• 제목/요약/키워드: 겔 전기영동

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음극전리수의 침투력과 용해력 연구 (Studies on the permeability and dissolvability of cathodic electrolyzed water)

  • 김점지;강동규;류근걸;이윤배;이종권;이미영
    • 한국산학기술학회:학술대회논문집
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    • 한국산학기술학회 2005년도 춘계학술발표논문집
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    • pp.292-294
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    • 2005
  • 본 연구에서는 전기영동 겔에 대한 음극전리수의 침투력과 녹차성분에 대한 음극전리수의 용해력을 일반 물과 서로 비교하였다. 음극전리수와 증류수로 제조한 CBB-R 염색시약으로 polyacrylamide 겔 상에서 단백질을 다양한 시간 동안 염색한 후 염색강도를 서로 비교하였다. 그 결과 음극전리수로 제조한 CBB-R 염색시약은 증류수로 제조한 CBB-R 염색시약보다 같은 반응 시간 동안에 먼저 단백질을 강하게 염색시켰다. 뿐만 아니라 $25^{\circ}C$에서 음극전리수는 일반 물에 비하여 녹차성분에 대해 극히 탁월한 용해력을 나타내었다.

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꿀벌부채명나방 종령유충에서 유약호르몬 결합단백질의 정제와 특성 (Purification and Characterization of a Juvenile Hormong Binding Protein from Whole Body Homogenates of the Wax Moth, Galleris mellonella Final Instar Larvae)

  • 안기흥;전상학;이경로
    • 한국응용곤충학회지
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    • 제37권1호
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    • pp.59-64
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    • 1998
  • 꿀벌부채명나방 종령유충의 whole body에서 gel filtration 방법으로 유약호르몬 결합 단백질을 분리, 정제하였다. 분리된 단백질은 column chromatography법과 전기영동법에 의해 등가성을 확인하였다. 이 결합단백질은 전기 영동법에 의해 32K, gel filtration 에 의해 28K의 상대적 분자량을 나타냈다. 또한, JH III에 대한 해리도는 3.9$\times$${10}^{-7}$M로 확인되었다.

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동위효소분석(同位酵素分析)에 의(依)한 테다소나무(Pinus taeda L.) 클론의 식별(識別) (Identification of Loblolly Pine (Pinus taeda L.) Clones through Isozyme Analysis)

  • 류장발;나천수
    • 한국산림과학회지
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    • 제76권4호
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    • pp.330-337
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    • 1987
  • 테다소나무의 45 클론의 배유조직(胚乳組織)을 수평식(水平式) 전분(澱粉)겔로 전기영동(電氣泳動)시켰다. 영동(泳動)후 다섯 종류(種類)(GOT, SDH, PGM, MDH, AP)의 동위효소(同位酵素)의 활성(活性)을 조사(調査)한 결과 11개 유전자좌(遺傳子座)에서 각각 두 개 혹은 세 개의 대립유전자(對立遺傳子)가 존재(存在)하는 것으로 밝혀졌다. 상기 유전자좌(遺傳子座)중 열 개의 유전자좌(遺傳子座)의 유전자형(遺傳子型)을 비교하여 45 클론 모두를 식별(識別)할 수 있었다.

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복상어와 고등어의 Trypsin에 관한 비교 효소학적 연구 -1. Trypsin의 정제와 반응조건- (Comparative Studies on the Enzymatic Properties of Trypsins from Cat-shark and Mackerel -1. Purifications and Reaction Conditions of the Trypsins-)

