• 한국응용곤충학회지
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• 제53권4호
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• pp.331-338
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• 2014

시스타틴(cystatin: CST)은 C1A류 시스테인 단백질분해효소에 대한 경쟁적 가역억제자로서 동식물류에서 파파인과 같은 캐셉신을 억제대상으로 작용하게 된다. 바이러스 유래 CST (CpBV-CST1)이 폴리드나바이러스의 일종인 CpBV (Cotesia plutellae bracovirus)에서 동정되었다. 기존 연구는 이 유전자의 과발현이 배추좀나방(Plutella xylostella) 유충의 면역 및 발육을 교란한다는 것을 보여 주었다. 본 연구는 이 유전자의 단백질 기능을 분석하기 위해 세균발현시스템을 이용하여 재조합단백질(rCpBV-CST1)을 형성하여 단백질분해효소에 대한 활성억제효과를 결정하고, 곤충의 면역과 발육에 대한 생리적 억제효과를 분석했다. 이 유전자 번역부위는 138 개 아미노산으로 약 15 kDa 크기의 단백질로 추정되었다. CpBV-CST1이 먼저 pGEX 발현벡터에 재조합되고, BL21 STAR (DE3) competent cells에 형질전환된 후 0.5 mM IPTG로 4 시간동안 과발현되었다. 분리된 재조합단백질은 파파인에 대한 뚜렷한 억제효과를 나타냈다. 이 재조합단백질은 파밤나방(Spodoptera exigua)에 대해서 혈구소낭형성의 세포성 면역반응을 억제하고, 경구로 처리할 때 배추좀나방의 유충발육을 처리 농도에 비례하여 제한시켰다. 이상의 결과는 CpBV-CST1이 해충 밀도 억제에 응용될 수 있음을 제시하고 있다.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제22권7호
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• pp.739-742
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• 2001

Reactions of [Cp*Ir(η3-CH2CHCHPh)(NCMe)]OTf (1) with HC≡CR (R = H, CH2OH) in the presence of bases, B (B=NEt3, PPh3, AsPh3) produce stable Cp*Ir-η3-allyl-alkenyl compounds [Cp*Ir(η3-CH2CHCHPh)(-CH=CH-+B)]OTf (2) and [Cp*Ir(η3-CH2CHCHPh)(-C(CH2OH)=CH- +PPh3)]OTf (3), respectively in high yields. Cp*Ir-η3-allyl-alkynyl compounds Cp*Ir(η3-CH2CHCHPh(-C≡C-R') (4) and Cp*(η3-CH2CHCHPh)Ir-C≡C-p-C6H4-C≡C-Ir(η3-CH2CHCHPh)Cp* (5) have been prepared from reactions of 1 with HC≡CR'(R' = C6H5, p-C6H4CH3, C3H5, C6H9) and HC≡C-p-C6H4-C≡CH in the presence of NEt3.

• BMB Reports
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• 제43권4호
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• pp.279-283
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• 2010

Polydnavirus genome is segmented and dispersed on host wasp chromosome. After replication, the segments form double- stranded circular DNAs and embedded in viral coat proteins. These viral particles are delivered into a parasitized host along with parasitoid eggs. A serine-rich protein (SRP) is predicted in a polydnavirus, Cotesia plutellae bracovirus (CpBV), genome in its segment no. 33 (CpBV-S33), creating CpBV-SRP1. This study explored its expression and physiological function in the diamondback moth, Plutella xylostella, larvae parasitized by C. plutellae. CpBV-SRP1 encodes 122 amino acids with 26 serines and several predicted phosphorylation sites. It is persistently expressed in all tested tissues of parasitized P. xylostella including hemocyte, fat body, and gut. Its physiological function was analyzed by injecting CpBV-S33 and inducing its expression in nonparasitized P. xylostella by a technique called SERI (segment expression and RNA interference). The expression of CpBV-SRP1 significantly impaired the spreading behavior and total cell count of hemocytes of treated larvae. Subsequent RNA interference of CpBV-SRP1 rescued the immunosuppressive response. This study reports the persistent expression of CpBV-SRP1 in a parasitized host and its parasitic role in suppressing the host immune response by altering hemocyte behavior and survival.

