As a basic studies for the laboratory scale production of alfalfa inoculum, Rhizobium meliloti M14 was characterized for its carbon and nitrogen sources, and some parameters for broth cultivation in a chemostat were studied by semi-continuous operation. The result s obtained were as follows. 1. Growth rate of the strain was increased by disaccharides than by monosaccharides tested, and pentoses resulted in poor growth than hexoses. Sugar alcohols including inositol supported the best growth among sugars. 2. Mannitol in the yeast-mannitol-broth was substituted by natural carbon sources such as malt extract or molasses. 3. Ten per cent of fresh yeast water appeared to supply enough amount of growth factor s for the strain, and the effect was equivalent to 0.24 percent of the commercial yeast extract powder. 4. Batch growth of the stain in a chemostat, New Brunswick Micro Ferm 28L, reached in the early stationary growth phase of $5{\sim}7{\times}10^9cells/ml$ after 36 hours of incubation. The culture at this stage was switched to semi-continuous cultivation, and the culture broth of four-fifth of the working volume was recovered every 24 hours when the maximal count was obtained.
To improve yeast strains for bioethanol production, yeasts with ethanol tolerance, thermotolerance, and ${\beta}$-1,3-glucanase activity were bred using yeast genome shuffling. Saccharomyces cerevisiae $BY4742{\Delta}exg1$/pAInu-exgA, which has extracellular ${\beta}$-1,3-glucanase activity, and the Aspergillus oryzae and S. cerevisiae YKY020 strains, which exhibit ethanol tolerance and thermotolerance, were fused by yeast protoplast fusion. Following cell fusion, four candidate cells (No. 3, 9, 11, and 12 strains) showing thermotolerance at $40^{\circ}C$ were selected, and their ethanol tolerance (7% ethanol concentration) and ${\beta}$-1,3-glucanase activity were subsequently analyzed. All the phenotypes of the two parent cells were simultaneously expressed in one (No. 11) of the four candidate cells, and this strain was called BYK-F11. The BYK-F11 fused cell showed enhanced cell growth, ethanol tolerance, ${\beta}$-1,3-glucanase activity, and ethanol productivity compared with the $BY4742{\Delta}exg1$/pAInu-exgA and YKY020 strains. The results prove that a new yeast strain with different characters and the same mating type can be easily bred by protoplast fusion of yeasts.
Park, Mirye;Suh, Sung-Suk;Hwang, Jinik;Kim, Donggiun;Park, Jongbum;Chung, Young-Jae;Lee, Taek-Kyun
Journal of Life Science
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v.24
no.9
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pp.995-1000
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2014
The studies of marine viruses in terms of viral isolation and detection have been limited due to the high mutation rate and genetic diversity of marine viruses. Of the modern methods currently used to detect marine viruses, serological methods based on enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) are the most common. They depend largely on the quality of the antibodies and on highly purified suitable antigens. Recently, a new experimental system for using viral capsid protein as an antigen has been developed using the yeast surface display (YSD) technique. In the present study, the capsid protein gene of the red-spotted grouper nervous necrosis virus (RGNNV) was expressed and purified via YSD and HA-tagging systems, respectively. Two regions of the RGNNV capsid protein gene, RGNNV1 and RGNNV2, were individually synthesized and subcloned into a yeast expression vector, pCTCON. The expressions of each RGNNV capsid protein in the Saccharomyces cerevisiae strain EBY100 were indirectly detected by flow cytometry with fluorescently labeled antibodies, while recognizing the C-terminal c-myc tags encoded by the display vector. The expressed RGNNV capsid proteins were isolated from the yeast surface through the cleavage of the disulfide bond between the Aga1 and Aga2 proteins after ${\beta}$-mercaptoethanol treatment, and they were directly detected by Western blot using anti-HA antibody. These results indicated that YSD and HA-tagging systems could be applicable to the expressions and purification of recombinant RGNNV capsid proteins.
Jun-Tae Kim;Sung-Ho Cho;Do-Youn Jeong;Young-Soo Kim
Food Science and Preservation
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v.30
no.1
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pp.132-145
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2023
In this study, culture conditions were optimized to confirm the feasibility of Acetobacter pasteurianus as a starter for fermentation vinegar. Acetobacter pasteurianus strain can be used as a food ingredient. The optimal temperature and pH conditions of the selected Acetobacter pasteurianus SRCM101388 were 28℃ and pH 6.00, respectively. The response surface methodology (RSM) was used to optimize the composition of the medium, and Plackett-Burman design (PBD) was used to obtain the effective selection of culture medium, resulting in that glucose, sucrose, and yeast extract had the highest effect on increasing biomass. The optimal concentration, which was performed by central composite design (CCD), were determined to be 10.73 g/L of glucose, 3.98 g/L of sucrose, and 18.73 g/L of yeast extract, respectively. The optimal concentrations of trace elements for the production of biomass were found to be 1 g/L of ammonium sulfate, 0.5 g/L of magnesium sulfate, 2 g/L of sodium phosphate monobasic, 2 g/L of sodium phosphate dibasic, and the final optimized medium was pH 6.10. When incubated in a 5 L jar fermenter, the SRCM101388 strain showed a faster-dissolved oxygen (DO) reduction at a lower agitation rate (rpm), and it was able to grow even at reduced DO level when aeration was maintained. The amount of final biomass produced was 2.53±0.12×109 CFU/mL (9.40±0.02 log CFU/mL) when incubated for 18 hours at 150 rpm, 0.5 vvm, pH 6.0, and 28℃.
