근권토양으로부터 고추역병균을 포함한 다양한 식물 병원성 곰팡이에 대하여 항균활성이 강한 세균을 분리하였다. 이 세균은 16S rRNA gene서열 분석 결과 Lysobacter enzymogens로 동정되었고 LE429로 명명 하였다. LE429는 chitinase, ${\beta}-1$, 3-glucanase, protease, gelatinase, lipase 및 항생물질과 같은 다양한 이차대사산물을 분비하였다. 항생물질은 diaon HP-20 및 sephadex LH-20 컬럼크로마토그래피 및 HPLC로 정제하여, GC-EI 및 GC-CI분석을 통하여 phenylacetic acid로 동정되었다. Field 실험에서 LE429의 고추 병해 억제 효과를 조사하기 위해 LE429배양액(CB), Neem oil 용액 (NO), LE429배양액과 Neem oil 용액을 섞은 혼합액(CB+NO), 그리고 대조구로서 물(CON)을 각각 고추에 처리하였다. 고추의 수량구성요소는 일반적으로 CB 처리구가 가장 높았고, CB+NO, CON 그리고 NO 순서로 나타났다. CB 처리구에서 병원성 곰팡이는 강하게 억제 되었지만, 몇몇 해충이 발견되었다. NO 처리구에서는 해충은 발견 되지 않았지만, 병원성 곰팡이가 발견 되었다. 하지만, CB+NO 처리구에서 병원성 곰팡이 및 해충이 전혀 발견 되지 않았다. 결론적으로, 2차 대 사산물을 생산하는 LE429와 Neem oil의 혼합액은 고추에 발생하는 병원성 곰팡이와 해충에 대한 좋은 생물학적 방제제가 될 수 있다고 사료된다.
Arce, Debora Pamela;Tonon, Claudia;Zanetti, Maria Eugenia;Godoy, Andrea Veronica;Hirose, Susumu;Casalongue, Claudia Anahi
BMB Reports
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제39권4호
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pp.355-360
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2006
To gain a better understanding on the function of the potato Solanum tuberosum Multiprotein Bridging Factor 1 protein (StMBF1) its interaction with the TATA box binding protein (TBP) was demonstrated. In addition we reported that StMBF1 rescues the yeast mbf1 mutant phenotype, indicating its role as a plant co-activator. These data reinforce the hypothesis that MBF1 function is also conserved among non closely related plant species. In addition, measurement of StMBF1 protein level by Western blot using anti-StMBF1 antibodies indicated that the protein level increased upon $H_2O_2$ and heat shock treatments. However, the potato $\beta$-1,3-glucanase protein level was not changed under the same experimental conditions. These data indicate that StMBF1 participates in the cell stress response against oxidative stress allowing us to suggest that MBF1 genes from different plant groups may share similar functions.
Kim, Do Young;Shin, Dong-Ha;Jung, Sora;Kim, Hyangmi;Lee, Jong Suk;Cho, Han-Young;Bae, Kyung Sook;Sung, Chang-Keun;Rhee, Young Ha;Son, Kwang-Hee;Park, Ho-Yong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제24권7호
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pp.943-953
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2014
The XylH gene (1,167-bp) encoding a novel hemicellulase (41,584 Da) was identified from the genome of Microbacterium trichothecenolyticum HY-17, a gastrointestinal bacterium of Gryllotalpa orientalis. The enzyme consisted of a single catalytic domain, which is 74% identical to that of an endo-${\beta}$-1,4-xylanase (GH10) from Isoptericola variabilis 225. Unlike other endo-${\beta}$-1,4-xylanases from invertebrate-symbiotic bacteria, rXylH was an alkali-tolerant multifunctional enzyme possessing endo-${\beta}$-1,4-xylanase activity together with ${\beta}$-1,3/${\beta}$-1,4-glucanase activity, which exhibited its highest xylanolytic activity at pH 9.0 and 60oC, and was relatively stable within a broad pH range of 5.0-10.0. The susceptibilities of different xylosebased polysaccharides to the XylH were assessed to be as follows: oat spelts xylan > beechwood xylan > birchwood xylan > wheat arabinoxylan. rXylH was also able to readily cleave p-nitrophenyl (pNP) cellobioside and pNP-xylopyranoside, but did not hydrolyze other pNP-sugar derivatives, xylobiose, or hexose-based materials. Enzymatic hydrolysis of birchwood xylan resulted in the product composition of xylobiose (71.2%) and xylotriose (28.8%) as end products.