• 대한화학회지
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• 제41권12호
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• pp.639-644
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• 1997

톨루엔 용매중에서 Cp*Ru(CO)Cl2(2, Cp*=η5-C5Me5)과 CO를 반응시켜 상자기성의 3가 카르보닐루테늄착물 [Cp*Ru(CO)Cl2](2)를 합성하였다. 자기화율의 측정으로부터 얻어진 착물(2)의 유효자기모멘트 값은 1.81 B. M.으로 이는 분자내 짝을 이루지 않는 전자가 1개 있는 경우와 거의 일치하였다. 착물(2)는 톨루엔 용매중에서 KBr과의 반응에 의해 3가의 디브로모루테늄착물 Cp*Ru(CO)Br2(3)으로 변환되었고, 톨루엔 용매중에서 포스핀과의 반응에 의해서는 반자기성인 2가 루테늄착물 Cp*Ru(CO)(PR3)Cl (4a∼4e, PR3=PMe3, PEt3, PMePh2, PPh3, PCy3)로 쉽게 환원되었다.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제10권1호
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• pp.1-7
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• 2007

The induction of cellular and humoral immunity and cytokine gene expression by synthetic CpG oligodexoynucleotides (CpG-ODNs) has not been investigated systematically in olive flounder Paralichthys olivaceus in vivo. We optimized the proper concentration of CpG-ODNs using an in vitro assay for the superoxide anion $(O_2^-)$. CpG-ODNs induced $O_2^-$ and nitric oxide (NO) production, lysozyme activity, and the proinflammatory cytokine gene expression of $IL-1{\beta}$ and $TNF-{\alpha}$ in olive flounder significantly in vivo, whereas non-CpG-ODNs did not produce these effects or produced them to a lesser extent. This implied that CpG-ODNs could stimulate cellular and humoral immunity and cytokine gene expression in olive flounder. This is the first evidence of NO production and the first study on the mRNA expression of the proinflammatory cytokine genes $IL-1{\beta}$ and $TNF-{\alpha}$ in olive flounder in response to CpG-ODNs. Comparison of the variation in NO production and lysozyme activity to that of other studies led us to postulate that a group-specific difference exists in the immune responses of olive flounder against CpG-ODNs. Furthermore, the detailed immunostimulatory spectrum of CpG-ODNs in olive flounder could be a useful index with which to analyze the effect of CpG-ODNs against the challenge test prior to field applications.

• Journal of Animal Science and Technology
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• 제64권5호
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• pp.854-862
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• 2022

The purpose of this study is to determine the impact of different levels of crude protein (CP) diets supplemented with dietary protease on the growth performance and nutrient digestibility of the weanling pigs. In a 5-week study, 100 crossbred ([Landrace × Yorkshire] × Duroc) of weaner pigs that have an average initial body weight (BW) of 7.17±1.06 kg were assigned to one of four dietary treatments with 5 replications and 5 pigs (3 gilts and 2 castrated male pigs) per pen in a randomized complete block design. The dietary treatments were as follows: Phase 1: CON: basal diets (20.60% CP); low protein (LP): CON - 0.30% CP; PLP1: (CON - 0.30% CP) + 0.05% protease; PLP2: (CON - 0.50% CP) + 0.05% protease. Phase 2: CON: basal diets (18.88% CP); LP: CON - 0.30% CP; PLP1: (CON - 0.30% CP) + 0.05% protease; PLP2: (CON - 0.50% CP) + 0.05% protease. The addition of protease to low CP diets significantly increased the feed conversion ratio (FCR) (p = 0.039), BW (p = 0.046), average daily gain (ADG) (p = 0.049), and average daily feed intake (ADFI) tended to increase (p = 0.053) in the young pigs during phase 1. However, FCR tended to increase throughout the experiment but did not change during phase 2, whereas BW, ADG, and ADFI stayed unchanged throughout phase 2 and overall. There was no significant difference in dry matter, nitrogen (N), and gross energy of nutrient digestibility in all phases and overall in weaned pigs with low CP when protease was fed. In contrast, adding protease to the low CP diets increased the tendency of N digestibility (p = 0.059) during phase 1. It is concluded that dietary protease supplementation tended to increase N retention during the first phase of the weaning period, hence increasing piglet performance.

