The effect of opsonization of zymosan with serum on the repiratory burst of haemocytes isolated from the Pacific oyster Crassostrea gigas was investigated. The reactive oxygen species (ROS) produced by the respiratory burst of haemocytes in response to the opsonized or unopsonized zymosan were measured using chemiluminescence (CL). The CL values were increased according to the increment of haemocyte number. The degree of CL amplification by increase of haemocytes from $0.1{\times}10^6$ to $0.5{\times}10^6$ cells/ml was 3-5 times, but comparatively low amplification was elicited by increase of haemocytes from $0.5{\times}10^6$ to $1{\times}10^6$ cells/ml. Chemiluminescences produced by the haemocytes in response to the zymosan opsonized with oyster serum were considerably higher than the CL produced by the haemocytes in response to the unopsonized zymosan.
Phagocytosis is a primary and an essential step of host defense, and is triggered by the interaction of particles with specific receptor of macrophages. In this study, we investigated the effect of extracts of Rudbeckia laciniata (RLE) on the phagocytic activity of macrophage, by monitoring the phagocytosis-associated signal transduction. RLE markedly increased phagocytosis of serum-opsonized zymosan particles (SOZ), while phagocytosis of IgG-opsonized zymosan particles (IOZ) or none-opsonized zymosan particles (NOZ) remained unaffected. However, RLE did not affect the binding of opsonized zymosan particles (OZ) with the cell surface of macrophage. This suggests that RLE may regulate SOZ-induced intracellular signaling during phagocytosis of macrophage. To confirm this hypothesis, we investigated whether RLE was involved in the RhoA-mediated signal transduction during phagocytosis of SOZ. Inhibitors of the RhoA-mediated signaling pathway, such as Y-27632 (for ROCK), ML-7 (for MLCK), and Tat-C3 (for RhoA), totally blocked phagocytosis of SOZ enhanced by RLE, as well as phagocytosis of SOZ. Additionally, RhoA activity was markedly increased when cells were treated with RLE, suggesting that RLE could increase the phagocytic activity of macrophage via RhoA-ROCK/MLCK signal pathway. Thus, RLE may be used to develop functional foods for immunity.
The rhamnan sulfate extracted from green algae seaweed, Monostroma nitidum was characterized as activity in vitro culture assay with macrophages from mice. Rhamnan sulfate indicated that F-4-3 fraction enhanced glucose consumption, as well as the production of nitrogen dioxide and tumor necrosis factor(TNF). F-4-3 fraction was also augmented IL-1 secretion from those macrophages. Effects of the pretreatment of peritoneal macrophages with rhamnan sulfate F-4-3 fraction and several polysaccharides as relative standard on the production of H2O2 induced with unopsonized zymosan A were examined. Pretreatment with polysaccharides inhibited the zymosan A mediated H2O2 production by macrophages. The phorbol myristate acetate (PMA) mediated H2O2 production was not affected by the pretreament. These result suggested that pretreatment of rhamnan sulfate interfered with the interaction of macrophages zymosan A. Rhamnan sulfate inhibited zymosan A mediated production of H**O** by macrophages and F-4-3 Fraction was also activator of macrophages.
The objective of the present study was to test the effect of platelet-activating factor (PAF) on rat alveolar macrophages. PAF alone did not stimulate superoxide secretion from alveolar macrophages. However, PAF $(10^{-5}\;M)$ significantly enhanced phagocytic activator zymosan-induced superoxide secretion from alveolar macrophages. This enhancement of PAF plus zymosan was 30% above the sum of the separate effects of PAF and zymosan. Similarly, PAF $1.3{\times}(10^{-5}\;M)$ was not a direct stimulant of alveolar macrophages, as it had no stimulatory effect on chemiluminescence generation, but potentiated zymosan-induced activation of chemiluminescence, i.e., 162% above the separate effects of each stimulant. PAF $10^{-16}{\pm}10^{-6}\;M$ also failed to stimulate IL-1 production from alveolar macrophages. In contrast, when both PAF $10^{-10}\;M$ and lipopolysaccharide(LPS) $(1 {\mu}g/ml)$ were added together at the initiation of the culture, IL-1 production was significantly increased indicating the potentiative effects of PAF on IL-1 production by alveolar macrophages. Collectively, these data suggest that PAF alone does not activate the release of bioactive products from alveolar macrophages. However, PAF appears to act as a priming mediator that potentiates stimuli-induced macrophage activity. These novel actions of PAF prove its role as a potent mediator of inflammatory and immune responses in the lung.