  • 변재형;조득문;허민수
    • 한국수산과학회지
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    • 제24권5호
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    • pp.273-288
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    • 1991
  • 연골어류와 경골어류의 진화에 관한 생리생화학적 차이를 특정한 소화효소의 성질과 구조면에서 밝혀 보고자 본 연구를 시도하였다. 양 어종을 대표하는 종류로서 복상어와 고등어를 시료로 선정하고, 소화효소 중 trypsin을 대상으로 하여, 우선 그 정제방법의 확립, 분자량의 측정, 반응 및 안정성에 미치는 pH 및 온도의 영향, 그리고 금속이온과 화학약제가 반응에 미치는 영향 등을 분석 검토하였으며, 그 내용을 요약하면 다음과 같다. 1. 정제방법에 관하여, 민저 복상어 trypsin은 4 염화탄소로서 탈지 추출한 조효소에 대하여 $50-70\%$ 포화 황산암모늄 염석, DEAE-Sephadex A-50칼럼 크로마토그래피, benzamidine-Sepharose 6B, 친화성 크로마토그래피, Sephadex G-75-120 겔 여과법을 거쳐 disc- 전기영동법, SDS-PAG 전기영동법 및 겔 여과법상 균질상태로 얻었다. 또, 고등어의 trypsin은 역시 4염화탄소로서 탈지 추출한 조효소에 대하여 $30-70\%$포화 황산암모늄 염석, benzamidine-Sepharose 6B 친화성 크로마토 그래피, DEAE-Sephadex A-50 크로마토그래피 등의 재크로마토그래피, benzamidine-Sepharose 6B에 의한 재크로마토그래피 등의 정제과정을 거쳐 disc- 전기영동법, SDS-PAG 전기영동법 및 겔 여과법으로 균질의 가칭 trypsin-A와 B를 달리하였다. 2. 이들 유래를 달리하는 각 trypsin의 분자량은 SDS-PAG 전기영동법으로 측정했을 때, 복상어 trypsin 31,700, 고등어 trypsin-A 30,000, 고등어 trypsin-B 29,000, 그리고 겔 여과법으로 측정했을 때, 복상어 21,500, 고등어 trypsin-A 23,700, 고등어 trypsin-B 21,500이었다. 3. 이들 효소들의 알맞은 반응조건은 복상어 trypsin pH 9.0, $45-50^{\circ}C$, 고등어 trypsin-A와 B pH 8.0, $50^{\circ}C$였다. pH와 온도조건에 따른 안정성을 각각 pH와 온도조건별로 30분간 전처리한 후에 그 활성에 미치는 영향으로 비교해 본 결과, pH의 변화에 대하여는 복상어 trypsin은 pH 10.0에서, 그리고 고등어 trypsin-A는 pH 7.0-9.0에서, 고등어 trypsin-B는 pH 8.0에서 안정하였고, 온도조건에 대하여는 복상어 trypsin은 $25^{\circ}C$까지, 그리고 고등어는 trypsin-A가 $10^{\circ}C$까지, 고등어 trypsin-B는 $35^{\circ}C$까지는 안정하였으나, 그 이후부터는 불안정하였다. 4. 이들 효소들은 공통적으로 금속이온 Ag^{2+},\;Cu^{2+}$$Hg^{2+}$에 의하여 저해를 받았으며, 그 저해의 정도는 고등어 trypsin-A와 B가 보다 심하게 받았다. 또 이들 효소들은 antipain, leupeptin, TLCK(to-syllysine chloromethyl ketone) 및 SBTI(soybean trypsin inhibitor)에 의하여 현저한 저해를 받았고, PMSF(phenylmethane sulfonylfluoride), DFP(diisopropyl fluorophosphate) 및 benzamidine에 의하여 어느정도 저해를 보여 모두 serine-계의 trypsin임을 뒷받침하였다

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수용성 식물 색소 추출 및 판별에 관한 간편한 방법 (Convenient Methods for the Extraction and Discrimination of Water-Soluble Plant Pigments)

  • 정상호;변영호
    • 한국콘텐츠학회논문지
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    • 제9권3호
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    • pp.353-360
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    • 2009
  • 식품이나 음료 첨가제로 사용하는 착색제는 소비자가 가공된 식품을 믿고 인정할 수 있는 중요한 요인의 하나로 꼽을 수 있다. 예전에 식품에 안전하다고 다량 사용되었던 인공 착색제나 염료들의 종류는 근래 독성학적 연구 결과 유해하다고 판정되어 그 수가 급격히 줄고 있다. 따라서 안토시아닌이나 베타시아닌과 같이 안전한 천연 색소는 항암성과 항산화성을 갖고 있기에 그 수요가 꾸준히 늘고 있다. 본 연구에서는 수용성 식물 색소인 안토시아닌과 베타시아닌을 에틸 아세테이트, 에틸 에테르 및 클로로포름과 같은 몇 가지 유기용매로 간단히 추출할 수 있었다. 또한, 추출한 이 두 가지 주된 식물 색소는 citrate buffer (pH 3.0)를 이용한 아가로즈 겔 전기영동법 하나만으로 간편하고 빠른 시간 내에 전개하여 서로를 구분할 수 있었다.