• 한국식품영양과학회지
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• 제40권1호
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• pp.20-28
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• 2011

면역활성을 증진시키기 위하여 수삼추출물(GE, $65^{\circ}$Bx)이 첨가된 액체배지(mushroom complete medium, MCM)에서 상황(Phellinus linteus, PL) 균사체를 배양하여 배양액과 균사체가 모두 포함된 심부배양물을 조제하고 조다당획분(CP)으로 분획하였다. MCM 부피에 대하여 GE가 15% 첨가된 혼합 액체배지에서 배양된 수삼추출물-상황 심부배양물로부터 분획된 PL-GE-15-CP는 $100{\mu}g$/mL의 시료농도에서 GE-5와 10%가 첨가된 PL-GE-5와 10-CP 및 GE가 첨가되지 않은 일반-상황 심부배양물의 PL-CP보다 유의적으로 높은 마크로파지(saline 대조군의 1.45배) 및 Peyer's patch를 경유한 장관면역 활성(1.46배)을 확인할 수 있었다. 활성획분인 PL-GE-15-CP는 DEAE-Sepharose CL-6B를 이용한 분획을 통하여 PL-GE-15-CP의 다른 획분 또는 시료대조군인 PL-CP로부터 분획된 모든 획분보다 유의적으로 높은 마크로파지 활성, IL-12 생산능 및 장관면역 활성(각각 1.54, 3.96과 1.56배)을 갖는 다당획분인 PL-GE-15-CP-II를 분리할 수 있었다. 또한, PL-GE-15-CP-II는 동일 NaCl 농도에서 분획된 시료대조군인 PL-CP-II보다 시료농도 $200{\mu}g$/mouse에서 colon 26-M3.1 carcinoma cell에 대하여 유의적으로 높은 암전이 억제활성도 보여주었다(대조군의 57.3% 억제활성). 한편, 활성 다당획분인 PL-GE-15-CP-II는 주로 중성당(82.45%)과 산성당(12.99%)으로 구성되어 있었으며 구성당 분석결과에서 산성당과 함께 Ara, Man, Gal과 Glc의 중성당으로 구성되어져 있음을 확인할수 있었다(molar ratio; 0.52:0.97:0.63:1.00:0.54). 결론적으로 GE가 첨가된 상황 심부배양물은 일반배지에서의 상황 심부배양물보다 면역활성이 높아 GE가 균사체 활성의 증진에 영향을 주고 있는 것으로 생각되며, 특히 활성성분으로 다당류가 중요하게 관여하고 있는 것으로 사료된다.

• Reproductive and Developmental Biology
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• 제35권1호
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• pp.93-97
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• 2011

Previously, we reported that the osmolarity conditions in the satellite region were affected CpG DNA methylation status while Pre-1 sequence was not affected CpG DNA methylation in pNT blastocyst stage. This study was conducted to investigate the DNA methylation status of repeat sequences in pig nuclear transfer (pNT) embryos produced under different osmolarity culture conditions. Control group of pNT embryos was cultured in PZM-3 for six days. Other two treatment groups of pNT embryos were cultured in modified PZM-3 with 138 mM NaCl or 0.05 M sucrose (mPZM-3, 320 mOsmol) for two days, and then cultured in PZM-3 (270 mOsmol) for four days. The DNA methylation status of the Pre-1 sequences in blastocysts was characterized using a bisulfite-sequencing method. Intriguingly, in the present study, we found the unique DNA methylation at several non-CpG sequences at the Pre-1 sequences in all groups. The non-CpG methylation was hypermethylated in all three groups, including in vivo group (86.90% of PZM-3; 83.87% of NaCl; 84.82% of sucrose; 90.94% of in vivo embryos). To determine whether certain non-CpG methylated sites were preferentially methylated, we also investigated the methylation degree of CpA, CpT and CpC. Excepting in vivo group, preference of methylation was CpT>CpC>CpA in all three groups investigated. These results indicate that DNA methylation of Pre-1 sequences was hypermethylated in CpG as well as non-CpG site, regardless modification of osmolarity in a culture media.