The change of membrane fluidity in rockfish (Sebastes schlegeli) phagocytes during respiratory burst was investigated. Fluorescence polarization (FP) was used as a measure of membrane fluidity, and 1-(4-trimethylaminophenyl)-6-phenyl-1 .3 ,5-hexatriene (TMA.-DPH) was used us a fluorescent probe. The significantly higher FP values in phagocytes stimulated With zymosan or phurbol myristate acetate (PMA) than unstimulated control phagocytes suggests that membrane fluidity of phagocytcs is decreased during the respiratory burst. The faster decrease of FP value in PMA stimulated phagocytes than in zymosan sumulated phagocytes may be due to bypass of the receptor-mediated stages of functional modulation. which is needed in zymosan stimulated phagocytes.
Kim, Byung-Hak;Reddy, A.M.;Min, Kyung-Rak;Kim, Young-Soo
대한약학회:학술대회논문집
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대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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pp.155.1-155.1
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2003
Polyphenol QGR (quercetin 3-O-beta-(2"-galloyl)-rhamnopyranoside) was isolated from Persicaria lapathifolia (Polygonaceae). In this study, we investigated inhibitory effects of QGR and its building blocks (quercitrin, quercetin and gallic acid) on superoxide anion and NO productions in unopsonized zymosan-stimulated murine macrophages Raw264.7. QGR and quercetin showed potent inhibitory effects on unopsonized zymosan-induced superoxide anion production with IC50 values of 3.2 uM and 4.8 uM, respectively. (omitted)
This experiment is carried out for test whether the addition temperament drugs of Danchisoyo-san have an anti-inflammatory effect and have suppression effect on immunocyte in the state of inflammation which induced by carageenan and zymosan. The freezing lyophilization powder which were extracted from Danchisoyo-san divided low dose group(200mg/kg-DSL) and high dose group(500mg/kg-DSH) and after melting in water, it was orally administered to the mouse. Compared with inflammation induced group which were induced by triggering-inflammation reagent carageenan and zymosan and normal contrast group, we measured the edema decrement effect, macrophage and spleen cell activation. 1. Danchisoyo-san has suppress inflammatory reaction induced by carrageenan. 2. Danchisoyo-san has suppress increasing activation of abdominal cavity macrophage cell in the carrageenan induced inflammation. 3. Danchisoyo-san has suppress increasing activation of spleen cell in the carrageenan induced inflammation. 4. Danchisoyo-san has suppress increasing activation of abdominal cavity macrophage in the zymosan induced inflammation. 5. Danchisoyo-san has suppress increasing activation of spleen cell in the zymosan induced inflammation. Based on the above result, Danchisoyo-san was improved its suppression effect to the inflammatory reaction through the suppression of spleen cell and macrophage activation. So we concluded that Danchisoyo-san is prospected as a anti-inflammatory agent to cure inflammation.