2차원 전기영동 영상의 단백질 반점 정합을 위한 비대칭 확산 모형 (Asymmetric Diffusion Model for Protein Spot Matching in 2-DE Image)

  • 최관덕;윤영우
    • 정보처리학회논문지B
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    • 제15B권6호
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    • pp.561-574
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    • 2008
  • 2차원 전기영동 영상 분석 프로그램의 반점 검출 단계는 영상 분할 알고리즘을 사용해서 겔 영상을 반점 영역으로 분할하고 각 반점 영역을 반점 형태 모형에 정합하여 다음 단계에 필요한 반점 정보를 정량화한다. 현재 영상 분할 알고리즘으로는 분수령 기법이 일반적으로 사용되며, 대표적인 반점 형태 모형으로는 가우스 모형, 확산 모형이 있다. 확산 모형이 가우스 모형보다 실제의 반점 형태에 좀 더 가깝기는 하지만, 반점 형태는 매우 다양하며 특히 x-축과 y-축에 대해서 비대칭적인 형태를 보인다. 반점이 비대칭적 형태인 이유는 2-DE 처리가 통상 이상적인 환경 하에서 이루어질 수 없기 때문에 단백질이 완전히 확산되지 못하기 때문으로 알려져 있다. 따라서 본 논문에서는 비대칭 확산 모형을 제안한다. 비대칭 확산 모형은 초기에는 단백질이 하나의 원으로부터 확산되지만, 시간이 흐름에 따라 x-축과 y-축에 대해서 비대칭적으로 확산된다고 가정한 모형이다. 실험으로서 19개의 겔 영상에 대해서 세 모형별로 반점 정합을 수행하고 세 모형의 비교를 위해서 SNR의 평균을 구하였다. 실험결과인 SNR의 평균은 가우스 모형이 14.22dB, 확산 모형이 20.72dB, 비대칭 확산 모형이 22.85dB이었다. 실험결과로써 비대칭 확산 모형이 가우스 모형과 확산 모형에 비해서 반점 정합에 보다 더 효율적이며 적합한 모형임을 확인하였다.

培養 鷄胚 筋細胞의 分化에 따른 筋特異 蛋白質의 合成과 젖산탈수소 효소의 活性에 관하여 (Synthesis of Muscle Proteins During the Differentiation of Cultured Chicken Pectoralis Muscle Cells)

  • Ha, Doo-Bong;Im, Wook-Bin;Yoo, Byoung-Je
    • 한국동물학회지
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    • 제24권4호
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    • pp.173-188
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    • 1981
  • 근세포의 분화에 있어서의 근특이 단백질의 합성 순서를 구명하기 위하여 계배 근세포를 2$\\sim$9일간 배양하면서 단백질합성야상을 SDS-polyacrylamide 겔전기 영동법, 등전점초점2차원 전기영동법 및 방사자기법으로 분석하였다. Actin은 분화의 초기부터 활발히 합성되어 그 양이 다량으로 축적되나, myosin은 배양 3일째부터 대량 합성되기 시작하였다. Myosin의 대량합성시기는 배양 근원세포가 융합을 활발히 일으키는 시기와 거의 같았다. Myoglobin은 분화초기부터 서서히 합성축적되기 시작하여 배양 5일에서 최대치에 달하였다. Creatine phosphokinase는 배양 3일만에, 그리고 glyceraldehyde dehydrogenase는 6일만에 전기영동상에 검출되었다. Tropomyosin $\\alpha$와 $\\beta$, 그리고 troponin C는 분화초기부터 비교적 다량 합성되고 있었다. 젖산탈수소효소의 활성은 배양 2$\\sim$5일 사이에서 급격히 증가하고 이후 거의 변화가 없었다. 이 효소의 동위효소 조성은 초기 근원세포에서는 $H_4$와 $H_3M$형이 많으나 분화가 진행됨에 따라 $HM_3 와 M_4$형이 서서히 출현하였다. 그리고 배양 5일만에 5종의 동위효소가 모두 검출되었다.

