Jeong Byeong Ryong;Chung Su-Mi;Baek Nam Joo;Koo Kwang Bon;Baik Hyung Suk;Joo Han-Seung;Chang Chung-Soon;Choi Jang Won
Journal of Microbiology
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v.44
no.1
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pp.54-63
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2006
Ferritin is a major eukaryotic protein and in humans is the protein of iron storage. A partial gene fragment of ferritin (255 bp) taken from the total RNA of Periserrula leucophryna, was amplified by RT-PCR using oligonucleotide primers designed from the conserved metal binding domain of eukaryotic ferritin and confirmed by DNA sequencing. Using the $^{32}P-labeled$ partial ferritin cDNA fragment, 28 different clones were obtained by the screening of the P. leucophryna cDNA library prepared in the Uni-ZAP XR vector, sequenced and characterized. The longest clone was named the PLF (Periserrula leucophryna ferritin) gene and the nucleotide and amino acid sequences of this novel gene were deposited in the GenBank databases with accession numbers DQ207752 and ABA55730, respectively. The entire cDNA of PLF clone was 1109 bp (CDS: 129-653), including a coding nucleotide sequence of 525 bp, a 5' -untranslated region of 128 bp, and a 3'-noncoding region of 456 bp. The 5'-UTR contains a putative iron responsive element (IRE) sequence. Ferritin has an open reading frame encoding a polypeptide of 174 amino acids including a hydrophobic signal peptide of 17 amino acids. The predicted molecular weights of the immature and mature ferritin were calculated to be 20.3 kDa and 18.2 kDa, respectively. The region encoding the mature ferritin was subcloned into the pT7-7 expression vector after PCR amplification using the designed primers and included the initiation and termination codons; the recombinant clones were expressed in E. coli BL21(DE3) or E. coli BL21(DE3)pLysE. SDS-PAGE and western blot analysis showed that a ferritin of approximately 18 kDa (mature form) was produced and that by iron staining in native PAGE, it is likely that the recombinant ferritin is correctly folded and assembled into a homopolymer composed of a single subunit.
In this study nitroreductase from Pseudomonas sp. HK-6 capable of degrading 2,4,6-trinitrotoluene (TNT) was characterized. Through a series of purification process including ammonium sulfate precipitation, DEAE-sepharose, and Q-sepharose, three different fractions I, II, and III having the enzyme activity of NTRs whose molecular weights were approximately 27 kDa were detected in fractions from HK-6 cells. Specific activity of the three fractions were approximately 4.85 unit/mg, 5.47 unit/mg, and 5.01 unit/mg, and concentrated to 9.0-, 10.1-, and 9.3-fold compared to crude extract, respectively. The optimal pH and temperature for the three NTR fractions were approximately 7.5 and $30^{\circ}C$, respectively. Metal ions, $Ag^{+}$ , $Cu^{ 2+}$, $Hg^{2+}$ inhibited approximately 70% of enzymes activities of all NTR, while $Fe^{2+}$ did not stimulate or inhibit the activities. Monitoring the effect of chemicals on the enzyme activity revealed that those NTR fractions lost enzyme activity in presence of $\beta$-mercaptoethanol, but were a little influenced by dithiothreitol, EDTA and NaCl. The three NTR fractions demonstrated enzyme activities for nitrobenzene and RDX as well as TNT.
Kim, Hak-Kyu;Hong, Eui-Chul;Kang, Bo-Seok;Park, Mi-Na;Chae, Hyun-Seok;Bang, Han-Tae;Seo, Bo-Young;Choo, Hyo-Jun;Na, Seung-Hwan;Seo, Ok-Suk;HwangBo, Jong
Korean Journal of Poultry Science
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v.37
no.4
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pp.423-431
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2010
This work was carried out to investigate on the retail cut yield and the meat quality of crossbred ducks. A total of 360 pullets that were produced from 4 mating methods used in this work. Four mating method were A) native ducks (female) $\times$ native ducks (male), B) meat-type ducks (female) $\times$ native ducks (male), C) native ducks (female) $\times$ meat-type ducks (male), and D) meat-type ducks (female) $\times$ meat-type ducks (male). Ducks were bred at the flat house, and selected nine ducks with similar weights from each treatment at the certain weeks (A, B, C 8 weeks; D 6 weeks). Selected ducks were slaughtered, calculated the retail cut yield(wing, back, neck, breast, leg), analyzed the physico-chemical compositions, and tested the sensory evaluation. Wing and neck meat ratios of D treatment were lowest (P<0.05), and breast meat ratio of B treatment was high (P<0.05) compared to other treatments. pH of duck meat was no difference among treatments, fat and protein contents of B treatment was highest, and collagen contents of D treatment was highest among all treatments. Meat color and physical compositions was no difference among treatments. Juiciness of D treatment meats was highest, and there was no difference between B and D treatments. Finally, mating method of native duck and meat-type duck affected on the retail cut yield, but did not improve on the physico-chemical compositions and sensory evaluation.