One osmotolerant strain from among 44 yeast isolates was selected based on its growth abilities in media containing high concentrations of sucrose. This selected strain, named SK-ENNY, was identified as Meyerozyma guilliermondii by sequencing the internal transcribed spacer regions and partial D1/D2 large-subunit domains of the 26S ribosomal RNA. SK-ENNY was utilized to produce high-fructose glucose syrup (HFGS) from sucrose-containing biomass. Conversion rates to HFGS from 310-610 g/l of pure sucrose and from 75-310 g/l of sugar beet molasses were 73.5-94.1% and 76.2-91.1%, respectively. In the syrups produced, fructose yields were 89.4-100% and 96.5-100% and glucose yields were 57.6-82.5% and 55.3-79.5% of the theoretical values for pure sucrose and molasses sugars, respectively. This is the first report of employing M. guilliermondii for production of HFGS from sucrose-containing biomass.
A bacterium strain called Bacillus coagulans was isolated from an industrial wastewater drainage and selected for its antimicrobial activities against bacteria and fungi. Characterization studies strongly suggested that this strain is Bacillus coagulans. Antimicrobial activity was found against gram-positive, gram-negative bacteria and yeast strain. Maximal activity was observed after 24 h when incubated at $30^{\circ}C$ and pH 8. The activity was found to be stable at $75^{\circ}C$ for 30 min and at pH range of 2-12. Analysis of the antimicrobial compound by SDS-PAGE suggested a molecular mass of approximately 7.5 KDa. The substance was characterized as a bacteriocin, because of its proteinaceous nature and low molecular weight. Our bacteriocin could potentially be used as a food preservative, because of its thermostable property and broad antimicrobial spectrum.
In order to obtain a strain of producing lipase which has resistance against alkaline and detergent, a screening test was carried out. Among 500 strains isolated from soil samples, the strain J-19 was selected for this study. The composition of the optimum medium for the highest lipase production was 2.0% glycerin, 1.0% corn steep liquor, 2.0% yeast extract, 0.1% $MgSO_4$$7H_2O$, 0.2% $K_2HPO_4$, 1.5% soybean oil and 0.1% LAS(linear alkylbenzene sulfonate) with initial pH value of 10.0 and 3-day cultivation at $25^{\circ}C$. The lipase activity of the strain J-19 under optimal condition was 3.3. units/ml, which was increased about 1.3-fold than that of basal medium.
A marine bacterium Bacillus cereus ASK202, agarase producing strain, was treated with some mutagenic agents, ultraviolte(UV), 1-methyl-3-nitro-1-nitrosoguanidine(NTG), and ethyl methane sulfonate(EMS), several times for the increasing of the agarase production After mutagen treatment, we isolated one mutant strain treated with NTG showed the highest stability and agarase productivity and named as Bacillus cereus ASK202-N3. This Bacillus cereus ASK202-N3 strain was well grown in the modified marine medium containing 0.5%(w/v) agar, 0.3%(w/v) yeast extract, and 5.0%(w/v) NaCl, and the optimal initial pH, temperature and culture time were 7.8, $25^{\circ}C$ and 32h, respectively. In the optimal culture conditions, the agarase production was increased to 5.3 fold(850units/L) compared to that of the wild type.
The purpose of the present study was to investigate the influence of cultural and environmental parameters affecting the growth and bioactive metabolite production of the rare strain VUK-10 of actinomycete Pseudonocardia, which exhibits a broad spectrum of in vitro antimicrobial activity against bacteria and fungi. Production of bioactive metabolites by the strain was high the in modified yeast extract-malt extract-dextrose (ISP-2) broth, as compared to other tested media. Glucose (1%) and tryptone (0.25%) were found to be the most suitable carbon and nitrogen sources, respectively, for optimum production of growth and bioactive metabolites. Maximum production of bioactive metabolites was found in the culture medium with initial pH 7 incubated with the strain for four days at $30^{\circ}C$, under shaking conditions. This is the first report on the optimization of bioactive metabolites by Pseudonocardia sp. VUK-10.
The amylolytic yeasts were isolated from natural sources. Among them, a strain FRI YO-32 was selected as one of the genetically potential microorganisms and was identified as a strain of Hansenula anomala var anomala. Genetic markers were introduced into the isolated haploid strains of the strain FRI YO-32 and Saccharomyces cerevisiae by conventional mutagenic procedures with EMS or MNNG.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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