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환경재해 방지를 위한 생물정보로서의 사람 림프구 DNA 손상에 대한 방사선과 살충제의 상승작용 (Synergistic Interaction of Radiation with Pesticide on DNA Damage in Human Lymphocytes as Biological Information for Prevention of Environmental Disaster)

  • 김진규
    • 환경생물
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    • 제19권1호
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    • pp.19-24
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    • 2001
  • 병해충을 막기 위해 농업용 살충제가 광범위하게 사용되고 있다. 농약사용에 따른 생물학적 위해가 우려되며 농약이 또 다른 환경유해요인과 인체에 상승적으로 작용할 경우 농업재해로 이어질 가능성이 있다. 다양한 인자에 의한 DNA손상을 감지하는데 유용한 단세포 겔 전기영동법을 이용하여 살충제와 방사선에 의한 사람 림프구 DNA손상을 평가하였다. 각기 다른 농도로 살충제를 10분간 전처리한 림프구와 정상 림프구에 0-2.0 Gy의 방사선으로 조사한 다음 DNA 손상도를 평가하였다. DNA가닥 절단에 대한 표식인 tail moment의 증가는 감마선에 대해서 뚜렷한 선량-반응 관계를 나타내었다. 단세포 겔 전기영동법을 통한 평가결과 권장 사용농도 이상의 살충제는 림프구에 대한 유전독성을 나타내었을 뿐 아니라 방사선과 함께 상승작용을 일으켜 림프구 DNA손상을 더욱 증가시키는 것이 확인되었다. 이와 같은 결과는 환경재해의 방재 및 예방 조치에 필요한 생물정보를 사전에 제공하는 의미를 가진다.

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꿀벌부채명나방 성충 정소에 의한 아포리포포린-III의 흡수 (Apolipophorin-III uptake by the adult testes in the wax moth, Galleria mellonella)

  • 윤화경
    • 한국산학기술학회논문지
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    • 제17권10호
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    • pp.199-203
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    • 2016
  • 아포리포포린-III (apoLp-III)를 꿀벌부채명나방 종령 유충 혈림프로부터 KBr 농도구배 초원심분리와 겔크로마토그래피(Sephadex G-100)를 이용하여 분리, 정제하였다. KBr 농도구배 초원심분리가 끝난 후, 리포포린을 제외한 분획 (lipophorin-free fractions)을 겔크로마토그래피 시료로 사용하였으며, 겔크로마토그래피를 행한후 sodium dodecyl sulfate (SDS)-전기영동으로 apoLp-III의 정제를 확인하였다. 또한, 본 연구에서는 유충 혈림프로부터 정제된 apoLp-III가 꿀벌부채명나방의 성충 정소에 의해 흡수되는 지를 조사하였다. 우화한 지 1일 또는 2일된 성충으로부터 성충 정소를 차가운 링거액에서 분리한 후 조직 배양의 시료로 사용하였다. 순수 정제한 apoLp-III를 dimethyl sulfoxide (DMSO)에 녹인 형광물질 fluorescein isothiocyanate (FITC)와 상온에서 계속 저어가면서 1시간 동안 배양하였다. FITC로 표지된 apoLp-III (FITC-labeled apoLp-III)를 Sephadex G-25 PD-10 column을 이용하여 정제하고 확인하였다. 정제된 FITC-labeled apoLp-III와 성충 정소 조직을 상온에서 30분간 배양하였다. 배양 후 형광현미경 (fluorescence Axioskop microscope)과 SDS-전기영동을 이용하여 FITC-labeled apoLp-III가 정소 조직으로 들어가는 지의 여부를 확인하였다. 그 결과 FITC-labeled apoLp-III가 성충 정소로 흡수된다는 사실을 알 수 있었다.

검정곰팡이의 분화(分化)에 있어서 폴리아크릴아마이드 겔 전기영동법(電氣泳動法)에 의한 단백질 패턴 연구(硏究) (Polyacrylamide Gel Electrophoresis of the Cell Proteins from Differentiating Aspergillus niger)

  • 박영자;김종협
    • 한국균학회지
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    • 제8권3호
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    • pp.159-166
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    • 1980
  • 검정곰팡이(Aspergillus niger)의 동조적(同調的) 분화(分化)를 시행(施行)하면서 acid-phenol 용성(溶性)인 세포단백질(細包蛋白質)을 추출(抽出)하여 포자형성(胞子形成) 전후(前後)의 단백상(蛋白像)의 변화(變化)를 polyacrylamide gel 전기영동법(電氣泳動法)으로 추구(追究)하였다. 결과(結果)에서 1종(種)의 단백질(蛋白質)(분자량(分子量) 약(約) 27,000 정도(程度))이 포자형성기(胞子形成期)에 신생(新生)함을 알았다. 포자(胞子)의 발아시(發芽時)에는 18개의 단백질(蛋白質)밴드가 있으며 포자형성시(胞子形成時)에는 19개가 있었다. Amido black 색소(色素)의 염색도(染色度)는 분화시기(分化時期)에 따라서 각(各) 밴드마다 각각 많이 달랐다.

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