Park, Sung-Yong;Wang, Seung-Hyun;Chin, Koo-Bok;Kim, Young-Dae
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.36
no.4
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pp.594-597
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2004
Effects of various levels and molecular weights (MWs) of chitooligosaccharides and chitosan with pork salt-soluble protein (SSP) on pH, moisture (%), viscosity, and hardness of protein-chitosan mixtures were determined in a model study. Mixtures of 0.15, 0.3, and 0.45% chitosan at various MWs (Low, 1.5 kDa; Medium, 30-50 kDa; High, 200 kDa) were dissolved in 3% SSP solution for measurement of pH and viscosity at $20^{\circ}C$. pH value increased with addition of 0.45% low MW of chitooligosacchearides into SSP (p<0.05), whereas decreased with addition of 0.45% medium MW and 0.3% or higher level of high MW chitosan. Viscosity increased with addition of more than 0.3% either medium or high MW chitosan (p<0.05), as compared to mixture with low MW chitolligosaccharide and control (p<0.05). No differences in gel pH, moisture, and hardness values were observed among treatments (p>0.05). Further study will be performed to evaluate rheological properties actual meat products with various levels and MWs of chitosan.
Fucoidans were isolated from Hizikia fusiformis and Sargassum fulvellum and characterized on their chemical properties. Crude fucoidans were extracted at $65^{\circ}C$ for 1hr with acid solution of pH 2.0, and cetylpyridinum chloride was used for partial purification. The yields of partially purified fucoidans were $2.51\%$ for H. fusiformis, and $65\%$ for S. fulvellum, respectively. The partially purified fucoidans were separated into 3 fractions by DEAE-Sephadex A-25 ion exchange column chromatography and the major fractions were refractionated with fractional preripitation with ethanol. $60-70\%$ ethanol precipitated fraction(P-70) of H. fusiformis and $60-65\%$ ethanol precipitated fraction(P-65) of S. fulvellum turned out to be homogeneous by cellulose acetate electrophoresis and gel filtration chromatography. The molar ratios of fucose, galactose, and sulfate In the purified fucoidans were 1 : 0.66 2.74 for H. fusiformis and 1 : 0.24. 1.46 for 5. fulvellum. The averaged molecular weights of the purified fucoidans from H. fusiformis and S. fulvellum were 26,000 and 105,000, respectively.
The crystal structure of Bis(ethylenediamine) cuprate(II)$\cdot$dichromate, $Cu(C_2H_8N_2)_2{\cdot}Cr_2O_7$, has been determined by X-ray crystallography. Crystal data: a=5.682(2), b=8.567(3), c=14.839(3) ${\AA},\;{\alpha}=97.50(2),\;{\beta}=101.06(1),\;{\gamma}=109.38(2)^{\circ}$ Triclinic, P-1 (SG No=2), Z=2, V=653.9(2) ${\AA}^3,\;D_c=2.030gcm^{-3},\;{\mu}=3.273mm^{-1}$. The structure was solved by Patterson method and refined by full matrix least-square methods uslng unit weights. The final R and S values were $R_1=0.0256,\;R_w=0.0708,\;R_{all}=0.0316,\;S=1.151$ for the observed 2291 reflections. The two cupper complex ion has the usual distorted octahedral structure with mean four Cu-N distances of 2.010(3) $\AA$ and the longer mean Cu-O distance of 2.525(2) $\AA$. The Cu-complex and dichromate ions are linked to form infinite chain arranged alternatively along the [111]-direction. The neighboring chains in the (0-11) plane are connected with N1-O5 and N3-O1 hydrogen bonds.
In March 1997, a new rhabdovirus was isolated from moribund cultured Japanese flounder Paralichthys olivaceus in sea water tank and cage culture systems in Kyung-Nam and Chun-Nam province, Korea. At temperature $15^{\circ}C$ the virus replicated and induced cytopathic effects (CPE), which progressed to eventual cytolysis, in susceptible cell lines, including RTG-2 and EPC. The CHES-214 cell line was refractory. Virus particles were bullet-shaped and measured $70nm{\times}100$ to 150 nm in size. The isolate was sensitive to pH 3, to diethyl ether, and to heat ($50^{\circ}C$ 5 min, $60^{\circ}C$ 1 min). Viral replication was not inhibited by $10^{-4}$ M 5-iododeoxyuridine. Virus infectivity was reduced by anti-HRV (8401-H) rabbit serum, but can not reduced by antisera against infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV), chum salmon reovirus (CSV), retrovirus of salmonid (RVS) and infectious pancreatic necrosis virus (IPNV). HRV virus antigen was detected by fluorescent antibody test (FAT) in the cytoplasm of infected EPC cell. Purified isolates virions were composed of: polymerase (L), glycoprotein (G), nucleoprotein (N) and 2 matrix proteins (M1 and M2). Based upon their relative mobilities, the estimated molecular weights of the proteins were: L, 160 kDa; G, 55 kDa; N, 45 kDa; M1, 26 kDa; and M2, 22 kDa.