Indigenous strains of Trichoderma species isolated from rhizosphere soils of Tea gardens of Assam, north eastern state of India were assessed for in vitro antagonism against two important tea fungal pathogens namely Pestalotia theae and Fusarium solani. A potent antagonist against both tea pathogenic fungi, designated as SDRLIN1, was selected and identified as Trichoderma viride. The strain also showed substantial antifungal activity against five standard phytopathogenic fungi. Culture filtrate collected from stationary growth phase of the antagonist demonstrated a significantly higher degree of inhibitory activity against all the test fungi, demonstrating the presence of an optimal blend of extracellular antifungal metabolites. Moreover, quantitative enzyme assay of exponential and stationary culture filtrates revealed that the activity of cellulase, ${\beta}$-1,3-glucanase, pectinase, and amylase was highest in the exponential phase, whereas the activity of proteases and chitinase was noted highest in the stationary phase. Morphological changes such as hyphal swelling and distortion were also observed in the fungal pathogen grown on potato dextrose agar containing stationary phase culture filtrate. Moreover, the antifungal activity of the filtrate was significantly reduced but not entirely after heat or proteinase K treatment, demonstrating substantial role of certain unknown thermostable antifungal compound(s) in the inhibitory activity.
Habrylo, Olivier;Song, Xinghan;Forster, Anne;Jeltsch, Jean-Marc;Phalip, Vincent
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제22권8호
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pp.1118-1126
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2012
Four putative GH12 genes were found in the Fusarium graminearum genome. The corresponding proteins were expressed in Escherichia coli, purified, and evaluated. FGSG_05851 and FGSG_11037 displayed high activities towards xyloglucan ($V_{max}$ of 4 and $11{\mu}mol/min$, respectively), whereas FGSG_07892 and FGSG_16349 were much less active with this substrate (0.081 and $0.004{\mu}mol/min$, respectively). However, all four of these enzymes had a similar binding affinity for xyloglucan. Xyloglucan was the substrate preferred by FGSG_05851, in contrast to the three other enzymes, which preferred ${\beta}$-glucan or lichenan. Therefore, FGSG_05851 is a xyloglucan-specific glucanase (E.C. 3.2.1.151) rather than an endoglucanase (E.C. 3.2.1.4) with broad substrate specificity. FGSG_11037 displayed a peculiar behavior in that the xyloglucan binding was highly cooperative, with a Hill coefficient of 2.5. Finally, FGSG_05851 essentially degraded xyloglucan into hepta-, octa-, and nonasaccharides, whereas the three other enzymes yielded hepta- and octa-saccharides as well as larger molecules.
Park, Eun-Mi;Han, Yun-Hee;Park, In-Suk;Nam, Bo-Hye;Kong, Hee Jeong;Kim, Woo-Jin;Lee, Sang-Jun;Kim, Young-Ok
한국해양바이오학회지
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제2권2호
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pp.108-112
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2007
A cellulase (endo-${\beta}$-1,4-D-glucanase(E.C.3.2.1.4)) was isolated from the hepatopancreas of abalone Haliotis discus hannai by EST analysis. The abalone cellulase named HdEG compassed 1977 bp, including 195 bp in the 5'untranslated region, 1680 bp in the open reading frame which encodes 560 amino acid residues, and 92 bp in the 3'-untranslated region. The C-terminal region of the HdEG showed 44-52% identity to the catalytic domains of glycoside hydrolase family 9 (GHF9)-cellulases from arthropods and bacteria. The recombinant cellulase, pEHdEG was produced in E. coli with being fused with C-terminal His-tag. The expressed protein showed a single band (~62 kDa) on Western blotting which was consistent with the value (61,878 Da) calculated from the DNA sequence.
The spent mushroom substrate (SMS) of Lentinula edodes that was derived from sawdust bag cultivation was used as materials for controlling Phytophthora blight disease of pepper. Water extract from SMS (WESMS) of L. edodes inhibited mycelial growth of Phytophthora capsici, suppressed Phytophthora blight disease of pepper seedlings by 65% and promoted growth of the plant over 30%. In high performance liquid chromatography (HPLC) analysis, oxalic acid was detected as the main organic acid compound in WESMS and inhibited the fungal mycelium at a minimum concentration of 200 mg/l. In quantitative real-time PCR, the transcriptional expression of CaBPR1 (PR protein 1), CaBGLU (${\beta}$-1,3-glucanase), CaPR-4 (PR protein 4), and CaPR-10 (PR protein 10) were significantly enhanced on WESMS and DL-${\beta}$-aminobutyric acid (BABA) treated pepper leaves. In addition, the salicylic acid content was also increased 4 to 6 folds in the WESMS and BABA treated pepper leaves compared to water treated leaf sample. These findings suggest that WESMS of L. edodes suppress Phytophthora blight disease of pepper through multiple effects including antifungal activity, plant growth promotion, and defense gene induction.
The transcriptional profiles of 'Tamnara' grapevine (Vitis labruscana L.) to Rhizobium vitis were determined using 12,000 gene oligonucleotide microarray chips constructed with 6,776 unigenes based on the EST sequencing. Among them, 95 clones were up-regulated more than three times and 90 were down-regulated more than 5-times in the R. vitis-inoculated grapevines relative to the control vines. Treatment of salicylic acid showed that 337 clones were upregulated and 52 clones were down regulated in grapevines. Microarray analysis, reverse transcription-polymer chain reaction, and slot blot hybridization analysis revealed that 5, 14, and 64 clones were up-regulated and 10, 12, and 61 clones were down-regulated in wounded, salicylic acid-treated, and R. vitis-inoculated 'Tamnara' grapevine leaves, respectively. The expression patterns of ${\beta}$-1,3-glucanase, proline-rich protein, and lipoxygenase genes of 'Tamnara' moderately resistant to R. vitis were similar to those of resistant 'Concord' and 'Delaware' grapevines. However, chalcone synthase genes in 'Tamnara' grapevines showed similar expression patterns to susceptible grapevines 'Neomuscat' and 'Rizamat'. Further expression studies with various clones for each gene should be conducted to elucidate their roles in resistant responses against pathogens or other stimuli in grapevines. These results could provide better resources for understanding the mechanism of defense responses against crown gall disease and clues for identifying new genes that may play a role in defense against R. vitis in grapevines.
