threoninewere highest in raw perilla seed. The amino acids which the six samples contain to a higher degree were in order of glutamic acid (18 %-21%), threonine(16%-19%), glycine (8%-9%), leucine(77.5%), aspartic acid (7%-7.4%), while methinine (1-2%) was contained least in all six samples followed by Isoleucine(3%).

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고속액체크로마토그래피에 의한 밀전분 지방질에 함유된 리소레시친의 정량 (Quantitative Analysis of Lysophosphatidyl Choline (LPC) in Wheat Starch Lipids by High Performance Liquid Chromatography)

  • 신명곤;민봉기;장판식
    • 분석과학
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    • 제5권3호
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    • pp.339-343
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    • 1992
  • HPLC-UV방법을 이용하여 밀전분 지방질의 주성분인 LPC를 정량하기 위해 HRW 밀전분 지방질로부터 순수한 LPC를 분리하여 LPC의 표준곡선을 작성하였다. 밀 품종별 LPC에서 대한 HPLC peak responses는 시료간 큰 차이를 보여주지 않아 HRW 밀전분 지방질로부터 만든 LPC의 HPLC-UV 표준곡선은 밀전분 지방질에 함유되어 있는 LPC의 함량을 신속하고 정확하게 정량하는 데 이용할 수 있음을 보여 주었다.

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한국산 재배종 감자의 기관, 품종, 부위, 중량별 Glycoalkaloid의 변화 (Glycoalkaloid Content in Korean Cultivated Potato Plant and Tubers by Organ, Variety, Part and Weight)

  • 김정애;소궤신행;한재숙
    • 대한가정학회지
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    • 제42권4호
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    • pp.187-194
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    • 2004
  • The concentration of potato(Solanum tuberosum L.) glycoalkaloids(PCA) (i.e., ${\alpha}$-chaconine and ${\alpha}$-solanine) in Korean cultivated potato plant, and in the different varieties, parts and weights of the potato tubers, were determined by high-performance liquid chromatography(HPLC). The highest concentrations of PGA in potato plants were found in the roots, followed by the stems and leaves. A large quantity of PGA existed in the periderm of 'Atlantic' potatoes, whereas 'Irish Cobbler' contained the lowest amount in five cultivated potato tubers.'Irish Cobbler' potatoes were divided into three parts and the PGA content in each part was determined. It was found that both of the end parts of the potatoes contained higher PGA than the middle part. The PGA contents in four different sizes of potatoes increased toward the smaller size. Thesignificantly high level of PGA was contained in the smallest size potato tubers, which have been used widely for Korean cooking.

고속액체크로마토그래피에 의한 벤조일 클로라이드를 유도체화제로 한 혈청 중의 폴리아민의 분리 정량 (Determination of Polyamines in Serum Using Benzoyl Chloride as Derivatization Agent by HPLC)

  • 이석봉;고용석;김형민;문영회;진원택;신태용
    • 약학회지
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    • 제41권4호
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    • pp.414-420
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    • 1997
  • A rapid and sensitive high performance liquid chromatographic method with UV detection for the analysis of polyamines(putrescine, spermidine, spermine) has been developed. The benzoyl chloride derivatives of putrescine, spermidine and spermine are separated on a mc-Bondapak C18 reverse-phase column with 50% methanol as the mobile phase. This method was applied to the analysis of polyamines in the serum of normal human and uterine cancer patients. The results show that the mean level of polyamines in cancer patients serum is much higher than that in normal human serum.

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