The experiment was conducted to investigate the effects of feeding herbaceous peat on growth performance and meat quality of Holstein beef cattle. Total of 20 Holstein beef cattle (18~20 month of age, $657{\pm}31kg$ body weight) were conventionally and separately fed a concentrate diet and rice straw for 134 days. The dietary treatments were randomly assigned by complete block design into four treatments, each of which were five heads in early fattening stage. The treatments in this study were the control group fed basal diet, feeding herbaceous peat group (5%/diet, T1), feeding coated vitamin C group (20g/head, T2) and feeding mixture of herbaceous peat and coated vitamin C group (5%/diet+20g/head, T3). The initial body weights between the groups of control, T1, T2 and T3 were similar showing with $689{\pm}31$, $661{\pm}24$, $659{\pm}32$ and $622{\pm}19kg$. The daily body weight gain was higher in T3 by 8.3% than that in the control (p<0.05). Glucose concentration in control group was the highest among treatments (p<0.05), but there was no significant differences between treatments on AST (aspartate aminotransferase), ALT (alanine aminotransferase), BUN and total protein concentrations of blood. The fat content of sirloin in the T2 was significantly higher than control and T1 group (p<0.05). Meat color (CIE) values in T2 was the highest among treatments (p<0.05), and other treatments also increased those values. In overall, the feeding herbaceous peat and vitamin C to the Holstein beef cattle was considered to have positive effects on the growth performance of Holstein beef cattle. In addition, the effects on the performances of animals were more improved when fed herbaceous peat and vitamin C concurrently.
The present study was investigated fatty acid composition of the phospholipid in the RBC membrane, liver and microsomal fraction after vitamin E and/or insulin treatment to evaluate the effect of vitamin E on the oxidative stress in STZ-treated rat and BB rat. Results obtained through the experiments were summarized as follows; 1. Effect of vitamin E and/or insulin treatment in STZ-treated rat 1) In the insulin treated group and the combination treated groups of vitamin E with insulin, body weights were increased compared to STZ-treated rat(STZ control group). Especially it was more significantly increased in the combination treated group of high dose vitamin E with insulin. 2) The composition of fatty acids of the phospholipid in RBC membrane, liver and microsomal fractions was shown a decreased C16:1, C18:1, C20:4 and an increased C16:0, C18:0, C18:2 in STZ control group compared to normal control group. In RBC membrane, liver and microsomal fractions after vitamin E with insulin treatment in STZ-treated rat, effect on the composition of fatty acids of the phospholipid was shown the result of a decreased C16:0, C18:0, C18:2 and an increased C16:1, C18:1, C20:4. 3) Hemolysis rate of the RBC to $H_2O_2$ was increased in the STZ control group and it was decreased below the hemolysis level of normal control group by vitamin E treatment. 2. Effect of vitamin E and/or insulin treatment in BB rat 4) Only in microsomal fraction, fatty acid composition was different between insulin treatment group and vitamin E with insulin treatment group. It was increased C16:0 and C18:1, and decreased C18:0 and C18:2 in vitamin E with insulin treatment group: But C20:4 was not different in two groups. These results suggest that the combination treatment of vitamin E and insulin could prevent the oxidative change of fatty acids in P-lipid of the RBC membrane, liver and microsomal fraction in STZ-treated rats and BB rats.
The effects of green tea consumption and/or exercise for 12weeks on body weight and select biochemical markers in plasma were evaluated in obese adolescents with a fat ratio of greater than 25%. The subjects were randomly divided into a control group (n=9), green tea consumption group (n=9), exercise group (n=9) and green tea consumption with exercise group (n=9). Subjects in both green tea consumption group and green tea consumption with exercise group were given more than five cups of green tea extract in hot water ($90^{\circ}C$) daily, equivalent to 1.5-1.7 g dry green tea, for 12 weeks. Subjects in both the exercise group and green tea consumption with exercise group participated in a training program (HRmax 60-70%, 60 min/day) for 12 weeks. Control subjects were only given water equal to the quantity of green tea being given to the subjects of green tea consumption. No significant changes body weights were seen in any of these treatments, but the waist to hip ratio was reduced with treatments of both green tea and exercise. The control group showed no significant changes in TNF-$\alpha$, IL-6 and leptin levels. Green tea consumption reduced leptin (p<0.05), TNF-$\alpha$, and leptin levels. Exercise lowered TNF-$\alpha$ (p<0.05), IL-6 (p<0.01), and leptin (p<0.05) concentrations. Meanwhile, a combination of green tea consumption and exercise lowered TNF-$\alpha$, IL-6 (p<0.05) and leptin (p<0.05) levels. These results indicate that green tea consumption and exercise both had a positive effect on the reduction of inflammatory cytokines, TNF-$\alpha$, IL-6 and leptin, in obese adolescents, but no synergistic effect on the reduction of these cytokines.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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