• Journal of Gastric Cancer
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• 제5권2호
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• pp.95-100
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• 2005

목적: Critical pathway (CP)는 특정질환 표준화를 통해 적정한 진료 및 최소한의 표준진료를 행하여 진료의 질을 높이고 비용을 감소시켜 환자 및 의료진의 만족도를 높이기 위해 시도되고 있다. 본 연구는 위암수술 환자에서 CP를 개발 및 적용하고 이를 통해 치료결과의 향상을 이룰 수 있는지 알아보고자 하였다. 대상 및 방법: 2003년 10월부터 2004년 8월까지 가톨릭대학교 의과대학 강남성모병원에서 위암으로 수술 받은 185명의 환자 중 타장기 원발암이 없고, 근치적절제술을 시행 받은 환자 117예에서, CP를 적용한 26예와 동기간 동안 CP를 적용하지 않은 환자 91예의 임상적 특성, 수술 후 경과, 진료비용, 입원기간 및 환자 91예의 임상적 특성, 수술 후 경과, 진료비용, 임원기간 및 환자 만족도 등을 비교하여 위암수술에서 CP의 유용성을 알아보았다. CP를 개발하기 위하여 진료, 간호, 원무, 영양과 등이 참여하는 팀을 구성하여 외래검사 흐름도, 수술 전, 후 처방지, 경과기록 등을 표준화한 프로토콜을 작성하였다. 결과: CP환자 26명 중 1명은 십이지장 단단부 누출로, 1명은 술 후 위정체로 인한 장기 입원 및 재수술이 불가피 하여 제외되어 최종 분석된 환자는 24명이었다. 24명의 환자 중 8명에서 재원기간의 지연으로 인한 변이가 발생하였는데 6명은 환자가 자의적으로 퇴원을 거부하여 수술후 $1\∼2$일이 지연되었으며, 1명은 술 후 위정체로 2일 지연되었고, 1명은 수술 후 중환자실 입원 및 관찰기간이 필요하여 4일간 지연되어 변이율(variance rate)은 8/26 ($30.8\%$)였다. 평균 재원기간은 CPrns은 11.3일($10\∼15$일)이었고, Non-CP군은 17.5일($9\∼68$일)로 CPrns이 약 6일 짧았다(P<0.05), 술 후 평균 재원기간의 경우 CP군과 Non-CP군 각각 8.3일($7\∼12$일), 10.3일($7\~68$일)로 차이가 있으나 통계적으로 유의하지는 않았다(P>0.05). 양 군에서의 재원기간 중 총 진료비는 CP군이 평균 4,863,685원, Non-CP군이 평균 6,292,200원으로 CP군의 진료비가 낮았으나, 일당 진료비는 CP군은 430,414원, Non-CP군에서 높았음을 알 수 있었다(P<0.05). 13가지 항목의 만족도 조사에서도 CP군이 Non-CP군에 비해 높았다(P<0.05). 결론: 저자들이 개발하여 위암수술 환자에 적용한 CP 프로그램은 재원기간을 줄이고 총 진료비를 감소시킨 반면 일일 진료비의 상승과 환자 및 의료진의 만족도를 높일 수 있었다. 향후 다기관이 참여하는 전향적인 연구를 통해 보다 적절한 표준진료지침을 개발하여 그 효용성을 객관화 시켜야 할 것으로 사료된다.

• 한국수산과학회지
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• 제41권6호
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• pp.409-413
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• 2008

A simple method for the purification of porphyran from laver Porphyra yezoensis was developed to obtain information for the development of food materials with biological functionality. Crude porphyran (CP) was extracted from dried laver in boiling water for 3 h, and then fractionated using cetylpyridinium chloride into an acidic fraction (CP-F1) and a neutral fraction (CP-F2). CP-F1 was fractionated further by fractional ethanol precipitation. Fraction CP-F1-70, precipitated at an ethanol concentration of 61-70% was the major fraction containing 68.1% of the yield from the initial fraction CP-F1. The CP-F1-70 fraction displayed a single band on Sepharose CL-4B with a molecular mass of 550 kDa, indicating a homogeneous polysaccharide. The molar ratio of galactose, 3,6-anhydro-L-galactose, 6-0-methyl-D-galactose and ester sulfate of CP-F1-70 was 1:0.32:0.07:0.53. This method is very useful for rapid and large-scale preparation of purified porphyran because it is compatible with mass production.