안정 상태 및 활성화된 중성 백혈구에서 ATP는 superoxide 라디칼 생성을 자극하였으나 adenosine은 약간 억제하였다. ATP에 대한 활성화된 중성 백혈구의 반응이 안정상태의 중성 백혈구에서보다 크게 나타났다. 칼슘이 제거된 반응액에서 superoxide 라디칼 생성에 대한 adenosine의 억제효과가 관찰되었으나 ATP는 영향을 주지않았다. Superoxide 라디칼 생성에 대한 ATP의 자극 효과는 adenosine에 의하여 용량에 따라 억제되었다. ATP와 adenosine은 NADPH oxidase 활성도에 영향을 주지 않았다. ATP 또는 adenosine에 의한 superoxide 라디칼 생성의 변경은 다른 triphosphate nucleotide나 nucleoside에 의한 것보다 현저하였다. 활성화된 중성 백혈구에서 ATP와 ADP는 칼슘이온의 흡수를 더 자극하였고 세포질 유리 칼슘농도를 증가시켰으나, adenosine은 칼슘이온의 이동을 억제하였다. APT에 의한 세포질 유리 칼슘이온 농도의 증가는 verapamil에 의하여 효과적으로, tetrodotoxin에 의하여 약간 억제되었다. ATP에 노출된 활성화된 중성 백혈구에서의 superoxide 라디칼 생성에 대한 verapamil 과 tetrodotoxin의 억제 효과는 ATP의 영향이 없는 활성화된 중성 백혈구에서보다 크게 나타났다. Tetraethylammonium chloride는 superoxide 생성에 뚜렷한 영향을 미치지 못했다. CCCP, 2,4-dinitrophenol, diphenylhydantoin과 procaine은 활성화된 중성 백혈구에서 superoxide 라디칼의 생성을 억제하였다. 이들 가운데 CCCP만이 ATP의 자극 효과를 억제하였다. ATP는 활성화된 중성 백혈구에서의 sulfhydryl기의 손실을 더 자극하였으나 adenosin의 영향은 관찰되지 않았다. 이상의 결과로부터 중성 백혈구의 기능적 반응은 부분적으로 purine에 의하여 조절될 것으로 시사되었다. ATP와 adenosine은 칼슘 흡수와 그리고 아마도 세포막 인산화 반응 및 용해성 sulfhydryl기의 산화에 대한 영향을 통하여 활성화된 중성 백혈구의 반응을 더 변경 시킬 수 있을 것으로 추정된다.
In the age of puberty or 20-30th young people who are sensitive to outward appearance, acne is serious problem at beauty and has social and psychological influence on that people. So this experiment is carried out for test whether the addition temperament drugs of Yungyopaedock-san(YP) have an anti-inflammatory effect and have suppression effect on immunocyte in the state of inflammation which induced by acne. The results was as follows. 1. YP has suppress inflammatory reaction induced by carageenan. 2. YP has suppress increasing activation of abdominal cavity macrophage in the carageen and zymosan induced inflammation. 3. YP has suppress increasing activation of spleen cell in the carageenan and zymosan induced inflammation. Based on the above result, YP was improved its suppression effect to the inflammatory reaction through the suppression of spleen cell and macrophage activation. So we concluded that YP is prospected as a anti-inflammatory agent to cure inflammation induced by ance.
Objective : Erysipelas is an acute inflammation caused by pyogenic bacteria. This mainly involves the upper part of dermis. It begins as erythematous patches with tenderness, followed by fever, headache, chills and fatigue etc. It may results in edema, obstruction of lymphatics and sepsis. So this experiment is carried out for test whether the Bojeasodok-um subtracted Scrophulariae Radix, Lasiosphaera seu Calvatia, Isatidis Radix added indigo Naturalis, Lithospermi Radix have an anti-inflammatory effect and have suppression effect on immunocyte in the state of inflammation which induced by Erysipelas. Method : Experimental animals made use of 4-5 week-age(weight 20-25g) ICR(male) mouse. In the breeding farm, the lighting time was controlled from 7:00 am till 7:00 pm, the temperature was controlled So we concluded that BS is prospected as an anti-inflammatory agent to cure inflammation induced bywithin 18-23$23^{\circ}C$ and water and food were not limited.The freezing lyophilization powder which were extracted from Bojesodok-Um divided low dose group(200mg/kg-BSL) and high dose group(500mg/kg-BSH) and after melting in water, it was orally administered to the mouse. Compared with inflammation induced group which were induced by triggering-inflammation reagent Carageenan and Zymosan and normal contrast group, we measured the edema decrement effect,macrophage and spleen cell activation. Result : 1. BS has suppress inflammatory reaction induced by Carageenan. 2. BS has suppress increasing activation of abdominal cavity macrophage in the Carageenan and Zymosan induced inflammation. 3. BS has suppress increasing activation of spleen cell in the Carageenan and Zymosan induced inflammation. Based on the above result, BS was improved its suppression effect to the inflammatory reaction through the suppression of spleen cell and macrophage activation. So we concluded that BS is prospected as an anti-inflammatory agent to cure inflammation induced by Erysipelas.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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