Anthracnose development by Colletotrichum musae was observed to be significantly less in the fruits of the banana cultivar 'Embul' (Mysore, AAB) infected with Phyllosticta musarum than in fruits without such infections. Anthracnose disease originates from quiescent C. musae infections in the immature fruit. P. musarum incites minute, scattered spots, referred to as freckles, in the superficial tissues of immature banana peel which do not expand during maturation or ripening. P. musarum does not appear to have a direct suppressive effect on C. musae as conidia of C. musae germinate on both freckled and non-freckled fruit forming quiescent infections. Our investigations have shown that P. musarum infection induced several defence responses in fruit including the accumulation of five phytoalexins, upregulation of chitinase and ${\beta}$-1,3-glucanase, phenylalanine ammonia lyase (PAL) activity and cell wall lignification. $^1H$ and $^{13}C$ NMR spectral data of one purified phytoalexin compared closely with 4'-hydroxyanigorufone. Some of the P. musarum-induced defences that retained during ripening, restrict C. musae development at the ripe stage. This paper examines the potential of P. musarum-induced defences, in the control of anthracnose, the most destructive postharvest disease in banana.
탄수화물분해효소 ${\beta}$-amylase(BA), ${\alpha}$-amylase(BAA), $cellulose+{\beta}$-glucanase(CBG)를 쌀과 함께 침지하여 쌀가루를 제조한 뒤 이 효소처리 쌀가루 100%를 이용하여 쌀쿠키를 제조해 쿠키의 품질 특성을 조사하였다. 효소처리 쌀쿠키 반죽의 밀도는 탄수화물 분해효소의 종류 및 효소처리의 유무에 따른 유의차를 나타내지 않았다. 효소처리 쌀쿠키의 퍼짐성은 비효소처리 쌀쿠키에 비해 크게 나타났으며 효소 ${\beta}$-amylase와 ${\alpha}$-amylase를 이용하여 제조한 쌀가루 쿠키를 제조했을 때 쿠키의 퍼짐성이 큰 것을 확인하였다. 효소처리 쌀쿠키 BA, BAA, CBG의 수분함량은 3.20~3.90%로 비효소처리 쌀쿠키 비해 유의적으로 낮은 수분함량을 나타내었다(P<0.05). 쌀쿠키의 색도 측정결과, 효소처리 쌀쿠키의 L값은 비효소처리 쌀쿠키에 비해 유의적으로 낮은 값을 나타냈으며, a와 b값은 효소처리 쌀쿠키가 비효소처리 쌀쿠키에 비해 유의적으로 낮은 값을 나타내었다(P<0.05). 쌀쿠키의 경도는 효소처리 쌀쿠키가 비효소처리 쌀쿠키에 비해 높은 경도를 나타내었으나 효소의 종류에 따른 차이를 나타내지 않았다. 관능적 특성으로 쌀쿠키의 특성강도 평가에서 쿠키의 고소한 향과 균열의 정도는 효소의 유무 및 효소의 종류에 따른 차이가 나타나지 않았다. 갈색의 정도와 쿠키의 고소한 맛의 강도는 비효소처리 쌀쿠키에 비해 효소처리 쌀쿠키에서 높게 나타났으며 효소 ${\alpha}$-amylase와 ${\alpha}$-amylase로 처리한 쌀가루로 제조한 쌀쿠키(BA)가 갈색의 정도와 쿠키의 고소한 맛이 적당한 강도를 나타내었다. 경도는 효소 처리 쌀쿠키의 강도가 유의적으로 높았으며 효소의 종류에 따른 유의적인 차이는 나타내지 않아 기계적 경도와 관능적인 측면의 경도가 유사한 결과를 나타내었다. 바삭함은 경도의 강도 평가와 유사한 경향을 나타내었다. 기호도 검사 결과에서, 비효소처리 쌀쿠키는 향, 외관, 맛, 조직감 및 전반적인 기호도에서 유의적으로 낮은 기호도를 나타내었다(P<0.05). 효소 ${\alpha}$-amylase를 이용한 쌀쿠키 BAA는 향, 맛 조직감에서 높은 점수를 받아 전반적인 기호도에서 높게 나타나 효소 ${\alpha}$-amylase를 0.1%의 농도로 처리하여 제조한 쌀가루로 쿠키를 제조할 때 일반 쌀쿠키에 비해 향, 맛, 조직감에서도 좋은 기호도를 나타내는 것으로 나타나 쿠키의 소재로 적합할 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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